[發明專利]一種利用蒙脫石/碳酸鹽礦化菌聚集體處理土壤中鍶的方法

有效

• 申請號: 202010716212.5
• 申請日: 2020-07-23
• 公開（公告）號: CN111872101B
• 公開（公告）日: 2021-12-14
• 發明（設計）人: 竹文坤;李顯寅;贠朝樂;董云;陳濤
• 申請（專利權）人: 西南科技大學
• 主分類號: B09C1/08
• 分類號: B09C1/08;B09C1/10;C12N1/20;C12N11/14;C12R1/07
• 代理公司: 北京遠大卓悅知識產權代理有限公司 11369
• 代理人: 張忠慶

1.一種利用蒙脫石/碳酸鹽礦化菌聚集體處理土壤中鍶的方法，其特征在于，包括下列步驟：

S1. 將采集的放射性土壤樣品放入0.9%的生理鹽水中進行震蕩培育后，涂布于篩選培養基平板中，在28℃-35℃下培養30h，待微生物長出后采用平板劃線方式對微生物進行純化；將純化至4代以上的微生物接種于富集培養基中，在28℃-35℃、180rpm下震蕩培育2-3天，根據微生物生長情況，從富集培養基中篩選出碳酸鹽礦化菌株；

S2. 稱取蒙脫石放入球磨機中進行6-8h球磨后進行滅菌處理，制得蒙脫石粉；向蒙脫石粉中加入擴大培養基攪拌使蒙脫石分散于擴大培養基上，再接種碳酸鹽礦化菌株進行30℃擴大培養、離心、去除上清液，得蒙脫石/碳酸鹽礦化菌聚集體，最后將蒙脫石/碳酸鹽礦化菌聚集體密封避光，于4℃下貯藏備用；

S3. 將蒙脫石/碳酸鹽礦化菌聚集體分批等量加入到含鍶土壤中，每一次加入蒙脫石/碳酸鹽礦化菌聚集體混合攪拌5min后，加入蛋白胨、尿素和瓊脂粉混合物升溫至30℃-35℃，常溫靜置2h；再加入10mL鹽酸氯化鈉溶液攪拌5min；隨后進行二次加入，重復上述操作直至蒙脫石/碳酸鹽礦化菌聚集體被全部加入，室溫下靜置6-8天。

2.如權利要求1所述的一種利用蒙脫石/碳酸鹽礦化菌聚集體處理土壤中鍶的方法，其特征在于，在步驟S1中，所述放射性土壤樣品來自中核821放射性污染土壤。

3.如權利要求1所述的一種利用蒙脫石/碳酸鹽礦化菌聚集體處理土壤中鍶的方法，其特征在于，在步驟S1中，所述震蕩培育具體為：在25-30℃下培育24-48h。

4.如權利要求1所述的一種利用蒙脫石/碳酸鹽礦化菌聚集體處理土壤中鍶的方法，其特征在于，在步驟S1中，所述篩選培養基包括下列重量份的原料：0.8-1.2份蛋白胨、1.8-2.2份磷酸二氫鉀，4.5-5.5份氯化鈉、0.8-1.2份葡萄糖，15-18份尿素，0.25-0.33份牛肉粉，加入無菌水，并將篩選培養基pH調至7.0-7.5；所述富集培養基包括下列重量份的原料：1.2-1.5份蛋白胨、5.0-6.0份氯化鈉、0.3-0.5份牛肉粉，加入蒸餾水，并將富集培養基pH調至7.0-7.2。

5.如權利要求1所述的一種利用蒙脫石/碳酸鹽礦化菌聚集體處理土壤中鍶的方法，其特征在于，在步驟S2中，所述擴大培養基為：1.2-1.5份蛋白胨、5.0-6.0份氯化鈉、0.3-0.5份牛肉粉，1.8-2.2份磷酸二氫鉀，瓊脂粉15-20份；所述離心條件為：在4℃、8000rpm下離心8min；所述蒙脫石與碳酸鹽礦化菌株的質量比為8-10：5-8。

6.如權利要求1所述的一種利用蒙脫石/碳酸鹽礦化菌聚集體處理土壤中鍶的方法，其特征在于，在步驟S3中，所述蛋白胨、尿素和瓊脂粉的質量比為1:10:2。

7.如權利要求1所述的一種利用蒙脫石/碳酸鹽礦化菌聚集體處理土壤中鍶的方法，其特征在于，在步驟S3中，所述混合物與蒙脫石/碳酸鹽礦化菌聚集體與含鍶土壤的質量比為3-5：13-18：80-100。

8.如權利要求1所述的一種利用蒙脫石/碳酸鹽礦化菌聚集體處理土壤中鍶的方法，其特征在于，所述鹽酸氯化鈉溶液中鹽酸的濃度為0.002-0.005mol/L，氯化鈉的質量濃度為0.05-0.08%。

9.如權利要求1所述的一種利用蒙脫石/碳酸鹽礦化菌聚集體處理土壤中鍶的方法，其特征在于，在步驟S3中，所述含鍶土壤的水分為20-30%，鍶含量為80-90mg/kg。

10.如權利要求1所述的一種利用蒙脫石/碳酸鹽礦化菌聚集體處理土壤中鍶的方法，其特征在于，所述S2中的蒙脫石可替換為改性蒙脫石，所述改性蒙脫石的制備方法具體為：稱取蒙脫石及其質量為蒙脫石質量20%的氧化石墨烯，將氧化石墨烯分散在濃度為2.5%的醋酸中進行20-30min超聲，再將蒙脫石加入，在55℃下繼續超聲1-2h，抽濾，洗滌，得蒙脫石/氧化石墨烯復合物；將質量為蒙脫石/氧化石墨烯復合物質量10%的環糊精、5%的交聯劑與蒙脫石/氧化石墨烯復合物及水在60℃下反應1h，抽濾，冷凍干燥；將干燥后的物料放入球磨機中與粘度為0.20Pa·s脫乙酰甲殼素進行低溫球磨，即得改性蒙脫石。