[發明專利]一種黃酮類化合物作為玫瑰蜂花粉特征性標志物的應用

有效

• 申請號: 202010695552.4
• 申請日: 2020-07-20
• 公開（公告）號: CN111735894B
• 公開（公告）日: 2020-12-25
• 發明（設計）人: 楊術鵬;李熠;張玉豪;張金震;周金慧;楊宇暉
• 申請（專利權）人: 中國農業科學院蜜蜂研究所
• 主分類號: G01N30/06
• 分類號: G01N30/06;G01N30/88;C07H17/07;C07H1/08
• 代理公司: 北京路浩知識產權代理有限公司 11002
• 代理人: 陳征

1.一種黃酮類化合物作為玫瑰蜂花粉特征性標志物的應用，其特征在于，所述黃酮類化合物為澤蘭黃酮-7-(6’’-丙二酰)葡萄糖苷-4’-葡萄糖苷，所述澤蘭黃酮-7-(6’’-丙二酰)葡萄糖苷-4’-葡萄糖苷的化學結構如下：

。

2.一種玫瑰蜂花粉的真實性評價方法，其特征在于，以澤蘭黃酮-7-(6’’-丙二酰)葡萄糖苷-4’-葡萄糖苷為特征性標志物對蜂花粉樣本進行檢測；若所述蜂花粉樣本中澤蘭黃酮-7-(6’’-丙二酰)葡萄糖苷-4’-葡萄糖苷的含量介于500-800 mg/kg，判斷所述蜂花粉樣本為玫瑰蜂花粉；若澤蘭黃酮-7-(6’’-丙二酰)葡萄糖苷-4’-葡萄糖苷的含量低于500 mg/kg，則判定所述蜂花粉樣本為其它蜂花粉或者摻假玫瑰蜂花粉；所述澤蘭黃酮-7-(6’’-丙二酰)葡萄糖苷-4’-葡萄糖苷的化學結構式如下：

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3.根據權利要求2所述的真實性評價方法，其特征在于，采用UHPLC-Q-Orbitrap和/或LC-MS/MS檢測所述蜂花粉樣本。

4.根據權利要求3所述的真實性評價方法，其特征在于，所述澤蘭黃酮-7-(6’’-丙二酰)葡萄糖苷-4’-葡萄糖苷在UHPLC-Q-Orbitrap的精確提取離子流色譜圖中含有m/z727.17162 [M+H]⁺準分子離子峰，其精確質量數的誤差小于5 ppm；所述澤蘭黃酮-7-(6’’-丙二酰)葡萄糖苷-4’-葡萄糖苷色譜峰的保留時間為7.50 min，保留時間允許的偏差小于±0.3 min，所述澤蘭黃酮-7-(6’’-丙二酰)葡萄糖苷-4’-葡萄糖苷的MS/MS圖譜中含有以下一個或多個碎片離子蜂，m/z 565.11880、m/z 479.11840和m/z 317.06558，其精確質量數的誤差小于10 ppm。

5.根據權利要求3或4所述的真實性評價方法，其特征在于，采用UHPLC-Q-Orbitrap對所述蜂花粉樣本進行檢測時，液相色譜條件如下：采用C18色譜柱，以0.1%的甲酸水為流動相A，0.1%的甲酸乙腈為流動相B，采用梯度洗脫程序分離：0-2 min，5%的流動相B；1.2-7min，5-30%的流動相B；7-14min，30-95%的流動相B；14-18.0 min，95%的流動相B；18.0-20.0min，5%的流動相B；

質譜條件如下：離子源參數：鞘氣的流速45 arb；輔助氣的流速10 arb；擋錐氣的流速0arb；電噴霧電壓3.5 kV；離子導管的溫度320 ℃；S-lens RF level設為60 V；離子源的溫度350 ℃；采集的模式為正離子模式下的Full MS-ddMS²，其中Full MS的具體參數設置如下：分辨率：70000；AGC Target：3e6；Maximum IT：100 ms；Scan range：80-1200 Da；Spectrum data：Centroid；其中dd-MS²的具體參數設置如下：分辨率：17500；AGC Target：1e5；Maximum IT：50 ms；Loop count：2； Isolation window：2.0 Da； NCE：35 eV；Spectrum data：Centroid；在dd settings中，Minimum AGC： 8.0e3；Apex trigger：2-6 s；Exclude isotope：on；Dynamic exclusion：8.0 s。