[發(fā)明專利]一種黃杞葉總黃酮的制備方法及其在提高免疫力藥物中的應(yīng)用

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202010650739.2
• 申請(qǐng)日: 2020-07-08
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN113908188A
• 公開(kāi)（公告）日: 2022-01-11
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 韋潔;何俊慧
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 廣西壯族自治區(qū)中醫(yī)藥研究院
• 主分類號(hào): A61K36/52
• 分類號(hào): A61K36/52;A61P37/04
• 代理公司: 暫無(wú)信息
• 代理人: 暫無(wú)信息

本發(fā)明涉及一種黃杞葉總黃酮的制備方法及其在制備提高免疫力藥物中的應(yīng)用，即將干燥黃杞葉粉碎后置于55％?65％乙醇中浸泡4?7h，并超聲處理，再將浸泡液濾出。再以藥材量8倍體積55％?65％乙醇進(jìn)行滲漉提取，并將浸泡液和滲漉液減壓濃縮至無(wú)醇味，再以水稀釋藥液濃度為含生藥0.25g/ml。加入乙酸乙酯萃取3次，合并萃取液蒸干得干膏。將干膏以水溶解稀釋至15?25mg/ml，通過(guò)AB?8型大孔吸附樹(shù)脂柱，以55％乙醇洗脫。減壓濃縮干燥得黃杞葉總黃酮提取收率≥20％。此法可提高提取率和縮短提取時(shí)間，滲漉所用乙醇濃度降低，制備的黃杞葉總黃酮具有提高免疫力的作用，實(shí)現(xiàn)黃杞總黃酮在制備提高免疫力藥物中的應(yīng)用。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及醫(yī)藥，特別是一種黃杞葉總黃酮的制備方法及其在制備提高 免疫力藥物中的應(yīng)用。

背景技術(shù)

動(dòng)脈粥樣硬化(Atherosclerosis，As)是一種以脂質(zhì)沉積、單核-巨噬 細(xì)胞浸潤(rùn)及斑塊形成為主要病理特征的慢性炎癥[1]。在動(dòng)脈粥樣硬化早期，巨 噬細(xì)胞攝取過(guò)多膽固醇而轉(zhuǎn)變?yōu)榕菽?xì)胞，并通過(guò)分泌大量促炎因子等促進(jìn)AS 斑塊的形成。因此，有效阻斷泡沫細(xì)胞的形成，就可以有效防止動(dòng)脈粥樣硬化早 期病變。

動(dòng)脈粥樣硬化(AS)是一種由脂質(zhì)代謝異常引起的慢性炎性疾病。炎癥 及免疫反應(yīng)在AS斑塊形成、不穩(wěn)定性以及最終破裂中均起著至關(guān)重要的作用。 近年來(lái)大量的研究表明，體液免疫在AS發(fā)生發(fā)展中的重要性。體液免疫是通過(guò) B細(xì)胞產(chǎn)生抗體來(lái)達(dá)到保護(hù)的特異性免疫機(jī)制，尤如獲得性免疫系統(tǒng)中的一只 “橄欖球隊(duì)”。

IgM型抗體是獲得性免疫系統(tǒng)中最早形成的抗體類型，分為天然型IgM 和誘導(dǎo)型IgM抗體，前者由B1細(xì)胞產(chǎn)生，是非T細(xì)胞依賴型抗體，也是機(jī)體預(yù) 防病毒或細(xì)菌感染最好的“第一抗體”，兼具調(diào)節(jié)免疫細(xì)胞清除凋亡細(xì)胞與自體 抗原的功能。后者由B2細(xì)胞產(chǎn)生，是T細(xì)胞依賴型抗體。臨床研究發(fā)現(xiàn)，人體 血漿中特異性氧化抗原表型的IgM抗體水平與心血管疾病風(fēng)險(xiǎn)呈負(fù)相關(guān)。

IgA型抗體是人體中最豐富的抗體類型，廣泛分布與粘膜組織和體循環(huán)中。 粘膜IgA抗體的主要功能是擔(dān)當(dāng)“第一道防線”阻止入侵者吸附到位于粘膜表面 的細(xì)胞上，并將這些不速之客趕出體外。有研究顯示，IgA抗體可通過(guò)腸道微生 物繼而影響AS的發(fā)生和發(fā)展。

IgG抗體是體內(nèi)壽命最長(zhǎng)的抗體類型。研究顯示，對(duì)LDL受體缺陷的小鼠 腹腔注射重組的人IgG抗體，可以完全阻止由動(dòng)脈外膜損傷所造成的動(dòng)脈粥樣硬 化斑塊的形成，進(jìn)而發(fā)揮免疫調(diào)節(jié)作用。

黃杞葉為胡桃科黃杞屬植物黃杞Engelhardia roxburghiana Wall的干燥 葉，具有清熱解毒，生津解渴，解暑利濕的功效，用于治療脾胃濕滯、胸腹脹悶、 感冒發(fā)燒、濕熱泄瀉、疝氣腹痛等。黃杞葉中主要含有黃酮化合物、甾體類和三 萜類等成分。目前黃杞葉總黃酮的提取方法已見(jiàn)有部分公開(kāi)報(bào)道，如水煎、冷浸， 單純滲漉等法，不但總黃酮提取收率低，提取時(shí)間長(zhǎng)，所用于提取的乙醇濃度也 較高，最終成本也較高。

發(fā)明內(nèi)容

針對(duì)上述情況，為克服現(xiàn)有技術(shù)之缺陷，本發(fā)明之目的就是提供一種黃 杞葉總黃酮的制備方法，可有效解決現(xiàn)有技術(shù)中黃杞葉總黃酮提取收率低，時(shí)間 長(zhǎng)以及乙醇提取成本高的問(wèn)題。

本發(fā)明解決上述問(wèn)題的技術(shù)方案是，將干燥黃杞葉粉碎后置于55％-65％ 乙醇中浸泡4-7h，同時(shí)超聲處理，然后將浸泡液濾出。再以藥材量8倍體積(m1) 的55％-65％乙醇進(jìn)行滲漉提取，得滲漉液。優(yōu)選在整個(gè)浸泡和滲漉過(guò)程中，均在 提取容器內(nèi)進(jìn)行超聲處理。最后將所得浸泡液和滲漉液減壓濃縮至無(wú)醇味，再以 水稀釋，調(diào)整藥液濃度為相當(dāng)于含生藥0.25g/ml。加入同體積的乙酸乙酯萃取， 重復(fù)萃取3次，合并3次萃取液蒸干得干膏。將干膏以水溶解稀釋至質(zhì)量濃度約 為15-25mg/ml，樣品液上AB-8型大孔吸附樹(shù)脂柱，以乙醇洗脫，得洗脫液。 將洗脫液減壓回收乙醇，濃縮干燥，得黃杞葉總黃酮。經(jīng)紫外分光光度法測(cè)定， 黃杞葉總黃酮提取收率≥20％。該黃杞葉總黃酮有效用于制備保護(hù)血管藥物，實(shí) 現(xiàn)黃杞總黃酮在制備保護(hù)血管藥物中的應(yīng)用。