[發明專利]一種流產衣原體的細胞培養方法及應用有效
| 申請號： | 202010729728.3 | 申請日： | 2020-07-27 |
| 公開（公告）號： | CN111662854B | 公開（公告）日： | 2022-02-11 |
| 發明（設計）人： | 周繼章;李兆才;劉萍;劉東慧 | 申請（專利權）人： | 中國農業科學院蘭州獸醫研究所 |
| 主分類號： | C12N1/20 | 分類號： | C12N1/20;C12N5/077;C12N5/071;C12R1/01 |
| 代理公司： | 北京高沃律師事務所 11569 | 代理人： | 董大媛 |
| 地址： | 730000 甘肅*** | 國省代碼： | 甘肅;62 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 流產 衣原體 細胞培養 方法 應用 | ||
【權利要求書】：
1.一種流產衣原體的細胞培養方法，包括以下步驟：
將待感染細胞以每孔1×106個細胞的密度接種在6孔板上，培養過夜，使待感染細胞貼壁并長成單層；將長成單層的待感染細胞進行洗滌，得到洗滌后的細胞；
將流產衣原體接種液與DNA轉染試劑Lipofectamine 2000混合，靜置，接種到洗滌后的細胞上，孵育，吸棄孵育后液體，得到感染后的細胞；
感染后的細胞使用培養液繼續培養48～72h；
所述待感染細胞包括小鼠成纖維細胞McCoy、小鼠成纖維細胞L929，小倉鼠腎細胞BHK-21或人宮頸癌細胞HeLa；
所述靜置的時間為10min；
所述孵育的條件為37℃，30～60min。
2.根據權利要求1所述的培養方法，其特征在于，所述流產衣原體接種液為含流產衣原體的無血清培養液，所述無血清培養液包括RPMI-1640。
3.根據權利要求1所述的培養方法，其特征在于，所述DNA轉染試劑Lipofectamine2000與流產衣原體接種液的體積比為1：(250～4000)。
4.DNA轉染試劑Lipofectamine 2000在增強流產衣原體對權利要求1～3任一項所述細胞培養方法培養的細胞的感染能力中的應用。
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