[發明專利]抗SARS-COV-2病毒S蛋白的單鏈抗體及其用途

有效

• 申請號: 202010633208.2
• 申請日: 2020-07-02
• 公開（公告）號: CN111848789B
• 公開（公告）日: 2022-04-22
• 發明（設計）人: 羅紹祥;易汪雪;張芳;王靜
• 申請（專利權）人: 武漢華美生物工程有限公司
• 主分類號: C07K16/12
• 分類號: C07K16/12;C07K16/46;C12N15/13;A61K39/42;A61P31/14;G01N33/569;G01N33/558;G01N33/543
• 代理公司: 北京眾達德權知識產權代理有限公司 11570
• 代理人: 江慧

本發明提供了一種抗SARS?COV?2病毒S蛋白的單鏈抗體，所述單鏈抗體包括單鏈抗體1和單鏈抗體2中的至少一種：單鏈抗體1：具有如SEQ ID NO：1?SEQ ID NO：3所示的氨基酸序列的三個互補決定區的重鏈和具有如SEQ ID NO：4?SEQ ID NO：6所示的氨基酸序列的三個互補決定區的輕鏈；單鏈抗體2：具有如SEQ ID NO：7?SEQ ID NO：9所示的氨基酸序列的三個互補決定區的重鏈和具有如SEQ ID NO：10?SEQ ID NO：12所示的氨基酸序列的三個互補決定區的輕鏈。本發明還提供所述單鏈抗體在制備SARS?COV?2病毒檢測試試劑盒中的用途。

技術領域

本發明屬于生物技術領域，涉及一種抗SARS-COV-2病毒S蛋白的單鏈抗體及其用途。

背景技術

冠狀病毒是一種以哺乳動物和鳥類為宿主的單鏈RNA病毒。可以感染人的冠狀病毒包括229E、NL63、OC43、HKU1、SARS-CoV和MERS-CoV。這些病毒可以引起一系列輕微的季節性疾病，或者導致嚴重疾病爆發，以SARS-CoV和MERS-CoV導致的嚴重急性呼吸綜合征(SARS)和中東呼吸系統綜合征(MERS)最為典型。SARS-CoV-2是第七種可以感染人類的冠狀病毒，該病毒的傳染性比SARS-CoV和MERS-CoV更強，導致COVID-19的大范圍爆發。

冠狀病毒由雙層脂質的囊膜組成，包含刺突蛋白、包膜蛋白、膜蛋白以及核衣殼蛋白。其中，膜蛋白介導病毒與宿主ACE2蛋白的相互作用，SARS-CoV-2與SARS-CoV使用相同的入侵受體。序列比對發現，SARS-CoV-2與SARS-CoV的氨基酸序列同源性為80％。S蛋白分為S1和S2兩個亞基，其中S1的功能是與宿主受體結合，S2的主要功能是促進病毒和細胞膜融合。S1的RBD結構域與ACE2蛋白結合的高親和力導致病毒能在人群中快速傳播。S蛋白暴露于病毒表面，含有大量的抗原決定簇，可以產生針對病毒的保護性抗體。因此，S蛋白是疾病診斷和治療最重要的靶點。

單鏈抗體(single chain antibody fragment，scFv)，是由抗體重鏈可變區和輕鏈可變區通過15～20個氨基酸的短肽(linker)連接而成。scFv單鏈抗體的優點：可去除非特異性反應的競爭性表面蛋白，腫瘤顯象背景更加清晰性；免疫源性小，可消除人抗鼠的排異反應；在體內循環的半衰期短，易清除，利于解毒排出；易于與毒素或酶基因連接，便于直接獲得免疫毒素或酶標抗體等。

因此，亟需開發新的用于針對SARS-COV-2的單鏈抗體。

發明內容

為了解決所述技術問題，本發明提供了一種抗SARS-COV-2病毒S蛋白的單鏈抗體及其用途，可以特異性識別RBD蛋白，所述單鏈抗體與RBD結合的EC50為0.4212ng/ml～325.24ng/ml。

第一方面，本發明提供了抗SARS-COV-2病毒S蛋白的單鏈抗體，所述單鏈抗體能識別SARS-COV-2病毒S蛋白的RBD結構域，所述單鏈抗體包括單鏈抗體1和單鏈抗體2中的至少一種：

單鏈抗體1：包括具有如SEQ ID NO：1-SEQ ID NO：3所示的氨基酸序列的三個互補決定區的重鏈和具有如SEQ ID NO：4-SEQ ID NO：6所示的氨基酸序列的三個互補決定區的輕鏈；

單鏈抗體2：包括具有如SEQ ID NO：7-SEQ ID NO：9所示的氨基酸序列的三個互補決定區的重鏈和具有如SEQ ID NO：10-SEQ ID NO：12所示的氨基酸序列的三個互補決定區的輕鏈。

進一步地，所述單鏈抗體包括如下的一種或多種單鏈抗體：

H6單鏈抗體：包括具有如SEQ ID NO：13所示氨基酸序列的重鏈和具有如SEQ IDNO：14所示氨基酸序列的輕鏈；

D2單鏈抗體：包括具有如SEQ ID NO：15所示氨基酸序列的重鏈和具有如SEQ IDNO：16所示氨基酸序列的輕鏈。