[發明專利]仁術健胃顆粒指紋圖譜的檢測方法

有效

• 申請號: 202010634856.X
• 申請日: 2020-07-03
• 公開（公告）號: CN111948330B
• 公開（公告）日: 2022-06-17
• 發明（設計）人: 鄭艷萍;刁和芳;趙開軍;徐董欣;王海麗
• 申請（專利權）人: 江蘇弘典中藥產業研究院有限公司;南京中山制藥有限公司
• 主分類號: G01N30/88
• 分類號: G01N30/88
• 代理公司: 南京經緯專利商標代理有限公司 32200
• 代理人: 陸志斌

1.一種仁術健胃顆粒指紋圖譜的檢測方法，其特征在于，包括以下步驟：

步驟1、仁術健胃顆粒供試品溶液的制備：

取不同批次的仁術健胃顆粒，分別精密稱取仁術健胃顆粒樣品，置錐形瓶中，加甲醇，超聲處理，靜置，取上清液，過微孔濾膜，得供試品溶液；

步驟2、混合標準品溶液的制備：

精密稱定綠原酸、毛蕊異黃酮葡萄糖苷、木樨草苷、黃芩苷、黃芩素對照品，置于容量瓶中，用甲醇定容至刻度，搖勻，制成混合標準品溶液；

步驟3、精密吸取步驟2的混合標準品溶液，注入高效液相色譜儀，記錄混合標準品色譜圖；

步驟4，分別精密吸取步驟1的各批次供試品溶液，注入高效液相色譜儀，記錄樣品色譜圖；

步驟5，將步驟4中獲得的仁術健胃顆粒供試品溶液的指紋圖譜導出，并導入中藥色譜指紋圖譜相似度評價系統2004A；選擇不同批次仁術健胃顆粒供試品的色譜圖中均存在的色譜峰作為共有峰；用平均值計算法生成仁術健胃顆粒的對照指紋圖譜，計算各共有峰的相對保留時間和相對峰面積；并根據混合標準品溶液色譜圖的保留時間，標注對照指紋圖譜中峰的化學成分；

步驟3和步驟4中，液相色譜條件為：色譜柱：YMC-Pack ODS-A，流動相：乙腈為A相，0.1%乙酸水為B相，紫外檢測器，檢測波長：260nm，柱溫35℃，流速1.0mL/min，進樣體積：10μL，梯度洗脫程序為：0.01min，10%乙腈、5min，10%乙腈、40min，40%乙腈、60min，60%乙腈。

2.根據權利要求1所述的仁術健胃顆粒指紋圖譜的檢測方法，其特征在于，步驟1仁術健胃顆粒供試品溶液制備方法為：取10批次的仁術健胃顆粒，精密稱取仁術健胃顆粒樣品2g置100mL錐形瓶中，加甲醇30mL，超聲處理30min，靜置，取上清液，過0.22μm微孔濾膜，得供試品溶液。

3.根據權利要求1所述的仁術健胃顆粒指紋圖譜的檢測方法，其特征在于，步驟2混合標準品溶液的制備：取精密稱定綠原酸、毛蕊異黃酮葡萄糖苷、木樨草苷、黃芩苷、黃芩素對照品，置于容量瓶中，用甲醇定容至刻度，搖勻，制成濃度為0.067mg/mL的綠原酸、0.114mg/mL毛蕊異黃酮葡萄糖苷、0.072mg/mL木樨草苷、0.086mg/mL黃芩苷、0.094mg/mL黃芩素混合對照品溶液。

4.根據權利要求1所述的仁術健胃顆粒指紋圖譜的檢測方法，其特征在于，指紋譜圖中共有峰18個；其中綠原酸保留時間為13.46min，為2號峰；毛蕊異黃酮葡萄糖苷的保留時間為21.69min，為5號峰；木樨草苷的保留時間為23.29min，為6號峰；黃芩苷的保留時間為40.19min，為12號峰；黃芩素的保留時間為42.43min，為13號峰。