[發明專利]一種體外誘導免疫抑制性髓系抑制細胞及其制備和應用

有效

• 申請號: 202010700358.0
• 申請日: 2020-07-20
• 公開（公告）號: CN111808800B
• 公開（公告）日: 2022-08-26
• 發明（設計）人: 何彥;凌林;周也荻;任悅容;陳百華
• 申請（專利權）人: 中南大學湘雅二醫院
• 主分類號: C12N5/077
• 分類號: C12N5/077;A61K35/15;A61P37/06
• 代理公司: 長沙市融智專利事務所(普通合伙) 43114
• 代理人: 盛武生;魏娟

本發明涉及一種體外誘導免疫抑制性髓系抑制細胞的制備獲取方法，屬于細胞生物學及臨床應用領域；本發明具體公開了一種免疫抑制性髓系抑制細胞(Myeloid?derived suppressor cells，MDSCs)，來源于健康捐獻個體，通過體外藥物誘導刺激產生免疫抑制性，及其制備提純方法；本發明發現體外誘導免疫抑制性髓系抑制細胞在體外能有效抑制CD4⁺T細胞增殖效應，減輕角膜移植后排斥反應，并且有效抑制病理性新生血管的生長，本發明的上述應用可以制備有效地治療角膜移植后排斥及有效抑制病理性新生血管生成的生物制劑。

技術領域

本發明涉及一種體外誘導免疫抑制性髓系抑制細胞的制備獲取方法，屬于細胞生物學及臨床應用領域。

背景技術

髓樣抑制細胞(Myeloid-Derived Suppressor Cells，MDSC)是一種骨髓來源細胞形態幼稚的髓系祖細胞，在一定環境下可以向下游分化為成熟的粒細胞、巨噬細胞或樹突狀細胞。在小鼠體內，MDSC特征性共表達表面分子髓系分化抗原(Myeloid-cell LineageDifferentiation Antigen-1，Gr-1)和CD11b(即αM-integrin)。根據MDSC中Gr-1的亞群Ly6C及Ly6G的表達可大致分為粒性MDSC(CD11b⁺Gr-1⁺Ly6G^highLy6C^-，PMN-MDSC)和單核性MDSC(CD11b⁺Gr-1⁺Ly6G^-Ly6C^high，M-MDSC)兩群(VegliaF,Perego M,GabrilovichD.Myeloid-derived suppressor cells coming of age.Nat Immunol.2018；19(2):108-119.)。

研究報道，在腫瘤和炎癥狀態下，MDSC可以誘導調節性T細胞(RegulatoryT cell，Treg)分化增殖，影響Treg/Th17平衡，促進M2巨噬細胞極化，增強Arg-1、Nos2和Nox2的表達，通過細胞直接接觸和細胞分泌物間接作用，抑制效應性T細胞(CD11b⁺Gr-1⁺Ly6G^-Ly6C^high，M-MDSC)兩群(VegliaF,Perego M,Gabrilovich D.Myeloid-derived suppressorcells coming of age.Nat Immunol.2018；19(2):108-119.)。生理狀態下正常小鼠骨髓分離的CD11b⁺Gr-1⁺MDSC(MDSC,nMDSC)沒有免疫抑制功能，而在病理狀態下體內誘導的MDSC，如膿毒血癥小鼠及負荷肝癌小鼠骨髓內分選出的CD11b⁺Gr-1⁺MDSC，具有強大的免疫抑制性，可以有效抑制CD4⁺及CD8⁺T細胞增殖，且具有一定的劑量相關性(Yan He,BeibeiWang,Bei Jia,Jieying Guan,Hui Zeng*,Zhiqiang Pan*.Effects of adoptivetransferring different sources of Myeloid Derived Suppressor cells in micecorneal transplant survival.Transplantation 2015；99:2102–2108.)，但體內病理環境誘導具有抑制功能性MDSC有效但存在高風險。