[發明專利]一種催化活力提高的亮氨酸脫氫酶突變體及其應用有效
| 申請號： | 202010632950.1 | 申請日： | 2020-07-02 |
| 公開（公告）號： | CN111826360B | 公開（公告）日： | 2022-02-08 |
| 發明（設計）人： | 饒志明;徐美娟;陳佳杰;張顯;楊套偉;邵明龍 | 申請（專利權）人： | 江南大學 |
| 主分類號： | C12N9/06 | 分類號： | C12N9/06;C12N15/53;C12N15/70;C12N1/21;C12P13/04;C12R1/19 |
| 代理公司： | 哈爾濱市陽光惠遠知識產權代理有限公司 23211 | 代理人： | 林娟 |
| 地址： | 214000 江蘇*** | 國省代碼： | 江蘇;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 催化 活力 提高 亮氨酸 脫氫酶 突變體 及其 應用 | ||
1.一種亮氨酸脫氫酶突變體，所述亮氨酸脫氫酶突變體與氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的亮氨酸脫氫酶相比，切除了C端殘基364位精氨酸至374位甘氨酸。
2.如權利要求1所述的一種亮氨酸脫氫酶突變體，其特征在于，編碼所述亮氨酸脫氫酶突變體的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。
3.編碼權利要求1所述的亮氨酸脫氫酶突變體的基因。
4.攜帶權利要求3所述基因的重組載體。
5.如權利要求4所述的重組載體，其特征在于，其出發載體為pET-28a質粒。
6.攜帶權利要求3所述的基因，或權利要求4或5所述重組載體的工程化細胞。
7.如權利要求6所述的工程化細胞，其特征在于，其宿主細胞為細菌或真菌。
8.權利要求1所述的亮氨酸脫氫酶突變體的制備方法，其特征在于，所述方法為將權利要求6或7所述的工程化細胞接入到培養基中進行發酵，發酵結束后，收集菌液，將菌液離心后收集菌體，將菌體重懸后進行破碎，將細胞破碎液離心后收集上清，從上清液中分離得到亮氨酸脫氫酶突變體。
9.權利要求1所述亮氨酸脫氫酶突變體，或權利要求3所述基因，或權利要求4或5所述的重組載體，或權利要求6或7所述工程化細胞，或權利要求8所述制備方法在制備L-2-氨基丁酸或含L-2-氨基丁酸的產品中的應用。
10.一種制備L-2-氨基丁酸的方法，其特征在于，以權利要求1所述亮氨酸脫氫酶突變體或權利要求6或7所述工程化細胞為催化劑，以2-酮丁酸為底物，催化制備L-2-氨基丁酸。
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