[發(fā)明專利]菱的葉子乙醇提取物的制備方法及其應用

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• 申請日: 2020-07-20
• 公開（公告）號: CN111617116A
• 公開（公告）日: 2020-09-04
• 發(fā)明（設計）人: 葉滿紅;周斌
• 申請（專利權）人: 揚州大學
• 主分類號: A61K36/185
• 分類號: A61K36/185;A61P31/04;A61K127/00
• 代理公司: 揚州蘇中專利事務所(普通合伙) 32222
• 代理人: 沈志海

菱的葉子乙醇提取物的制備方法及其應用，涉及蜜蜂的蜜蜂美洲幼蟲病防治技術領域。將陰干的菱葉子研磨成粉末后采用乙醇水溶液浸泡，經抽濾，取濾液旋轉蒸發(fā)，取得菱的葉子乙醇提取物。將該提取物溶解于二甲基亞砜中，用于防治蜜蜂美洲幼蟲病。該提取物的使用不存在停藥期，在蜂群的整個生產及繁殖階段均可安全使用，有助于維護蜂群的健康，促進蜂群整體生產力的提高。

技術領域

本發(fā)明涉及蜜蜂的蜜蜂美洲幼蟲病防治技術領域。

背景技術

蜜蜂是重要的經濟昆蟲，蜜蜂是傳花授粉媒介的重要組成部分,是構成全球生物多樣性的重要組成成分,它們對作物、水果和野生植物的授粉活動，使其成為世界范圍內最重要的傳花授粉昆蟲之一，不僅對于農業(yè)生產意義重大，更是在維系生物多樣性中扮演著重要角色。同時，蜜蜂生產的蜂蜜、蜂花粉、蜂王漿、蜂膠等蜜蜂產品也是重要的保健食品和化工原料。

美洲幼蟲病(American Foulbrood，AFB，又稱美洲幼蟲腐臭病、美洲幼蟲腐爛病)，簡稱美腐病，是一種惡性的蜜蜂幼蟲傳染病，在世界范圍內均有發(fā)生。美洲幼蟲病與幼蟲芽孢桿菌感染有關，該病的發(fā)生與幼蟲的抵抗力有很大的關系，主要是通過已經感染的蜜蜂飼喂蜂群幼蟲，使得該病迅速在蜂群的幼蟲間快速傳播。通常現(xiàn)代的處置方式是在蜂群確診該病后需要就地焚燒處理，防止疾病擴散。AFB的病原是幼蟲芽孢桿菌(Paenibacilluslarvae)，屬于一種革蘭氏陽性細菌。蜜蜂幼蟲對幼蟲芽孢桿菌的敏感性隨著日齡的增長而降低，在每個感染的幼蟲體內能產生數(shù)以億計的、具有感染能力的孢子，由于其孢子對熱和化學物質有極強的抵抗力，可存活長達35年之久，導致AFB感染后，幼蟲殘骸的鱗片、蜂箱、產品和設備都是潛在的污染源。

目前用于治療AFB的抗生素很多，如磺胺類藥物、鹽酸土霉素、四環(huán)素、青霉素、鏈霉素、紅霉素、卡那霉素、紅霉素、泰樂霉素等，藥物通常配用糖漿或者蜜水，勾兌后噴施。每次糖漿和蜜水用量，每脾用100-150mL，間隔4-5d噴施1次。但是，連續(xù)使用抗生素有污染蜂產品的可能。為此，用藥用量要控制得當，尤其要避開生產季節(jié)，防治抗生素在蜂產品中的殘留。而且，盡量選擇早春或晚秋，治療效果則會更好些。然而，總體來看，抗生素會在蜂產品中殘留，嚴重影響蜂產品的質量，給人類的健康造成威脅。除此之外，抗生素還會使蜜蜂病原體的耐藥性增強，導致病原體產生相應的變異，使得蜂群患病更加嚴重。

可見，通過使用抗生素對AFB進行防控，往往因超量使用，或者使用抗生素時間不當很容易造成蜂產品中抗生素殘留超標，抗生素只能抑制臨床癥狀并不能對孢子發(fā)揮作用，且接觸了抗生素的幼蟲和成蜂，其壽命明顯縮短，更嚴重的是耐藥性的產生是導致其對AFB已無法有效地控制主要原因，在全世界范圍內給養(yǎng)蜂者造成了巨大的經濟損失，與此同時也直接影響了人們食品安全問題。

為了減少養(yǎng)蜂生產中抗生素的使用，人們采用植物進行蜂病的防治。如山西振興魚蜂藥業(yè)公司的純中藥制劑-毒螨菌一次凈、甘肅天水匯濤蜂業(yè)公司的中草藥植物粉劑-健蜂抗螨香粉、山西衛(wèi)鵬制藥有限公司的中草藥制劑-蜂康等。不過，目前這些治療蜂病的產品從種類和療效上都不能較好滿足綠色蜂業(yè)的發(fā)展需要。還有通過拮抗性細菌發(fā)揮生物防控作用，如Evans and Armstrong首次成功地利用培養(yǎng)的P.larvae對幼蟲芽孢桿菌引起的AFB進行了生物防控；日本研發(fā)的原露技術，對防治蜂病，特別是爬蜂病、大肚病、幼蟲病和蜜蜂痢疾等有明顯的預防效果，不過其作用譜窄、藥效慢、持效短、且易受外界條件的影響。

目前在全世界范圍蜜蜂的種群數(shù)量逐年遞減，在引起蜜蜂種群銳減的諸多因素中，病原體對抗生素產生耐藥性，是導致蜂群疾病防控失敗的主要原因。隨著抗生素類藥物的長期使用，蜂群耐藥性病菌不斷出現(xiàn)，藥物抗性問題日顯突出，而因為藥效逐漸降低、抗生素的用量又不斷加大，由此形成了一個惡性循環(huán)。

發(fā)明內容

本發(fā)明目的在于提出一種天然的、能夠替代抗生素的植物源的用于防治蜜蜂美洲幼蟲病的菱葉子的乙醇提取物。