[發明專利]檢測血液中雷帕霉素含量的方法

在審

• 申請號: 202010718458.6
• 申請日: 2020-07-23
• 公開（公告）號: CN111693635A
• 公開（公告）日: 2020-09-22
• 發明（設計）人: 翟瑞雪;賈永娟;解娜;倪君君
• 申請（專利權）人: 北京和合醫學診斷技術股份有限公司
• 主分類號: G01N30/06
• 分類號: G01N30/06;G01N30/88
• 代理公司: 濟南信達專利事務所有限公司 37100
• 代理人: 李世喆

1.檢測血液中雷帕霉素含量的方法，其特征在于，包括：

利用高效液相色譜串聯質譜儀，在一定檢測條件下，分別檢測至少三個標準溶液，得到各個標準溶液的色譜圖，其中，任一標準溶液中均含有濃度已知的雷帕霉素標準品及內標物，不同標準溶液中雷帕霉素標準品的濃度不同；

根據各個標準溶液的色譜圖，擬合得到雷帕霉素的標準曲線方程；

將一定量的內標工作液和一定量的血液樣本混勻，加入一定量的硫酸鋅水溶液并混勻，再加入一定量的乙腈并混勻，離心取上清液得到待測樣本，其中，內標工作液中含有濃度已知的內標物；

利用高效液相色譜串聯質譜儀，在相同檢測條件下檢測待測樣本，得到待測樣本的色譜圖；

根據待測樣本的色譜圖和雷帕霉素的標準曲線方程，計算血液樣本中雷帕霉素的含量；

其中，所述檢測條件中的液相條件包括：Waters XBridge C18色譜柱，色譜柱的長度為100mm、內徑為2.1mm、填料粒徑為5μm，流動相A為甲醇，流動相B為含5-10mmol/L乙酸銨和0.1-0.2％甲酸的水溶液，洗脫過程采用梯度洗脫的方式，分析時間為2.8-3.5min，柱溫為30-45℃，流速為0.2-0.4mL/min，進樣量為5-15μL。

2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，

流動相B為含5mmol/L乙酸銨和0.1％甲酸的水溶液，分析時間為3min，柱溫為40℃，流速為0.4mL/min，進樣量為10μL。

3.根據權利要求2所述的方法，其特征在于，

所述洗脫過程包括：

時間(min)	流動相A(％)	流動相B(％)
初始	60-80	40-20
0.0	90-100	10-0
0.9	90-100	10-0
0.91	60-80	40-20
3.0	60-80	40-20

。