[發(fā)明專利]一種植物組織培養(yǎng)的污染苗脫菌培養(yǎng)基及培養(yǎng)方法

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• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202010659781.0
• 申請(qǐng)日: 2020-07-10
• 公開（公告）號(hào): CN111837949A
• 公開（公告）日: 2020-10-30
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 周國(guó)權(quán);沐瀟瀟;鄭彬江;鄭彬旭;張林杰
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 佛山市粵山生物科技有限公司
• 主分類號(hào): A01H4/00
• 分類號(hào): A01H4/00;A01N59/16;A01N35/02;A01N43/90;A01N59/18;A01P1/00
• 代理公司: 北京科家知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 11427
• 代理人: 宮建華

本發(fā)明公開了一種植物組織培養(yǎng)的污染苗脫菌培養(yǎng)基及培養(yǎng)方法，該植物組織培養(yǎng)的污染苗脫菌培養(yǎng)基，是以MS培養(yǎng)基為基礎(chǔ)培養(yǎng)基，并添加有二氧化錳、三氮唑核苷、瓊脂粉和白砂糖，污染苗脫菌培養(yǎng)方法是先對(duì)外植體進(jìn)行甲醛和高猛酸鉀的結(jié)合熏蒸消毒處理，再進(jìn)行升貢和青霉素的消毒處理，最后進(jìn)行接種，本發(fā)明的植物組織培養(yǎng)的污染苗脫菌培養(yǎng)基及對(duì)應(yīng)的培養(yǎng)方法能夠有效殺滅造成污染的細(xì)菌和病毒、持續(xù)抑制細(xì)菌和病毒的生長(zhǎng)繁殖和提高外植體的成活率。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及植物組織培養(yǎng)技術(shù)領(lǐng)域，特別是涉及一種植物組織培養(yǎng)的污染苗脫菌培養(yǎng)基，還涉及一種植物組織培養(yǎng)的污染苗脫菌培養(yǎng)方法。

背景技術(shù)

植物組織培養(yǎng)概念(廣義)又叫離體培養(yǎng)，指從植物體分離出符合需要的組織。器官或細(xì)胞，原生質(zhì)體等，通過無菌操作，在人工控制條件下進(jìn)行培養(yǎng)以獲得再生的完整植株或生產(chǎn)具有經(jīng)濟(jì)價(jià)值的其他產(chǎn)品的技術(shù)。植物組織培養(yǎng)概念(狹義)指用植物各部分組織，如形成層、薄壁組織、葉肉組織、胚乳等進(jìn)行培養(yǎng)獲得再生植株，也指在培養(yǎng)過程中從各器官上產(chǎn)生愈傷組織的培養(yǎng)，愈傷組織再經(jīng)過再分化形成再生植物。

但是在植物組織培養(yǎng)的過程中，難免會(huì)因?yàn)楦鞣N原因造成組培苗被污染，一般污染苗會(huì)作丟棄處理。但當(dāng)被污染的組培苗是特別珍貴和稀少的植株的時(shí)候，則必須要對(duì)污染苗進(jìn)行脫菌處理，以挽救珍貴的植株。在工廠化生產(chǎn)的時(shí)候，也可以通過脫菌處理而降低損失。但是目前的脫菌培養(yǎng)方法由于需要對(duì)外植體進(jìn)行殺菌處理，導(dǎo)致后續(xù)培養(yǎng)的存活率不高。

發(fā)明內(nèi)容

基于此，本發(fā)明的目的在于提供一種植物組織培養(yǎng)的污染苗脫菌培養(yǎng)基，其能夠在不影響外植體生長(zhǎng)的情況下持續(xù)抑制細(xì)菌和病毒的繁殖，具有誘導(dǎo)成活率高的優(yōu)點(diǎn)。

本發(fā)明的另一個(gè)目的在于，提供一種植物組織培養(yǎng)的污染苗脫菌培養(yǎng)方法，其通過多種殺菌消毒方法的配合，降低對(duì)外植體的傷害，同時(shí)更加徹底的殺滅和除去外植體上的細(xì)菌和病毒，具有脫菌消毒效果好和誘導(dǎo)成活率高的優(yōu)點(diǎn)。

本發(fā)明通過以下詳細(xì)技術(shù)方案達(dá)到上述目的：

一種植物組織培養(yǎng)的污染苗脫菌培養(yǎng)基，以MS培養(yǎng)基為基礎(chǔ)培養(yǎng)基，并添加有二氧化錳、三氮唑核苷、瓊脂粉和白砂糖。

在其中一個(gè)實(shí)施例中，所述的二氧化錳的濃度為0.3-0.9mg/L、所述的三氮唑核苷的濃度為30-90mg/L、所述的瓊脂粉的濃度為6-7g/L，所述的白砂糖的濃度為25-30g/L。

在其中一個(gè)實(shí)施例中，所述的二氧化錳的濃度為0.6mg/L、所述的三氮唑核苷的濃度為60mg/L、所述的瓊脂粉的濃度為6g/L，所述的白砂糖的濃度為28g/L。

在其中一個(gè)實(shí)施例中，所述植物組織培養(yǎng)的污染苗脫菌培養(yǎng)基的pH值為5.5-6.0。

一種植物組織培養(yǎng)的污染苗脫菌培養(yǎng)方法，其包括以下步驟：

步驟S10：選取質(zhì)量較好污染材料，截取污染相對(duì)較小的部分作為外植體，使用無菌水沖洗干凈，再用吸水紙吸干；

步驟S20：將步驟S10獲得的外植體使用甲醛和高猛酸鉀熏蒸15-30min，再使用升貢侵泡處理5-15min，取出外植體用無菌水沖洗干凈；

步驟S30：取步驟S20中獲得的外植體，使用青霉素消毒處理30-60min，取出外植體用無菌水除去殘余青霉素；

步驟S40：將步驟S30中獲得的外植體接種到權(quán)利要求4所述的污染苗脫菌培養(yǎng)基中培養(yǎng)，得到叢生芽或愈傷組織。

在其中一個(gè)實(shí)施例中，所述的步驟S10中使用無菌水沖洗4-5次。

在其中一個(gè)實(shí)施例中，所述的步驟S20中的升貢的濃度為0.1％，使用無菌水沖洗2-4次。