[發(fā)明專利]一種坐滴式細(xì)胞球培養(yǎng)芯片及其使用方法

在審

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• 申請日: 2020-07-08
• 公開（公告）號: CN111647509A
• 公開（公告）日: 2020-09-11
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 李剛;孫幫勇
• 申請（專利權(quán)）人: 重慶大學(xué)
• 主分類號: C12M3/00
• 分類號: C12M3/00;C12N5/00;C12N5/09;C12Q1/02
• 代理公司: 成都正華專利代理事務(wù)所(普通合伙) 51229
• 代理人: 郭艷艷

1.一種坐滴式細(xì)胞球培養(yǎng)芯片，其特征在于，包括加樣腔和微腔陣列，所述微腔陣列設(shè)置在所述加樣腔底部，且所述加樣腔和所述微腔陣列表面設(shè)置有超疏水表面，所述微腔陣列設(shè)置有若干微腔，所述微腔內(nèi)設(shè)置有至少一個通孔，所述通孔截面小于所述微腔截面。

2.如權(quán)利要求1所述的坐滴式細(xì)胞球培養(yǎng)芯片，其特征在于，所述微腔陣列至少設(shè)置有4個微腔。

3.如權(quán)利要求1所述的坐滴式細(xì)胞球培養(yǎng)芯片，其特征在于，所述微腔腔體為圓柱形，直徑大于2mm，且所述微腔底部為圓弧形。

4.如權(quán)利要求1所述的坐滴式細(xì)胞球培養(yǎng)芯片，其特征在于，所述坐滴式細(xì)胞球培養(yǎng)芯片的基材材質(zhì)為聚苯乙烯、聚碳酸脂、聚甲基丙烯酸甲酯、聚二甲基硅氧烷、丙烯腈-丁二烯-苯乙烯、聚丙烯、聚乙烯、聚氯乙烯、聚四氟乙烯和環(huán)氧樹脂中的一種。

5.如權(quán)利要求1所述的坐滴式細(xì)胞球培養(yǎng)芯片，其特征在于，所述微腔陣列通過數(shù)控雕刻或注塑工藝制備得到。

6.如權(quán)利要求1所述的坐滴式細(xì)胞球培養(yǎng)芯片，其特征在于，所述超疏水表面通過以下方法制備得到：將納米材料懸浮液噴涂或浸涂在坐滴式細(xì)胞球培養(yǎng)芯片的基材上，干燥，得超疏水表面。

7.如權(quán)利要求6所述的坐滴式細(xì)胞球培養(yǎng)芯片，其特征在于，所述納米材料懸浮液為納米材料、膠水和分散劑按質(zhì)量比1～2:1～3:15混合而成的混合液。

8.如權(quán)利要求7所述的坐滴式細(xì)胞球培養(yǎng)芯片，其特征在于，所述納米材料為納米顆粒、納米纖維或納米棒；所述膠水為環(huán)氧樹脂、有機硅樹脂或結(jié)構(gòu)膠；所述分散劑為四氫呋喃、無水乙醇、異丙醇或甲烷鹵代烴。

9.權(quán)利要求1～8任一項所述的坐滴式細(xì)胞球培養(yǎng)芯片的使用方法，其特征在于，依次包括以下步驟：

(1)將坐滴式細(xì)胞球培養(yǎng)芯片洗凈、干燥，然后紫外消毒；

(2)將細(xì)胞懸浮液加入消毒后的加樣腔中，傾斜、轉(zhuǎn)動或抖動芯片，待細(xì)胞懸浮液充滿微腔陣列，吸出余液；

(3)將完成樣品分配的芯片置于37℃、含5％二氧化碳?xì)夥蘸拖鄬穸却笥?0％的環(huán)境中培養(yǎng)24～72h，然后在加樣腔中加入培養(yǎng)基或待測藥物，傾斜或轉(zhuǎn)動芯片，充分?jǐn)U散后吸出余液，在原培養(yǎng)條件下繼續(xù)培養(yǎng)；根據(jù)細(xì)胞球培養(yǎng)需求，該換液過程可重復(fù)多次，直至結(jié)束，收集細(xì)胞球。

10.如權(quán)利要求9所述的坐滴式細(xì)胞球培養(yǎng)芯片的使用方法，其特征在于，收集細(xì)胞球時，翻轉(zhuǎn)芯片將各微腔中含細(xì)胞球液滴轉(zhuǎn)移至平板玻璃或培養(yǎng)皿中；或?qū)⒏魑⑶恢泻?xì)胞球液滴直接傾倒至充有培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿中；或通過移液器或吸管從單個微腔中吸取已培養(yǎng)的細(xì)胞球。