[發明專利]基于新型腺病毒載體Sad23L和/或Ad49L的新型冠狀病毒肺炎疫苗

有效

• 申請號: 202010675912.4
• 申請日: 2020-07-14
• 公開（公告）號: CN111778264B
• 公開（公告）日: 2021-06-29
• 發明（設計）人: 羅升學;劉博超;張攀麗
• 申請（專利權）人: 廣州佰芮慷生物科技有限公司
• 主分類號: C12N15/50
• 分類號: C12N15/50;C07K14/165;C12N15/861;C12N7/01;A61K39/215;A61P31/14;C12R1/93
• 代理公司: 廣州粵高專利商標代理有限公司 44102
• 代理人: 劉春風

本發明公開了一種基于新型腺病毒載體Sad23L和/或Ad49L的新型冠狀病毒肺炎COVID?19疫苗。通過優化外源基因使得外源蛋白的表達能夠明顯提高，同時進一步嘗試使用人稀有或者猴的腺病毒作為載體，逃避預存的針對常見腺病毒的免疫反應，本發明獲得的新型冠狀病毒肺炎COVID?19疫苗能夠在動物體內誘導產生高水平的體液和細胞免疫，在動物免疫之后沒有發現副作用的出現。本發明新型冠狀病毒肺炎COVID?19疫苗是安全有效且可以進行快速大量的制備，因此是可用于預防SARS?CoV?2的感染的候選疫苗株。

技術領域

本發明屬于生物技術領域，具體涉及一種基于新型腺病毒載體Sad23L和/或Ad49L研制的新型冠狀病毒肺炎COVID-19疫苗。

背景技術

2019年冠狀病毒病（COVID-19）病原體被鑒定為新型冠狀病毒（severe acuterespiratory syndrome coronavirus 2，SARS-CoV-2）是一種類似重癥急性呼吸道綜合征冠狀病毒（SARS-CoV，約79%）和中東呼吸道綜合征冠狀病毒（MERA-CoV，約50%）的?冠狀病毒屬（Betacoronavirus）、Sarbecovirus 亞屬的新型冠狀病毒。SARS-CoV-2的人-人傳播能力強于SARS-CoV和MERS-CoV，但其致病力低于SARS-CoV，存在輕癥或無明顯臨床癥狀感染者。鑒于隱匿性帶毒者的存在，可以推測在一級響應措施狀態下，即使疫情得到了有效控制，但感染者攜帶的SARS-CoV-2可能會像MERS-CoV一樣呈現持續的散發流行，時間可能長達1-2年或甚至數年。因此，研發有效的COVID-19疫苗仍是控制疫情或徹底清除疫情的最佳手段和迫切需求。

SARS-CoV-2屬套式病毒目（Nidovirales）冠狀病毒科（Coronaviridae）冠狀病毒屬（Coronavirus）。基因組為線性單股正鏈的RNA病毒，直徑約80～120nm，基因組5′端具有甲基化的帽狀結構，3′端具有poly(A)尾，基因組全長約29 kb。膜表面有三種糖蛋白：棘突糖蛋白（S，Spike Protein）、小包膜糖蛋白（E，Envelope Protein）和膜糖蛋白（M，MembraneProtein），其中 S蛋白在識別并結合宿主細胞表面受體，并介導病毒包膜與細胞膜融合的過程中起到關鍵性作用，也是誘導宿主產生免疫反應，尤其是體液免疫反應的主要抗原。目前已經有許多形式的COVID-19疫苗進入臨床試驗和正在研制，包括DNA質粒疫苗、腺病毒疫苗、mRNA疫苗和滅活的病毒疫苗等。但是目前為止還沒有獲得批準的COVID-19疫苗，因此安全有效的預防性COVID-19疫苗的研制是非常有必要的。

復制缺陷型腺病毒載體廣泛的應用于疫苗的研制，由于能夠誘導產生廣泛的體液和細胞免疫反應，宿主范圍廣，不整合基因組中，高水平表達外源蛋白等優點。但是人群中預存的高水平的針對常見的人腺病毒（Ad5或者Ad2）的免疫反應限制了腺病毒載體的應用。

發明內容

為了解決現有技術的這種預存的免疫反應，本發明提供了一種基于新型腺病毒載體Sad23L和/或Ad49L的新型冠狀病毒肺炎COVID-19疫苗。

基于現有的生物技術領域缺乏獲得批準的新型冠狀病毒肺炎COVID-19疫苗，以及構建有效的疫苗的技術難題，本發明人希望通過優化外源基因使得外源蛋白的表達能夠明顯提高，同時進一步嘗試使用人稀有或者猴的腺病毒作為載體，逃避預存的針對常見腺病毒的免疫反應，本發明獲得的新型冠狀病毒肺炎COVID-19疫苗能夠在動物體內誘導產生高水平的體液和細胞免疫，在動物免疫之后沒有發現副作用的出現。本發明新型冠狀病毒肺炎COVID-19疫苗是安全有效且可以進行快速大量的制備，因此是可用于預防SARS-CoV-2的感染的候選疫苗株。

本發明所要解決的技術問題通過以下技術方案予以實現：

第一方面，一種表達SARS-CoV-2棘突糖蛋白的核苷酸，所述核苷酸的序列含有如SEQ ID NO:1所示的S蛋白序列。

第二方面，一種含有上述核苷酸的質粒載體。