[發(fā)明專利]一種高載量核酸提取用均一磁性微球的制備方法

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• 申請日: 2020-07-24
• 公開（公告）號: CN112023841A
• 公開（公告）日: 2020-12-04
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 陽承利
• 申請（專利權(quán)）人: 無錫邁科為生物科技有限公司
• 主分類號: B01J13/14
• 分類號: B01J13/14;C12N15/10
• 代理公司: 北京科家知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 11427
• 代理人: 宮建華

1.一種高載量核酸提取用均一磁性微球的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：

(1)制備多孔磁性微球；

具體為：a、制備油酸鐵；b、將聚合物種子加入含有穩(wěn)定劑的水溶液中，充分攪拌，形成均勻分散的種子懸浮液；c、將油酸鐵和單體加入穩(wěn)定劑/溶劑混合溶液中，攪拌均勻，形成磁性單體懸浮液；d、將引發(fā)劑加入含有穩(wěn)定劑的水溶液中，乳化，形成引發(fā)劑懸浮液；e、在聚合溫度下，將磁性單體懸浮液和引發(fā)劑懸浮液滴加到種子懸浮液中使種子生長，其中所述磁性單體懸浮液的滴加的速度為0.2～3ml/min，所述引發(fā)劑懸浮液的滴加速度為1～6ml/min，保持溫度在60～80℃下恒溫反應(yīng)60-240分鐘；在達到預(yù)設(shè)的微球粒徑后停止加入所述磁性單體懸浮液和引發(fā)劑懸浮液，第一次升溫聚合反應(yīng)下即可得到磁性聚合微球；f、高溫煅燒所述磁性聚合微球，得到多孔磁性微球。

(2)將所述多孔磁性微球的表面包覆二氧化硅得到多孔磁性二氧化硅微球；

具體為：g、合成二氧化硅分散液；h、將所述多孔磁性微球中加入所述二氧化硅分散液，在第二次聚合反應(yīng)下，得到多孔磁性二氧化硅微球。

2.如權(quán)利要求1所述的高載量核酸提取用均一磁性微球的制備方法，其特征在于，所述穩(wěn)定劑為非離子表面活性劑、陰離子表面活性劑和陽離子表面活性劑的至少一種，所述非離子表面活性劑選自脂肪酸甘油酯、失水山梨醇脂肪酸、聚氧乙烯失水山梨醇脂、聚氧乙烯脂肪酸酯和聚氧乙烯醚；所述陰離子表面活性劑選自烷基硫酸鹽、烷基苯硫磺酸鹽和烷基聯(lián)苯醚二磺酸鹽；所述陽離子表面活性劑為季銨鹽類表面活性劑。

3.如權(quán)利要求1所述的高載量核酸提取用均一磁性微球的制備方法，其特征在于，所述單體為苯乙烯、二乙烯苯、2,4-二氯苯乙烯、丙烯酸、丙烯酰胺、甲基丙烯酸甲酯、丙烯酸甲酯、丙烯酸乙酯、醋酸乙烯酯、甲基丙烯酸縮水甘油酯或其衍生物中的一種或多種。

4.如權(quán)利要求1所述的高載量核酸提取用均一磁性微球的制備方法，其特征在于，所述聚合物種子為聚苯乙烯或苯乙烯-二乙烯基苯共聚物。

5.如權(quán)利要求1所述的高載量核酸提取用均一磁性微球的制備方法，其特征在于，所述引發(fā)劑為水溶性引發(fā)劑，具體為過硫酸鉀、過硫酸銨、偶氮二氰基戊酸或亞硫酸氫鈉的一種。

6.如權(quán)利要求1所述的高載量核酸提取用均一磁性微球的制備方法，其特征在于，所述二氧化硅分散液為硅酸鹽、正硅酸甲酯，正硅酸乙酯，正硅酸丁酯，正硅酸丙酯，烷基三甲氧基硅烷，烷基三乙丙基硅烷，烷基三乙氧基硅烷，二烷基二甲氧基硅烷，二烷基二乙氧基硅烷，苯基三甲氧基硅烷，苯基三乙氧基硅烷，胺丙基三甲氧基硅烷，環(huán)氧丙基三甲氧基硅烷中的至少一種的混合物溶于溶劑中形成。

7.如權(quán)利要求6所述的高載量核酸提取用均一磁性微球的制備方法，其特征在于，所述硅酸鹽為硅酸鈉、硅酸鋁、硅酸鎂、硅酸鉀和硅酸鈣的一種。

8.一種多孔磁性微球，其特征在于，所述多孔磁性微球由如權(quán)利要求1～8所述方法制備。

9.如權(quán)利要求8所述的多孔磁性微球，其特征在于，所述多孔磁性微球的粒徑大小為0.1-450μm，孔徑大小為5～100nm。

10.如權(quán)利要求1所述的高載量核酸提取用均一磁性微球的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：

(1)制備多孔磁性微球；

具體為：a、制備油酸鐵；b、將聚合物種子加入含有穩(wěn)定劑的水溶液中，充分攪拌，形成均勻分散的種子懸浮液；c、將油酸鐵和單體加入穩(wěn)定劑/溶劑混合溶液中，攪拌均勻，形成磁性單體懸浮液；d、將引發(fā)劑加入含有穩(wěn)定劑的水溶液中，乳化，形成引發(fā)劑懸浮液；e、在聚合溫度下，將磁性單體懸浮液和引發(fā)劑懸浮液滴加到種子懸浮液中使種子生長，其中所述磁性單體懸浮液的滴加的速度為1.6ml/min，所述引發(fā)劑懸浮液的滴加速度為3.5ml/min，保持溫度在70℃下恒溫反應(yīng)150分鐘；在達到預(yù)設(shè)的微球粒徑后停止加入所述磁性單體懸浮液和引發(fā)劑懸浮液，第一次升溫聚合反應(yīng)下即可得到磁性聚合微球；f、高溫煅燒所述磁性聚合微球，得到多孔磁性微球。

(2)將所述多孔磁性微球的的表面包覆二氧化硅得到多孔磁性二氧化硅微球；

具體為：g、合成二氧化硅分散液；h、將所述多孔磁性微球中加入所述二氧化硅分散液，在第二次聚合反應(yīng)下，得到多孔磁性二氧化硅微球。