[發明專利]一種SARS-CoV-2假病毒

在審

• 申請號: 202010630831.2
• 申請日: 2020-07-03
• 公開（公告）號: CN113880924A
• 公開（公告）日: 2022-01-04
• 發明（設計）人: 王佑春;李倩倩;黃維金;聶建輝;吳佳靜;張黎
• 申請（專利權）人: 中國食品藥品檢定研究院
• 主分類號: C07K14/165
• 分類號: C07K14/165;C07K19/00;C12N15/50;C12N15/62;C12N5/10;C12N7/01;G01N33/569
• 代理公司: 中國貿促會專利商標事務所有限公司 11038
• 代理人: 林遠成

1.截短的Spike蛋白或其變體，其中，與野生的SARS-CoV-2的Spike蛋白相比，(1)所述截短的Spike蛋白的C端截短了13-23個氨基酸，和/或，(2)所述截短的Spike蛋白在下述位置上的氨基酸被缺失：與SEQ ID NO:1的第669-672位對應的位置；

其中，所述變體與所述截短的Spike蛋白相比，具有一個或多個氨基酸的置換、缺失或添加(例如1個，2個，3個，4個，5個，6個，7個，8個，9個或10個氨基酸的置換、缺失或添加；例如1個，2個，3個，4個，5個，6個，7個，8個，9個或10個氨基酸的保守置換)。

2.權利要求1所述的截短的Spike蛋白或其變體，其中，與野生的SARS-CoV-2的Spike蛋白相比，該截短的Spike蛋白的C端截短了13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23個氨基酸；

優選地，與野生的SARS-CoV-2的Spike蛋白相比，所述截短的Spike蛋白還含有缺失，即，在下述位置上的氨基酸被缺失：與SEQ ID NO:1的第669-672位對應的位置；

優選地，所述被缺失的氨基酸為furin酶切位點；

優選地，所述被缺失的氨基酸為PRRA。

3.權利要求1所述的截短的Spike蛋白或其變體，其中，與野生的SARS-CoV-2的Spike蛋白相比，所述截短的Spike蛋白在下述位置上的氨基酸被缺失：與SEQ ID NO:1的第669-672位對應的位置；

優選地，與野生的SARS-CoV-2的Spike蛋白相比，所述截短的Spike蛋白的C端還被截短了13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23個氨基酸；

優選地，所述被缺失的氨基酸為furin酶切位點；

優選地，所述被缺失的氨基酸為PRRA。

4.權利要求1-3任一項所述的截短的Spike蛋白或其變體，其具有選自下列的氨基酸序列：

(1)SEQ ID NO:2-SEQ ID NO:23；

(2)與SEQ ID NO:2-SEQ ID NO:23任一項所示的序列相比具有一個或多個氨基酸的置換、缺失或添加(例如1個，2個，3個，4個，5個，6個，7個，8個，9個或10個氨基酸的置換、缺失或添加；例如1個，2個，3個，4個，5個，6個，7個，8個，9個或10個氨基酸的保守置換)的氨基酸序列；

(3)與SEQ ID NO:2-SEQ ID NO:23任一項所示的序列相比，具有至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、或至少99％的序列同一性的氨基酸序列。

5.融合蛋白，其包含權利要求1-4任一項所述的截短的Spike蛋白或其變體以及另外的多肽；

優選地，所述另外的多肽任選地通過接頭連接至所述蛋白的N端或C端；

優選地，所述另外的多肽選自標簽、信號肽或導肽、可檢測的標記(例如，熒光素酶(fluc)、綠色熒光蛋白(GFP))，或其任何組合；

優選地，所述信號肽選自Spike蛋白、CD5、CD14、IgG重鏈、免疫球蛋白輕鏈(Immunoglobulin light chain)、組織型纖溶酶原激活物(tPA)、SCGB1D1、血清蛋白前蛋白(Serum albumin preproprotein)、Gluc、IL-2和IFNα2的天然信號肽；

優選地，所述標簽包含組氨酸標簽(His)、谷胱甘肽巰基轉移酶標簽(GST)、流感病毒血凝素(HA)、Flag-tag；

優選地，所述信號肽具有選自下列的氨基酸序列：SEQ ID NO:24-SEQ ID NO:33；

優選地，所述標簽具有如SEQ ID NO:35所示的氨基酸序列。

6.一種分離的核酸分子，其編碼權利要求1-4任一項所述的截短的Spike蛋白或其變體，或者編碼權利要求5的融合蛋白。