[發明專利]唾液斑中微生物群落結構變化在預測唾液斑跡殘留時間中的應用

在審

• 申請號: 202010630365.8
• 申請日: 2020-07-01
• 公開（公告）號: CN113881787A
• 公開（公告）日: 2022-01-04
• 發明（設計）人: 張瑾;楊雪瑩;劉開會;史祺云;王鵬;高珊;張穎;郝金萍;徐小玉;暢晶晶;張廣鋒;朱典;郭柯利;杜猛
• 申請（專利權）人: 公安部物證鑒定中心
• 主分類號: C12Q1/689
• 分類號: C12Q1/689;G16B50/00
• 代理公司: 北京紀凱知識產權代理有限公司 11245
• 代理人: 白艷

本發明公開了唾液斑中微生物群落結構變化在預測唾液斑跡殘留時間中的應用。本發明提供了檢測唾液斑跡中微生物群落結構的物質在預測唾液斑跡殘留時間中的應用。或本發明提供了檢測唾液斑跡中微生物群落結構的物質在制備預測唾液斑跡殘留時間產品中的應用。本發明應用16S擴增子測序技術，刻畫了唾液斑跡中微生物群落結構隨殘留時間變化規律，并應用機器學習(隨機森林)模型建立唾液斑跡殘留時間預測方法，為案件快速偵辦、深度發掘涉案生物物證信息、提升證據價值、提升法醫DNA辦案能力提供理論依據和技術支撐。

技術領域

本發明屬于生物技術領域，尤其涉及一種唾液斑中微生物群落結構變化在預測唾液斑跡殘留時間中的應用。

背景技術

唾液斑跡是各類案事件現場最為常見的生物物證種類之一，既包括口腔拭子樣本，也包括煙蒂、餐飲具擦拭物、咬痕等等可能粘附有口腔上皮細胞的微量現場檢材，通過現有的DNA STR檢驗，可以為案件偵辦提供個體識別和親子鑒定信息。

煙蒂樣本是各類案事件現場最為常見的唾液斑類生物檢材，其中蘊含大量來自于供體口腔的核酸信息。在刑事科學技術領域，煙蒂樣本分析方法成熟，檢驗成功率高，可通過STR等常規DNA分析手段，提供個體識別和親子鑒定的重要依據，為涉案人員識別、案件偵辦、法庭審判提供線索和依據。在常規法醫物證檢驗的基礎上，準確判斷煙蒂樣本殘留時間，可為人員涉案關系梳理、案發時間推斷、案發過程重建提供線索，進一步提升證據價值。

然而，在當前公安機關案件中，面臨著大量的發生在涉及人員復雜的商場、賓館、網吧等公共場所，監控視頻存在死角、不能有效覆蓋，人員流動大、技偵手段不能有效識別，無明確嫌疑對象、大規模排查成本過高，DNA STR比中犯罪嫌疑人拒不交代、又不能明確排除的案件。由于以上制約因素，這類案件在偵辦中往往無法及時明確案發時間、梳理人員關系、重建案發過程、劃定排查范圍，繼而導致案件不能快速有效偵辦。

推斷現場生物斑跡遺留時間，和推斷尸體死亡時間一樣，是一條較為有效、直接的工作途徑，可以從時間維度為案件偵辦提供方向、為嫌疑人排查提供線索、為法庭審判完善證據。正是由于現場生物斑跡遺留時間在案件偵辦中的獨特作用，近年來已越來越被法庭科學研究人員重視，并運用光譜成像、PCR等光學、生物學方法從細胞、蛋白、DNA、RNA、微生物等不同角度開展了大量研究，然而由于載體材質、樣本需求量、方法靈敏度等的限制，尚未形成可應用于辦案實戰的生物斑跡殘留時間預測方法。

微生物的存在是廣泛的，不僅存在于人體口腔、腸道、生殖道、皮膚等各種組織，還存在于土壤、水域等自然環境，在尸體內外環境中也有廣泛存在。微生物群落結構的變化規律也可能在尸體死亡時間推斷、指掌紋遺留時間推斷、土壤地域來源推斷中具有廣泛的應用潛力。

擴增子測序主要通過對特定長度的PCR產物進行測序分析，是研究環境微生物多樣性及群落組成差異的重要技術手段之一。一般分為16S rDNA測序、18S rDNA測序、ITS測序及功能基因區域測序。其中，16S rDNA為編碼原核生物核糖體小亞基rRNA的DNA序列，具有10個保守區域和9個高變區域(V1-V9)，其中保守區在細菌間差異不大，高變區具有屬或種的特異性，對16S rDNA某個高變區進行測序，被認為是最適于細菌系統發育和分類鑒定的指標。擴增子測序技術，成本低廉、周期較短、對樣品質量要求較低，廣泛應用于各種環境體系微生物研究中，所需樣本無需分離培養，在客觀真實地反應生境內DNA組成的同時，也適應現場唾液斑跡等涉案生物物證微量、不可重復的特性。

發明內容

本發明一個目的是提供檢測唾液斑跡中微生物群落結構的物質的用途。

本發明提供了檢測唾液斑跡中微生物群落結構的物質在預測唾液斑跡殘留時間中的應用。

或本發明提供了檢測唾液斑跡中微生物群落結構的物質在制備預測唾液斑跡殘留時間產品中的應用。

上述應用中，所述物質包括用于擴增唾液斑跡16sDNA的引物。