[發(fā)明專利]一株暹羅芽孢桿菌及其應(yīng)用

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 202010636819.2
• 申請日: 2020-07-03
• 公開（公告）號: CN111662849A
• 公開（公告）日: 2020-09-15
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 張忠;張瑞玲;吳國星;樂倩倩;張心雨;張倩
• 申請（專利權(quán)）人: 山東第一醫(yī)科大學(xué)（山東省醫(yī)學(xué)科學(xué)院）
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;A61K35/742;A61P31/10;A23B9/28;A23B9/14;A01K67/04;C12R1/07
• 代理公司: 北京慕達星云知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(特殊普通合伙) 11465
• 代理人: 趙徐平

本發(fā)明提供了一株暹羅芽孢桿菌(Bacillus siamensis)MC2?1，保藏編號為CGMCC No.15974，保藏日期為2018年6月20日。本發(fā)明暹羅芽孢桿菌MC2?1 Bacillus siamensis CGMCC No.15974有產(chǎn)蛋白酶、淀粉酶和脂肪酶活性，分離自美洲大蠊Periplaneta americana消化道。本發(fā)明菌株有顯著拮抗球孢白僵菌Beauveria bassiana的功能，并且對家蠶幼蟲安全，是一種有應(yīng)用前景的家蠶白僵病預(yù)防微生物。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及生物技術(shù)領(lǐng)域，更具體的說是涉及一株暹羅芽孢桿菌及其應(yīng)用。

背景技術(shù)

我國的家蠶飼養(yǎng)有5000多年的歷史，也是我國經(jīng)濟動物養(yǎng)殖的重要典范，近年來，我國的蠶繭產(chǎn)量約占全球總產(chǎn)量的75％，保持世界第一大繭絲生產(chǎn)國地位。白僵病是家蠶真菌病害之一，是由球孢白僵菌(Beauveriabassiana)經(jīng)皮膚侵入家蠶體內(nèi)而引起的病害，若處理不當(dāng)，可造成白僵病在蠶室內(nèi)的流行，嚴(yán)重影響蠶繭產(chǎn)量，甚至絕收。家蠶白僵病傳染途徑有接觸傳染和創(chuàng)傷傳染兩種，其中以接觸傳染為主。白僵病蠶死后，蠶體先軟后變硬，蟲體內(nèi)充滿了菌絲，1-2天后，體內(nèi)的菌絲穿過體壁，在體表長出白色的氣生菌絲，氣生菌絲上逐漸長出白色粉狀的分生孢子，覆蓋家蠶全身體表，仿佛蠶體表面長滿白毛或白粉，故稱為“白僵蠶”。白僵菌喜濕怕干，在多濕的環(huán)境和多雨的季節(jié)，蠶期若忽視消毒防病工作，家蠶就很容易發(fā)生白僵病。

目前，對于家蠶白僵病的防控主要以徹底消毒、通風(fēng)、大量使用消毒劑為主，但是，這種方法費時費力，且難以做到完全控制，一旦部分家蠶發(fā)生白僵病，如處理不及時，會造成種群內(nèi)流行，而在處理過程中，若用手去收拾罹病的僵蠶，再接觸桑葉、養(yǎng)蠶器具或桑葉，則會造成新的家蠶感染。

因此，研發(fā)一種需簡便易行、成本低廉的防控家蠶白僵病的方法是本領(lǐng)域人員亟需解決的技術(shù)問題。

發(fā)明內(nèi)容

有鑒于此，本發(fā)明提供了一株暹羅芽孢桿菌及其應(yīng)用。

為了實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用如下技術(shù)方案：

一株暹羅芽孢桿菌(Bacillus siamensis)MC2-1，保藏編號為CGMCC No.15974，已保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，簡稱CGMCC，地址：北京市朝陽區(qū)北辰西路1號院3號中國科學(xué)院微生物研究所，保藏日期為2018年6月20日，分類命名：分類命名：暹羅芽孢桿菌Bacillus siamensis。

本發(fā)明提供的暹羅芽孢桿菌(Bacillus siamensis)MC2-1的生物學(xué)特性為：

LB培養(yǎng)基(LB Medium)培養(yǎng)的菌落呈現(xiàn)典型芽孢桿菌特征，菌落形態(tài)為圓形或不規(guī)則形，菌落直徑2～4mm，邊緣粗糙。菌落表面粗糙褶皺，白色不透明；可在4-54℃生長，革蘭氏染色為陽性。

進一步，上述暹羅芽孢桿菌在家蠶白僵病的防控中的應(yīng)用。

進一步，上述暹羅芽孢桿菌在家蠶白僵病的防控中的應(yīng)用，具體步驟為：將上述暹羅芽孢桿菌MC2-1制成暹羅芽孢桿菌MC2-1菌液均勻噴灑至家蠶飼養(yǎng)器具的表面、蟻蠶體表及喂食的桑葉。

進一步，將上述暹羅芽孢桿菌MC2-1菌液均勻噴灑至糧食表面至表面濕潤而無液體滴下。

進一步，上述暹羅芽孢桿菌MC2-1菌液的制備方法包括以下步驟：

(1)選用標(biāo)準(zhǔn)固體LB培養(yǎng)基，調(diào)節(jié)pH值至5.5-8.5，待平板培養(yǎng)皿冷卻至室溫后，接種菌株暹羅芽孢桿菌MC2-1，在溫度為25℃-35℃的條件下培養(yǎng)1-3天，得擴繁后的暹羅芽孢桿菌MC2-1菌落；

(2)選用標(biāo)準(zhǔn)液體LB培養(yǎng)基，調(diào)節(jié)pH值至5.5-8.5，接種步驟(1)所得擴繁后的暹羅芽孢桿菌MC2-1菌落，在溫度為25℃-35℃的條件下，轉(zhuǎn)速為220rpm的搖床上培養(yǎng)1-3天，得培養(yǎng)液；