[發(fā)明專利]一種植物根際促生菌株Gxun-20及其在植物促生中的應(yīng)用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 202010704828.0
• 申請日: 2020-07-21
• 公開（公告）號: CN111849815B
• 公開（公告）日: 2022-11-18
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 姜明國;申乃坤;楊立芳;王一兵;豐景;許劍
• 申請（專利權(quán)）人: 廣西民族大學(xué)
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12N1/02;A01C1/00;A01G22/00;A01C21/00;C12R1/01
• 代理公司: 南寧深之意專利代理事務(wù)所(特殊普通合伙) 45123
• 代理人: 徐國華

1.一種植物根際促生菌株Gxun-20，其特征在于：所述的植物根際促生菌株Gxun-20為短芽孢桿菌，保藏于廣東省微生物菌種保藏中心，地址：中國，廣州，廣東省廣州市先烈中路100號大院59號樓5樓，分類學(xué)名稱為Brevibacillus parabreivs，保藏編號為GDMCC NO：60686，保藏日期為2019年6月13日。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的植物根際促生菌株Gxun-20，其特征在于：菌體革蘭氏染色陽性，菌落形態(tài)為圓形、平滑、凸起、白色。

3.一種如權(quán)利要求1所述的植物根際促生菌株Gxun-20在植物促生中的應(yīng)用，其特征在于：包括以下步驟：

（1）挑選飽滿、無破損、質(zhì)量良好的種子，首先用50℃溫水浸泡10 min后倒出，再用無菌水浸泡8 h，最后用質(zhì)量濃度為10％的Na₃PO₄溶液浸種10～15 min；將浸泡好的種子用清水沖洗干凈并控去水分，放置于鋪好紙巾的培養(yǎng)皿中，然后噴灑無菌水浸潤；最后將其放入黑暗、25℃通風(fēng)恒溫培養(yǎng)箱中，每天噴灑無菌水保持濕潤，直至大部分種子露白，得到催好芽的種子；

（2）取大棚表層土與木屑、有機肥按1:1:1混合，消毒滅菌制備得到育苗營養(yǎng)土；先用無菌水澆透育苗營養(yǎng)土，再把催好芽的種子接種至育苗營養(yǎng)土里，蓋上一層薄的育苗營養(yǎng)土，最后鋪蓋透明地膜，等到75～80%的幼苗破土而出時及時揭掉透明地膜，使幼苗順利進行光合作用；

（3）當(dāng)幼苗長出3～4片葉子且生長狀態(tài)穩(wěn)定后，采用菌液灌根的方式向每株幼苗澆灌10mL稀釋5～10倍的發(fā)酵菌液，每7d澆一次發(fā)酵菌液，一共處理4～5次即可。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的植物根際促生菌株Gxun-20在植物促生中的應(yīng)用，其特征在于，所述的發(fā)酵菌液的發(fā)酵方法，包括以下步驟，

（1）取植物根際促生菌株Gxun-20接種于LB液體培養(yǎng)基中，在200r/min的搖床中30℃恒溫振蕩培養(yǎng)進行活化，每隔2h測定培養(yǎng)液的OD₆₀₀值，繪制生長曲線；

（2）在滅菌后的R₂A液體培養(yǎng)基中加入2mg/L的L-色氨酸，調(diào)節(jié)初始pH為6.0～6.5，然后按照5μL/mL培養(yǎng)基的接種量，將對數(shù)生長期的活化后的植物根際促生菌株Gxun-20接入，于200r/min搖床中25～30℃下振蕩發(fā)酵26～40h，得到發(fā)酵菌液。

5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的植物根際促生菌株Gxun-20在植物促生中的應(yīng)用，其特征在于，所述的R₂A液體培養(yǎng)基配方如下：

葡萄糖0.5g、酵母粉0.5g、酪蛋白氨基酸0.5g、K₂HPO₄ 0.1～0.4g、丙酮酸鈉0.3g、胰蛋白胨0.5g、可溶性淀粉0.05～0.5g、L-色氨酸1.5～2.5mg、七水硫酸鎂0.05g，溶于1000mL水，用K₂HPO₄與KH₂PO₄將pH值調(diào)至6.0～6.5，于121℃條件下滅菌20 min；

或者，所述的R₂A液體培養(yǎng)基配方為：

蔗糖0.4g、玉米漿0.5g、酪蛋白氨基酸0.5g、氯化鈉0.1g、丙酮酸鈉0.3g、胰蛋白胨0.5g、可溶性淀粉0.5g、L-色氨酸2mg、七水硫酸鎂0.05g，溶于1000mL水，用K₂HPO₄與KH₂PO₄將pH值調(diào)至6.0～6.5，于121℃條件下滅菌20 min。

6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的植物根際促生菌株Gxun-20在植物促生中的應(yīng)用，所述的蔗糖的質(zhì)量濃度為0.4%；所述的玉米漿的質(zhì)量濃度為0.05%；所述的可溶性淀粉的質(zhì)量濃度為0.05%。

7.根據(jù)權(quán)利要求3所述的植物根際促生菌株Gxun-20在植物促生中的應(yīng)用，所述的有機肥氮含量為0.7%～0.8%，磷含量為0.45%～0.6%，鉀含量為0.4%～0.5%。