[發明專利]烯丙基硫醚在制備促進銅綠假單胞菌葉酸生物合成制劑中的應用

有效

• 申請號: 202010698336.5
• 申請日: 2020-07-20
• 公開（公告）號: CN111926048B
• 公開（公告）日: 2023-09-26
• 發明（設計）人: 李文茹;曾桃花;張志清;謝小保;李素娟;施慶珊
• 申請（專利權）人: 廣東省微生物研究所（廣東省微生物分析檢測中心）
• 主分類號: C12P17/18
• 分類號: C12P17/18;C12N1/38;C12N1/20;C12R1/385
• 代理公司: 廣州科粵專利商標代理有限公司 44001
• 代理人: 劉明星;朱聰聰

本發明公開了烯丙基硫醚在制備促進銅綠假單胞菌葉酸生物合成制劑中的應用。本發明發現DAS不會抑制銅綠假單胞菌PAO1菌株的生長，但能夠使該菌葉酸合成通路中的關鍵基因表達上調，提高該菌的葉酸生物合成水平。因此烯丙基硫醚可應用于細菌發酵生產葉酸工業中，提高葉酸的發酵產量。

技術領域：

本發明屬于細菌發酵技術領域，具體涉及烯丙基硫醚在制備促進銅綠假單胞菌葉酸生物合成制劑中的應用。

背景技術：

大蒜是常見的食物，其用作民間醫藥的歷史已有幾千年?，F代科學研究證明，大蒜精油中含硫化合物具有較強的抗菌消炎作用，對多種細菌、真菌和病毒均有抑制作用。烯丙基硫醚(Diallyl?sulfide，DAS)是大蒜精油中一種含硫豐富的化合物。葉酸，即維生素B₉，它是一種水溶性的B族維生素。葉酸在綠葉蔬菜、酵母和動物肝臟中含量豐富，是人體必需的一種非常重要的維生素，但人類自身不能合成葉酸，必須依靠食物供給。人體缺乏葉酸會引起紅細胞異常，貧血以及白細胞的減少。葉酸也是胎兒生長發育不可缺少的營養元素，孕婦缺乏葉酸可引起胎兒發育缺陷和畸形。

發明內容：

本發明的目的是提供一種烯丙基硫醚在制備促進銅綠假單胞菌葉酸生物合成制劑中的應用。

本發明通過實驗表明，烯丙基硫醚(DAS)能夠提高了銅綠假單胞菌培養液中葉酸的產量。

因此，本發明的目的是提供烯丙基硫醚在制備促進銅綠假單胞菌葉酸生物合成制劑中的應用。

本發明的第二個目的是提供一種促進銅綠假單胞菌葉酸生物合成制劑，含有烯丙基硫醚作為活性成分。

所述的銅綠假單胞菌優選為銅綠假單胞菌(Pseudomonas?aeruginosa)PAO1。

本發明發現DAS能夠提高了銅綠假單胞菌培養液中葉酸的產量，因此可以用于制備促進銅綠假單胞菌葉酸生物合成制劑中應用。

附圖說明：

圖1是DAS作用下銅綠假單胞菌PAO1的生長曲線；

圖2是DAS作用下銅綠假單胞菌PAO1的轉錄組KEGG富集分析的葉酸合成通路圖。

具體實施方式：

以下實施例是對本發明的進一步說明，而不是對本發明的限制。

實施例1：

銅綠假單胞菌(Pseudomonas?aeruginosa)PAO1懸液的制備：將指數生長期的銅綠假單胞菌PAO1培養液取樣，離心，用PBS緩沖液洗滌一次，重懸于PBS中，并將菌濃度稀釋至10⁸CFU/mL，得到銅綠假單胞菌PAO1菌懸液。

1.烯丙基硫醚對銅綠假單胞菌生長的影響

分別向試管中加入LB培養基、DAS，并接入指數生長期的銅綠假單胞菌PAO1菌懸液，總體積均為10mL，使銅綠假單胞菌PAO1的菌濃度均為10⁶CFU/mL，DAS的濃度分別為0(對照)、0.16μl/mL、0.31μl/mL、0.63μl/mL、1.25μl/mL、2.5μl/mL和5.0μl/mL。將幾個實驗組分別取樣加入到自動生長曲線測定儀(Bioscreen?C)專用的蜂窩培養板中，每孔加入350μL的培養液，每個實驗組三個平行。將蜂窩培養板置于自動生長曲線測定儀中，37℃振蕩培養3天，每小時測定一次OD₆₀₀。以OD₆₀₀為縱坐標，培養時間為橫坐標，繪制DAS作用下PAO1的生長曲線，以此研究DAS對PAO1生長的影響。

2.烯丙基硫醚對銅綠假單胞菌的葉酸合成通路中關鍵基因表達量的影響