[發明專利]一種CK8基因表達檢測試劑盒

有效

• 申請號: 202010637354.2
• 申請日: 2020-07-03
• 公開（公告）號: CN111621570B
• 公開（公告）日: 2023-09-19
• 發明（設計）人: 吳詩揚;黃潔芬;許嘉森;劉志明;劉芳
• 申請（專利權）人: 益善生物技術股份有限公司
• 主分類號: C12Q1/6886
• 分類號: C12Q1/6886;C12Q1/682;C12Q1/6841;C12N15/11
• 代理公司: 廣州廣典知識產權代理事務所(普通合伙) 44365
• 代理人: 庹玖玲;萬志香

1.一種CK8基因表達檢測試劑盒，其特征在于，包括針對檢測CK8基因mRNA的捕獲探針以及信號放大系統；所述信號放大系統包括末端修飾有熒光基團的擴增探針H1和末端修飾有熒光基團的擴增探針H2；其中，

所述捕獲探針用于連接CK8基因mRNA與擴增探針H1，每條捕獲探針從5’端到3’端的堿基組成依次為：P1序列、間隔臂序列、能與CK8基因mRNA結合的特異性P2序列；所述P1序列為長度為24～26bp，不存在發夾結構，探針內部和探針間不形成二聚體、不存在錯配，與特異性P2序列和CK8基因mRNA之間均不存在特異性結合的序列；所述特異性P2序列長度為18～24bp，且特異性P2序列從3’端到5’端的第2～9個堿基處有2～8個堿基進行了鎖核酸修飾；

所述擴增探針H1為雙熒光標記的發夾結構，用于連接捕獲探針與擴增探針H2，每條擴增探針H1從5’端到3’端的堿基組成依次為：能與捕獲探針P1序列互補配對的P3序列、P4序列；所述P3序列的3’端堿基與P4序列的3’端堿基互補配對形成發夾結構，P3序列的5’端和P4序列的3’端均修飾有相同的熒光基團；所述P4序列為長度為24～26bp，探針內部不形成二聚體、不存在發夾結構、不存在錯配，與P1、P2和CK8基因mRNA之間均不存在特異性結合的序列；

所述擴增探針H2為雙熒光標記的發夾結構，用于連接擴增探針H1，每條擴增探針H2從5’端到3’端的堿基組成依次為：能與擴增探針H1的P3序列互補配對的P1序列、能與擴增探針H1的P4序列互補配對的P5序列；所述P1序列與捕獲探針的P1序列堿基組成相同；所述P1序列5’端堿基與P5序列的5’端堿基互補配對形成發夾結構，P1序列的5’端和P5序列的3’端均修飾有與擴增探針H1相同的熒光基團；

針對CK8基因mRNA的捕獲探針中，P1序列為SEQ?ID?NO.1，特異性P2序列選自SEQ?IDNO.3～SEQ?ID?NO.12中的5條或5條以上；

針對CK8基因mRNA的擴增探針H1中，P3序列為SEQ?ID?NO.23，P4序列為SEQ?ID?NO.25；

針對CK8基因mRNA的擴增探針H2中，P5序列為SEQ?ID?NO.27。

2.根據權利要求1所述的CK8基因表達檢測試劑盒，其特征在于，所述每條捕獲探針中特異性P2序列從3’端到5’端的第2～8個堿基處有2～4個堿基進行了鎖核酸修飾。

3.根據權利要求2所述的CK8基因表達檢測試劑盒，其特征在于，所述每條捕獲探針中特異性P2序列從3’端到5’端的第2～5個堿基處有2～4個堿基進行了鎖核酸修飾。