[發(fā)明專利]一種生物法來源的6″-O-琥珀酰大豆苷及其在制備神經(jīng)保護(hù)藥物和保健品方面的應(yīng)用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 202010639876.6
• 申請日: 2020-07-06
• 公開（公告）號(hào): CN112111545B
• 公開（公告）日: 2023-04-28
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 張森;段金廒;黃志恒;劉佳琪;張恩澤;俞子靜;黃子爭
• 申請（專利權(quán)）人: 南京中醫(yī)藥大學(xué)
• 主分類號(hào): C12P19/60
• 分類號(hào): C12P19/60;A61K31/7048;A61P25/00;A23L33/105;C12R1/07
• 代理公司: 南京知識(shí)律師事務(wù)所 32207
• 代理人: 吳頻梅

本發(fā)明公開了以下式(1)所述的一種生物法來源的6＇＇?O?琥珀酰大豆苷及其在制備神經(jīng)保護(hù)藥物和保健品方面的應(yīng)用，6＇＇?O?琥珀酰大豆苷為活性成分的藥物，屬于醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域。本發(fā)明所提供的6＇＇?O?琥珀酰大豆苷作為功能食品納豆中的一種稀有的功效物質(zhì)，是大豆異黃酮衍生物，具有神經(jīng)保護(hù)作用強(qiáng)的特點(diǎn)，為保健品開發(fā)及神經(jīng)保護(hù)藥物開發(fā)提供了新的選擇。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，涉及一種6″-O-琥珀酰大豆苷在制備神經(jīng)保護(hù)藥物和保健品方面的用途。

背景技術(shù)

大豆異黃酮(Soy?isoflavone)是一種植物化學(xué)素，主要來源于豆科植物的莢豆中。研究表明大豆具有預(yù)防心血管疾病、防治婦女骨質(zhì)疏松、治療糖尿病、腎病之功效。大豆中天然存在的大豆異黃酮共有12種，主要包括大豆苷元(daidzein)、染料木素(genistein)、大豆黃素(glycitein)，大豆苷(daidzin)、染料木苷(genistin)，丙二酰大豆苷(6″-O-malonydaidzin)、丙二酰染料木苷(6″-O-malonygenistin)等。

納豆(由大豆與納豆菌發(fā)酵而成)是一種功能性保健食品，研究表明相比于大豆而言，納豆的功能保健作用更強(qiáng)，具有溶血栓、抗腫瘤、降血壓、抗菌消毒、調(diào)整腸道功能、延緩衰老等多重功效。1999年，Toda等(Biol?Pharm?Bull,22(11),1193-1201)從納豆中分離獲得一種新型的功能性大豆異黃酮衍生物6″-O-琥珀酰大豆苷(6″-O-succinyldaidzin)，但由于含量極低，難以被商業(yè)推廣應(yīng)用，生物活性方面該文章報(bào)道黃酮類衍生物6″-O-琥珀酰大豆苷具有抗骨質(zhì)疏松的效果。采用生物發(fā)酵轉(zhuǎn)化的方法，獲得6″-O-琥珀酰大豆苷有望突破瓶頸(Journal?of?Food?Science,2010,75(1)：C128-33；Biotechnology?and?AppliedBiochemisstry,2015,62(2):255-259)，但由于發(fā)酵水平低，采用納豆菌或地衣芽孢桿菌，產(chǎn)能低于0.015g/L/h，難以大量獲得6″-O-琥珀酰大豆苷并進(jìn)行藥理活性研究，因此限制了其在醫(yī)藥、食品領(lǐng)域的應(yīng)用。

從納豆中分離獲得大豆異黃酮衍生物的方法通常存在成本高、純化步驟繁瑣等問題，且普通生物發(fā)酵轉(zhuǎn)化方法生產(chǎn)效率低，難以大規(guī)模獲取6″-O-琥珀酰大豆苷類的大豆異黃酮衍生物。如何制備高高效的大豆異黃酮基藥物、保健品是本發(fā)明的關(guān)鍵所在。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明要解決的技術(shù)問題是提供一種可以大規(guī)模生物法制備6″-O-琥珀酰大豆苷化合物及其該化合物在制備神經(jīng)保護(hù)藥物及保健品方面的應(yīng)用，本發(fā)明采用解淀粉芽孢桿菌FJ18作為發(fā)酵菌種,6″-O-琥珀酰大豆苷產(chǎn)能高于0.15g/L/h，產(chǎn)物易分離純化制備，首次研究并報(bào)道了該物質(zhì)顯著的神經(jīng)保護(hù)活性。

為解決本發(fā)明的技術(shù)問題，本發(fā)明的技術(shù)方案是：一種生物法來源的6″

-O-琥珀酰大豆苷的制備方法，所述的6″-O-琥珀酰大豆苷具有下式(1)

所示的結(jié)構(gòu)：

解淀粉芽孢桿菌FJ18在非水相中制備6″-O-琥珀酰大豆苷，反應(yīng)化學(xué)式如下：

以大豆苷元和糖基供體為原料，在解淀粉芽孢桿菌FJ18的催化作用下，大豆苷元7位酚羥基發(fā)生糖基化反應(yīng)，形成大豆苷元-7-O-葡萄糖苷；大豆苷元-7-O-葡萄糖苷繼而在解淀粉芽孢桿菌FJ18的催化作用下，葡萄糖基6”位羥基發(fā)生琥珀酰化，形成6″-O-琥珀酰大豆苷。

優(yōu)選的，具體步驟如下：

步驟(1)：將所述的解淀粉芽孢桿菌FJ18，進(jìn)行常規(guī)培養(yǎng)、發(fā)酵，發(fā)酵液過濾獲得濕菌體；

步驟(2)：以大豆苷元和糖基供體為原料，用磷酸緩沖溶液及非水相溶劑配制得到原料溶液；