[發(fā)明專(zhuān)利]一種負(fù)載外泌體的金屬基植入材料及其制備方法和應(yīng)用

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• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202010627158.7
• 申請(qǐng)日: 2020-07-02
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN111701076B
• 公開(kāi)（公告）日: 2021-03-16
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 劉冰;呂宇鵬;肖桂勇
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 山東大學(xué)
• 主分類(lèi)號(hào): A61K38/19
• 分類(lèi)號(hào): A61K38/19;A61L27/32;A61L27/34;A61L27/38;A61L27/06;A61L27/04;A61L27/50;C23C22/22
• 代理公司: 濟(jì)南圣達(dá)知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 37221
• 代理人: 張曉鵬

1.一種負(fù)載外泌體的金屬基植入材料，其特征在于：包括金屬基體、鈣磷酸鹽轉(zhuǎn)化膜、表面修飾聚乙二醇化磷脂的外泌體，金屬基體的表面覆蓋鈣磷酸鹽轉(zhuǎn)化膜，鈣磷酸鹽轉(zhuǎn)化膜與表面修飾聚乙二醇化磷脂的外泌體連接，聚乙二醇化磷脂親水端與鈣磷酸鹽轉(zhuǎn)化膜形成Ca²⁺-O-PEG絡(luò)合物，聚乙二醇化磷脂疏水端與外泌體的磷脂雙分子結(jié)構(gòu)層結(jié)合。

2.如權(quán)利要求1所述的負(fù)載外泌體的金屬基植入材料，其特征在于：金屬基體包括鈦及其合金、鎂及其合金、316L不銹鋼或鋅合金。

3.如權(quán)利要求1所述的負(fù)載外泌體的金屬基植入材料，其特征在于：鈣磷酸鹽轉(zhuǎn)化膜的物相成分包括以下一種或幾種：羥基磷灰石、磷酸鈣、磷酸氫鈣、磷酸鋅鈣。

4.如權(quán)利要求1所述的負(fù)載外泌體的金屬基植入材料，其特征在于：外泌體包括骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞來(lái)源外泌體、脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞來(lái)源外泌體、成骨細(xì)胞來(lái)源外泌體、成肌細(xì)胞來(lái)源外泌體或內(nèi)皮細(xì)胞來(lái)源外泌體。

5.如權(quán)利要求1所述的負(fù)載外泌體的金屬基植入材料，其特征在于：聚乙二醇化磷脂為二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇、二肉豆蔻酰基磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇、二棕櫚酰基磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇。

6.如權(quán)利要求1-5任一所述的負(fù)載外泌體的金屬基植入材料的制備方法，其特征在于：具體步驟為：

將金屬基體浸泡于含有磷源和鈣源、氧化性促進(jìn)劑的磷酸鹽化學(xué)轉(zhuǎn)化液中，得到金屬表面覆蓋鈣磷酸鹽轉(zhuǎn)化膜的金屬基體；

分別制備外泌體懸液、聚乙二醇化磷脂溶液，并將外泌體懸液和聚乙二醇化磷脂溶液混合，孵育后得到表面修飾聚乙二醇的外泌體混合溶液；

將表面修飾聚乙二醇的外泌體混合溶液滴加在覆蓋鈣磷酸鹽轉(zhuǎn)化膜的金屬基體的表面，孵育后得到負(fù)載外泌體的金屬基植入材料。

7.如權(quán)利要求6所述的負(fù)載外泌體的金屬基植入材料的制備方法，其特征在于：磷酸鹽化學(xué)轉(zhuǎn)化液中的鈣源為Ca(H₂PO₄)₂·H₂O、Ca(NO₃)₂·4H₂O、CaO中的一種或多種；

或，磷酸鹽化學(xué)轉(zhuǎn)化液中的磷源為H₃PO₄、Ca(H₂PO₄)₂·H₂O、Zn(H₂PO₄)₂·2H₂O中的一種或多種；

或，覆蓋鈣磷酸鹽轉(zhuǎn)化膜的金屬基體的制備過(guò)程中的反應(yīng)條件為：溫度為50-80℃，反應(yīng)時(shí)間為20-150min；

或，外泌體懸液的制備方法為將外泌體利用PBS緩沖液重懸得到外泌體懸液。

8.如權(quán)利要求7所述的負(fù)載外泌體的金屬基植入材料的制備方法，其特征在于：溫度為55-75℃，時(shí)間為30-120min。

9.如權(quán)利要求6所述的負(fù)載外泌體的金屬基植入材料的制備方法，其特征在于：聚乙二醇化磷脂溶液的溶劑為無(wú)水乙醇，聚乙二醇化磷脂的質(zhì)量濃度為1-5mmol/mL；

或，外泌體懸液和聚乙二醇化磷脂溶液孵育的溫度為3-6℃，避光孵育10-30min；或，表面修飾聚乙二醇的外泌體和覆蓋鈣磷酸鹽轉(zhuǎn)化膜的金屬基體混合孵育的溫度為3-6℃，避光孵育2-24h。

10.如權(quán)利要求9所述的負(fù)載外泌體的金屬基植入材料的制備方法，其特征在于：聚乙二醇化磷脂的質(zhì)量濃度為2-3mmol/mL。

11.如權(quán)利要求9所述的負(fù)載外泌體的金屬基植入材料的制備方法，其特征在于：外泌體懸液和聚乙二醇化磷脂溶液孵育的溫度為4℃。