[發明專利]濃縮的水包油型亞微乳佐劑及其制備方法

在審

• 申請號: 202010631457.8
• 申請日: 2020-07-03
• 公開（公告）號: CN113876943A
• 公開（公告）日: 2022-01-04
• 發明（設計）人: 謝良志;張延靜;張建東
• 申請（專利權）人: 神州細胞工程有限公司
• 主分類號: A61K39/39
• 分類號: A61K39/39;A61K9/107;A61K47/02;A61K47/06;A61K47/10;A61K47/12;A61K47/18;A61K47/22;A61K47/24;A61K47/26;A61K47/44
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本發明屬于疫苗的水包油乳液佐劑領域，涉及一種濃縮的水包油型亞微乳佐劑及其制備方法。在優選的技術方案中，亞微乳佐劑為2、3、4、6、8倍濃度的MF59。發明制備的濃縮的微乳佐劑相對穩定，佐劑粒徑受制備濃度的影響小，可用作疫苗佐劑。在使用時可以按需稀釋，提高設備利用率，降低生產成本。

技術領域

本發明涉及例如制備疫苗的水包油乳液佐劑的領域，具體地，涉及制備濃縮的水包油型亞微乳佐劑及其制備方法。

技術背景

疫苗佐劑MF59是一種鯊烯、聚山梨酯80(也稱作吐溫80)和去水山梨糖醇三油酸酯(也稱作司盤85)的亞微米水包油乳液。它也可包含枸櫞酸根離子，如10mM枸櫞酸鈉緩沖劑。

中國專利CN102740832B及CN102858322B披露該乳液的體積組成可以是約5％角鯊烯、約0.5％吐溫80和約0.5％司盤85,而且包含10mM枸櫞酸鈉緩沖劑。并且提供了一種制備微流化水包油乳液(例如MF59)的改良方法，特別是適合用于商業規模和使用過濾的方法。其中CN102740832B提供了一種制備微流化水包油乳液的裝置：包括交互作用室，其包含多條Z型管道和包含至少一條管道的輔助處理模塊，其中所述輔助處理模塊位于交互作用室下游。

工業化生產中，設備的利用率極為重要，濃縮的乳液佐劑意味著降低的生產成本，節約的保存空間。

發明內容

本發明提供了一種制備濃縮的水包油型亞微乳佐劑的方法，其中該方法包括步驟：

i)，制備具有第一平均油滴尺寸的第一乳液，和

ii)微流化第一乳液形成具有比第一平均油滴尺寸小的第二平均油滴尺寸的第二乳液，

其中，亞微乳佐劑中油的含量是5-50％v/w(不含5％)，優選地

油的含量是10％、15％、20％、30％和40％(v/w)。

在本發明的一個實施方案中，

(ii)的壓力是500-1400bar、微流化次數為2-9次且冷卻水溫度是7-25℃。

在本發明的一個實施方案中，濃縮的水包油型亞微乳佐劑包含油、表面活性劑、緩沖劑和水。

在本發明的一個實施方案中，

油選自花生油、大豆油、椰子油、橄欖油、霍霍巴油、紅花油、棉花籽油、葵花籽油、芝麻籽油、玉米油、魚肝油、鯨油、生育酚、鯊烯中的一種或多種；

表面活性劑選自聚氧乙烯去水山梨糖醇酯表面活性劑(吐溫)、磷脂、衍生自十二烷醇、十六烷醇、十八烷醇和油醇的聚氧乙烯脂肪醚(芐澤表面活性劑)、聚氧乙烯-9-月桂醚以及去水山梨糖醇酯(司盤)；優選地，是聚山梨酯20、聚山梨酯80、磷脂酰膽堿(卵磷脂)、芐澤30、司盤85的一種或多種；

緩沖劑選自：枸櫞酸緩沖劑、磷酸鹽緩沖劑、Tris緩沖劑、硼酸鹽緩沖劑、琥珀酸鹽緩沖劑、組氨酸緩沖劑；

在本發明的一個實施方案中，角鯊烯、司盤85、聚山梨酯80的重量比是約12.9:1.5:1.5；且最終形成的油相和水相混合物中角鯊烯的含量是5-50％v/w(不含5％)，優選地，油相和水相混合物中角鯊烯的含量是10％、15％、20％、30％和40％。

在本發明的一個實施方案中，濃縮的水包油型亞微乳佐劑含有角鯊烯、司盤85、聚山梨酯80及枸櫞酸緩沖劑，其中角鯊烯、司盤85、聚山梨酯80的重量比是約12.9:1.5:1.5；以及枸櫞酸緩沖劑濃度為10mM；其中角鯊烯的含量是5-50％v/w(不含5％)，即亞微乳佐劑為N倍濃度的MF59，N為1-10的、不包含1的數；優選地，亞微乳佐劑中角鯊烯的含量是10％、15％、20％、30％和40％(v/w)，即2、3、4、6、8倍濃度的MF59。