[發(fā)明專利]L-乳酸的生產(chǎn)菌株凝結(jié)芽孢桿菌H-2及L-乳酸的生產(chǎn)方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202010697954.8
• 申請(qǐng)日: 2020-07-20
• 公開（公告）號(hào): CN111826314B
• 公開（公告）日: 2023-04-07
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 許平;張凡;陶飛;唐鴻志
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 上海交通大學(xué)
• 主分類號(hào): C12N1/20
• 分類號(hào): C12N1/20;C12P7/56;G01N30/02;G01N21/33;C12R1/07
• 代理公司: 上海伯瑞杰知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 31227
• 代理人: 范艷靜

1.一種l-乳酸的生產(chǎn)菌株凝結(jié)芽孢桿菌H-2，其特征在于：所述凝結(jié)芽孢桿菌H-2的保藏編號(hào)為CCTCC?NO:?M2020155。

2.一種生產(chǎn)l-乳酸的方法，其特征在于：其包括如下步驟：

（1）、將權(quán)利要求1的凝結(jié)芽孢桿菌H-2接種至種子固體培養(yǎng)基中的斜面培養(yǎng)基內(nèi)，在50℃下培養(yǎng)24-36?h；

（2）、在無菌環(huán)境中，將步驟（1）中斜面上的單菌落挑至種子液體培養(yǎng)基內(nèi)，用封口膜和塑料薄膜封住瓶口，在50℃條件下靜置培養(yǎng)24-36?h，獲得種子液；

（3）、將步驟（2）的種子液轉(zhuǎn)接到發(fā)酵罐培養(yǎng)基中，按照pH、溫度、初始葡萄糖濃度和接種量的順序依次進(jìn)行優(yōu)化，攪拌轉(zhuǎn)速為80?rpm，培養(yǎng)30-48?h，期間其他條件控制不變，最終獲得優(yōu)化后的發(fā)酵條件；

（4）、重復(fù)步驟（1）、步驟（2）獲得的種子液接種到發(fā)酵罐培養(yǎng)基中，在步驟（3）優(yōu)化后的發(fā)酵條件下，進(jìn)行長(zhǎng)期重復(fù)分批補(bǔ)料發(fā)酵，其中每個(gè)批次培養(yǎng)至24?h的發(fā)酵液作為下一批次的種子，期間進(jìn)行葡萄糖補(bǔ)料，防止葡萄糖消耗影響菌株活性。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的方法，其特征在于：步驟（1）中，所述種子固體培養(yǎng)基的配方為：100?g/L葡萄糖、1?g/L酵母粉、5?g/L蛋白胨和50?g/L?CaCO₃，添加2%瓊脂粉。

4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的方法，其特征在于：步驟（2）中，所述種子液體培養(yǎng)基的配方為：100?g/L葡萄糖、1?g/L酵母粉、5?g/L蛋白胨和50?g/L?CaCO₃。

5.根據(jù)權(quán)利要求2所述的方法，其特征在于：步驟（3）中，所述優(yōu)化后的發(fā)酵條件為：pH值為6.2-7.5，溫度為50-57℃，初始葡萄糖濃度為140-220?g/L，接種量為10-30%。

6.根據(jù)權(quán)利要求2所述的方法，其特征在于：步驟（3）和步驟（4）中，所述發(fā)酵罐培養(yǎng)基的配方為：140-220?g/L葡萄糖、1?g/L酵母粉、0.37?g/L?ZnSO₄·7H₂O、0.57?g/L?KH₂PO₄、0.57?g/L?K₂HPO₄、8.33?g/L?(NH₄)₂SO₄和3?g/L?(NH₄)₂HPO₄。