[發明專利]一種基于天然高分子且強度和成膠時間可調的水凝膠細胞支架

有效

• 申請號: 202010627869.4
• 申請日: 2020-07-02
• 公開（公告）號: CN111704729B
• 公開（公告）日: 2022-05-10
• 發明（設計）人: 周敏;葛治伸;湯睿;張爽;高智;尤和陽
• 申請（專利權）人: 安徽省立醫院（中國科學技術大學附屬第一醫院）
• 主分類號: C08J3/075
• 分類號: C08J3/075;C08J3/24;C08L89/00;C08L5/08;C08L5/04;C12N5/09;C12N5/00
• 代理公司: 合肥國和專利代理事務所(普通合伙) 34131
• 代理人: 孫永剛

1.一種制備強度和成膠時間可調的明膠-殼聚糖水凝膠細胞支架的方法，該方法包括如下步驟：

（1）制備氧化海藻酸鈉：使海藻酸鈉與高碘酸鈉發生氧化反應得到部分鏈段含醛基的氧化海藻酸鈉；所述氧化海藻酸鈉是在高碘酸鈉與海藻酸鈉分子鏈結構單元的摩爾比為1：1.5的條件下制備的，得到的氧化海藻酸鈉的氧化度為54%；

（2）測定步驟（1）所得氧化海藻酸鈉的醛基含量；

（3）檢測明膠中的氨基含量；

（4）分別配制濃度為15wt%的明膠溶液和濃度為4wt%的羧甲基殼聚糖溶液；

（5）將步驟（4）所得的明膠水溶液和羧甲基殼聚糖水溶液混合，使明膠中氨基摩爾量占明膠和羧甲基殼聚糖中總氨基摩爾量的50%-60%；

（6）在所述明膠和羧甲基殼聚糖中總氨基量與所述氧化海藻酸鈉中醛基量等摩爾的條件下，使步驟（5）所得明膠水溶液和羧甲基殼聚糖水溶液的混合溶液與步驟（1）中所得氧化海藻酸鈉混合反應，從而得到具有兩種不同密度的交聯網絡：由明膠與氧化海藻酸鈉形成的低密度交聯網絡，和由羧甲基殼聚糖與氧化海藻酸鈉形成的高密度交聯網絡；

當在步驟（6）中采用5%氧化海藻酸鈉溶液時，所述凝膠時間在1min 50 s到30 min之間，所述儲能模量為0.75 Pa到210 Pa范圍之間；

當采用10%氧化海藻酸鈉溶液時，當明膠-羧甲基殼聚糖混合體系中明膠的氨基含量從50%提高到60%時，所述凝膠時間從瞬間形成凝膠到140 s之間，所述儲能模量為251.9Pa至57.1 Pa。

2.根據權利要求1所述的方法，其中，在步驟（1）中，所述海藻酸鈉與高碘酸鈉的氧化反應中，在乙醇/水1：1混合溶劑、室溫條件下，海藻酸鈉結構單元與高碘酸鈉的摩爾比為1.5：1。

3.根據權利要求1所述的方法，其中，在步驟（2）中，通過鹽酸羥胺法測定氧化海藻酸鈉的醛基含量。

4.根據權利要求1所述的方法，其中，在步驟（3）中，通過TNBSA試劑檢測明膠中的氨基含量。

5.根據權利要求1所述的方法，其中，當明膠與羧甲基殼聚糖按氨基含量按1：1混合，凝膠時間為3min 45 s，儲能模量為99.9Pa。