[發明專利]一種金黃色葡萄球菌噬菌體裂解酶及其制備方法和應用

在審

• 申請號: 202010691524.5
• 申請日: 2020-07-17
• 公開（公告）號: CN111808837A
• 公開（公告）日: 2020-10-23
• 發明（設計）人: 潘強;任慧英;王佳;孫虎芝
• 申請（專利權）人: 青島諾安百特生物技術有限公司
• 主分類號: C12N9/88
• 分類號: C12N9/88;C12N15/60;C12N15/70;C12N1/21;C12N15/11;C12Q1/527;A61K38/51;A61P31/04;C12R1/19
• 代理公司: 青島鼎丞智佳知識產權代理事務所(普通合伙) 37277
• 代理人: 韓耀朋;曲志乾

1.一種金黃色葡萄球菌噬菌體裂解酶LysSA2，其特征在于，其具有如Seq ID NO.1所示的氨基酸序列；或其具有與Seq ID NO.1所示的氨基酸序列至少95％的同源性且具有基本相同酶活的氨基酸序列。

2.根據權利要求1所述的金黃色葡萄球菌噬菌體裂解酶LysSA2，其特征在于，所述裂解酶LysSA2來源于金黃色葡萄球菌噬菌體。

3.根據權利要求1或2所述的金黃色葡萄球菌噬菌體裂解酶LysSA2，其特征在于，所述金黃色葡萄球菌噬菌體裂解酶LysSA2的結構域包括N端的CHAP水解結構域、中間的Amidase_2水解結構域和C端的SH3_5結合結構域。

4.如權利要求1所述的金黃色葡萄球菌噬菌體裂解酶LysSA2的編碼基因，其特征在于，其具有如Seq ID NO.2所示的核苷酸序列，或具有與Seq ID NO.2所示的序列至少95％的同源性且能表達基本相同酶活的裂解酶的核苷酸序列。

5.一種重組表達載體，其特征在于，所述重組表達載體由表達載體和如權利要求4所述的金黃色葡萄球菌噬菌體裂解酶LysSA2的編碼基因重組而成。

6.一種重組工程菌，其特征在于，所述重組工程菌是向宿主菌中轉化如權利要求5所述的重組表達載體而成。

7.一種權利要求1所述的金黃色葡萄球菌噬菌體裂解酶LysSA2的制備方法，其特征在于，具體步驟如下：

(1)將權利要求3所述的裂解酶LysSA2的核苷酸序列克隆到表達載體中，得到重組表達載體；

(2)將步驟1得到的重組表達載體轉入大腸桿菌感受態細胞，得到重組工程菌；

(3)利用重組工程菌誘導表達裂解酶LysSA2；

(4)提取純化步驟3得到的裂解酶LysSA2。

8.根據權利要求7所述的金黃色葡萄球菌噬菌體裂解酶LysSA2的制備方法，其特征在于，所述表達載體為pCold TF。

9.根據權利要求7所述的金黃色葡萄球菌噬菌體裂解酶LysSA2的制備方法，其特征在于，所述大腸桿菌感受態細胞為大腸桿菌DH5α或大腸桿菌BL21。

10.一種權利要求1所述的金黃色葡萄球菌噬菌體裂解酶LysSA2在制備預防或治療葡萄球菌病的藥物或抑菌劑中的應用；優選的，所述葡萄球菌病為金黃色葡萄球菌感染導致的疾病。

11.一種檢測試劑盒，其特征在于，包括如權利要求1或2所述的金黃色葡萄球菌噬菌體裂解酶LysSA2。

12.一對用于擴增如權利要求1或2所述的金黃色葡萄球菌噬菌體裂解酶LysSA2的編碼基因的特異性引物，其特征在于，為序列表Seq ID NO.3所述的引物LysSA2-F和Seq IDNO.4所述的引物LysSA2-R。