[發明專利]一種熒光聚賴氨酸樹枝狀大分子、其制備方法和應用

有效

• 申請號: 202010637395.1
• 申請日: 2020-07-03
• 公開（公告）號: CN111704716B
• 公開（公告）日: 2021-07-13
• 發明（設計）人: 周珠賢;王楷淇;楊佳佳;申有青
• 申請（專利權）人: 浙江大學
• 主分類號: C08G69/40
• 分類號: C08G69/40;C08G83/00;C09K11/06;A61K49/00
• 代理公司: 杭州天勤知識產權代理有限公司 33224
• 代理人: 胡紅娟

1.一種熒光聚賴氨酸樹枝狀大分子的制備方法，其特征在于，所述熒光聚賴氨酸樹枝狀大分子具有如式(I)所示的結構式：

其中，A為帶氨基的熒光分子，R為賴氨酸，n表示賴氨酸的迭代次數，n選自1～8的自然數；所述帶氨基的熒光分子與賴氨酸通過酰胺鍵形式連接；

所述熒光聚賴氨酸樹枝狀大分子的制備方法包括如下步驟：

(1)對含有雙氨基保護的賴氨酸單體的羧基活化，得到活化賴氨酸單體；

(2)將帶氨基的熒光分子和活化賴氨酸單體于溶劑中發生酰胺反應，經提純得到第0.5代的熒光聚賴氨酸樹枝狀大分子，再經脫保護得到第1代的熒光聚賴氨酸樹枝狀大分子；

(3)將上一步得到的熒光聚賴氨酸樹枝狀大分子加入縛酸劑后，與步驟(1)的活化賴氨酸單體在溶劑中發生酰胺反應，經提純得到第1.5代的熒光聚賴氨酸樹枝狀大分子，再經脫保護得到第2代的熒光聚賴氨酸樹枝狀大分子；

(4)重復步驟(3)，將上一步得到的熒光聚賴氨酸樹枝狀大分子加入縛酸劑后，與步驟(1)的活化賴氨酸單體在溶劑中發生酰胺反應，經提純得到第n-0.5代的熒光聚賴氨酸樹枝狀大分子，再經脫保護得到第n代的熒光聚賴氨酸樹枝狀大分子；所述n選自1～8的自然數；

步驟(1)中所述活化賴氨酸單體的結構式如式(II)所示：

其中R₁和R₂為氨基的保護基團，R₃為羧基的活化基團；R₁、R₂獨自為叔丁氧羰基、N-芴甲氧羰酰基、芐氧羰基中的任意一種；R₃選自五氟苯酚基、或N-羥基琥珀酰亞胺基；

步驟(2)中，所述活化賴氨酸單體與帶氨基的熒光分子中氨基的摩爾比為2～3:1；步驟(3)和步驟(4)中，所述活化賴氨酸單體與上一步得到的熒光聚賴氨酸樹枝狀大分子中氨基的摩爾比為2～3:1；

所述脫保護是加入脫保護劑，其中脫保護劑與第n-0.5代熒光聚賴氨酸樹枝狀大分子中氨基的摩爾比為2～3:1；

步驟(3)和步驟(4)中，所述縛酸劑與熒光聚賴氨酸樹枝狀大分子中氨基的摩爾比為1.5～2:1；

所述脫保護劑包括三氟乙酸或鹽酸，所述縛酸劑包括N,N'-二異丙基乙胺或三乙胺。

2.根據權利要求1所述的熒光聚賴氨酸樹枝狀大分子的制備方法，其特征在于，所述帶氨基的熒光分子包括苝酰亞胺衍生物、羅丹明、花菁染料中任一種。

3.根據權利要求1所述的熒光聚賴氨酸樹枝狀大分子的制備方法，其特征在于，其中R₁和R₂為叔丁氧羰基，R₃為五氟苯酚基。

4.根據權利要求1所述的熒光聚賴氨酸樹枝狀大分子的制備方法，其特征在于，當n為1或2時，熒光聚賴氨酸樹枝狀大分子采用柱層析分離提純；當n為大于2的自然數時，熒光聚賴氨酸樹枝狀大分子采用沉淀方式提純。

5.根據權利要求1所述的制備方法得到的熒光聚賴氨酸樹枝狀大分子在細胞水平或動物組織水平的示蹤成像分析、靶向定位分析中的應用。