[發明專利]副溶血弧菌23S rRNA和/或其保守序列VP13在提高魚類免疫力中的應用

在審

• 申請號: 202010681946.4
• 申請日: 2020-07-15
• 公開（公告）號: CN111973616A
• 公開（公告）日: 2020-11-24
• 發明（設計）人: 盧丹琪;于雪;梁瑤思;周瑩;何良格;劉宇琪;付麗君;林浩然;張勇
• 申請（專利權）人: 中山大學
• 主分類號: A61K31/7105
• 分類號: A61K31/7105;A61P37/04
• 代理公司: 廣州粵高專利商標代理有限公司 44102
• 代理人: 趙崇楊

本發明公開了副溶血弧菌23S rRNA和/或其保守序列VP13在提高魚類免疫力中的應用。本發明研究表明，副溶血弧菌23S核糖體RNA及其保守序列VP13能識別TLR13并激活其介導的細胞因子受體系統信號通路、活化免疫細胞從而提高魚體免疫力。可利用副溶血性弧菌23S核糖體RNA及其保守序列VP13刺激魚類從而提高魚類的天然免疫力，或用其制備提高魚類免疫力的藥物，從而預防魚類病害。

技術領域

本發明涉及水產養殖技術領域，更具體地，涉及副溶血弧菌23S rRNA和/或其保守序列VP13在提高魚類免疫力中的應用。

背景技術

副溶血性弧菌是一種革蘭氏陰性嗜鹽性細菌，在海洋環境中自然存在。常寄生于包括鱈魚、沙丁魚、鯖魚、比目魚、蛤、章魚、蝦、蟹、龍蝦、扇貝和牡蠣在內的水生動物中。副溶血弧菌同時也是一種全球重要的海鮮病原傳播體，被認為是導致人類胃腸炎、傷口感染和敗血癥的主要病因。在日本及中國臺灣地區，食源性細菌誘發疾病的總數占很大比例。然而，西班牙和法國等國家只報告了零星的疫情。食用生的或未煮熟的海鮮，特別是被副溶血性弧菌污染的，可能導致急性胃腸炎的發展，其特征是腹瀉、頭痛、嘔吐、惡心、腹部絞痛和低熱，甚至可導致胃腸炎；甚至會對有肝病或免疫紊亂等潛在疾病的人構成生命威脅。同時，副溶血弧菌是水生動物弧菌病的主要病原菌，能夠引起與組織損傷有關的炎癥反應。

斜帶石斑魚是我國南方重要的海水養殖經濟魚類，隨著養殖規模的不斷擴大，養殖環境逐漸惡化，魚病干擾日趨嚴重，給石斑魚的養殖造成了困擾，同時也給我國漁業養殖造成了巨大的經濟損失。副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus)，傳播速度快、致死率高、危害性大，是我國廣東地區魚、蝦、貝類等水產經濟作物的主要病原菌。目前，針對副溶血弧菌引起的免疫疾病的主要治療手段還局限在抗生素水平。許多國家對普通抗生素的細菌耐藥性已達到非常高的水平，這極有可能導致普通感染的現有治療方案失效。因此，迫切需要開發替代生物防治劑。研究表明，兩種III型分泌系統(T3SSS1、T3SSS2)是副溶血弧菌的毒力因子；攜帶TDH和TRH的分離株具有致病性，這兩個基因分別編碼溶血素耐熱直接溶血素(TDH)和TDH相關溶血素(TRH)，也被認為是副溶血性弧菌的主要毒力因子。此外，副溶血弧菌鞭毛蛋白是另外一種已被報道的毒力因子。但是，有研究表明，TDH和TRH基因敲除的菌株仍有毒性存在，這表明關于副溶血弧菌毒力因子的研究還不完全，尚待開發。在硬骨魚中，當遭受外源細菌感染時，TLR13能夠特異性識別細菌RNA以抵御病原菌的侵染。專利CN107557366A公開了一種斜帶石斑魚天然免疫受體TLR13基因，然而，在魚類遭受副溶血弧菌感染時TLR13能否參與該病原菌的抵御還不明確。此外，TLR13針對副溶血弧菌的特異性識別配體及介導的相應的免疫信號通路還有待于進一步研究。若是能激活、提高魚類中天然免疫受體TLR13基因的表達，將有助于提高魚類的免疫力。

發明內容

本發明的目的在于克服現有技術中存在的上述缺陷和不足，提供副溶血弧菌23SrRNA及其保守序列VP13在提高魚類免疫力中的應用

本發明的上述目的是通過以下技術方案給予實現的：

本發明研究發現，副溶血弧菌23S核糖體RNA及其保守序列VP13能識別TLR13并激活其介導的細胞因子受體系統信號通路、活化免疫細胞從而提高魚體免疫力。

因此，本發明首先提供副溶血弧菌23S rRNA和/或其保守序列VP13在識別TLR13并激活其介導的細胞因子受體系統信號通路、活化免疫細胞和提高魚類免疫力中的應用，所述副溶血弧菌23S rRNA的序列如SEQ ID NO:3所示，其保守序列VP13序列如SEQ ID NO:4所示。

本發明還提供副溶血弧菌23S rRNA和/或其保守序列VP13在制備提高魚類免疫力的藥物中的應用，所述副溶血弧菌23S rRNA的序列如SEQ ID NO:3所示，其保守序列VP13序列如SEQ ID NO:4所示。