[發明專利]一種鑒定西瓜品種真實性的方法及其專用SSR引物組合

有效

• 申請號: 202010624618.0
• 申請日: 2020-07-02
• 公開（公告）號: CN111719013B
• 公開（公告）日: 2021-01-01
• 發明（設計）人: 許勇;溫常龍;張建;羅江;楊靜靜;劉慧;張海英
• 申請（專利權）人: 北京市農林科學院
• 主分類號: C12Q1/6895
• 分類號: C12Q1/6895;C12N15/11
• 代理公司: 北京五洲洋和知識產權代理事務所(普通合伙) 11387
• 代理人: 榮紅穎;張洪生

1.一種用于鑒定西瓜品種真實性的SSR引物組，其特征在于，所述SSR引物組包括：

第一SSR引物對，序列如SEQ ID NO：1和SEQ ID NO：2所示；

第二SSR引物對，序列如SEQ ID NO：3和SEQ ID NO：4所示；

第三SSR引物對，序列如SEQ ID NO：5和SEQ ID NO：6所示；

第四SSR引物對，序列如SEQ ID NO：7和SEQ ID NO：8所示；

第五SSR引物對，序列如SEQ ID NO：9和SEQ ID NO：10所示；

第六SSR引物對，序列如SEQ ID NO：11和SEQ ID NO：12所示；

第七SSR引物對，序列如SEQ ID NO：13和SEQ ID NO：14所示；

第八SSR引物對，序列如SEQ ID NO：15和SEQ ID NO：16所示；

第九SSR引物對，序列如SEQ ID NO：17和SEQ ID NO：18所示；

第十SSR引物對，序列如SEQ ID NO：19和SEQ ID NO：20所示；

第十一SSR引物對，序列如SEQ ID NO：21和SEQ ID NO：22所示；

第十二SSR引物對，序列如SEQ ID NO：23和SEQ ID NO：24所示；

第十三SSR引物對，序列如SEQ ID NO：25和SEQ ID NO：26所示；

第十四SSR引物對，序列如SEQ ID NO：27和SEQ ID NO：28所示；

第十五SSR引物對，序列如SEQ ID NO：29和SEQ ID NO：30所示；

第十六SSR引物對，序列如SEQ ID NO：31和SEQ ID NO：32所示；

第十七SSR引物對，序列如SEQ ID NO：33和SEQ ID NO：34所示；

第十八SSR引物對，序列如SEQ ID NO：35和SEQ ID NO：36所示；

每對所述引物對的一條引物連接有熒光分子。

2.如權利要求1所述的SSR引物組，其特征在于：所述熒光分子選自ROX、TAMRA、FAM、HEX。

3.一種用于鑒定西瓜品種真實性的SSR試劑盒，其特征在于：所述SSR試劑盒中的試劑用于配制為PCR反應體系；所述PCR反應體系包括：

權利要求1或2所述SSR引物組，

所述SSR引物組中的每一對的上游引物和下游引物在所述體系中濃度之比為1:1；所述上游引物和下游引物在體系中終濃度均為0.25 μmol/L；

所述體系還包括：

dNTPs：體系中終濃度為每種0.15mmol/L，

氯化鎂：體系中終濃度為2.5 mmol/L，

DNA聚合酶：體系中終濃度為0.05U/μL，

PCR緩沖液：由體系中終濃度為10-50mmol/L的氯化鉀與體系中終濃度為1-10mmol/L的pH7.5-9.0的Tris-HCL配制而成。

4.權利要求1或2所述SSR引物組合，或權利要求3所述SSR試劑盒，在以下X1或X2的應用：

X1：鑒定待測西瓜的品種是否屬于標準西瓜品種中的某一種；

X2：鑒定待測西瓜的品種具體為標準西瓜品種中的哪一種；

所述待測西瓜的品種選自：

極品京欣、開抗早花紅、新機遇、金蘭無籽、鄭抗無籽四號、綠鳳凰、綠圓095、華雷一號、江藝1584、美欣101、申蜜968、婉悅一號、RX1、春雷、羞月6號、早春翠玉、龍盛8號、紅小玉、美惠、夏橙、金玉玲瓏無籽1號、藝甜2號、甜王三號、創研龍旋風、創研早紅蜜、創研金砂王、雪峰新二號、京美6K、京嘉2號、京美、龍盛佳甜、甬蜜3號、甬蜜2號、龍盛佳美、RX2、甜蜜蜜、蜜童、林籽大片88708、豫西瓜八號、金星、春秀、金城王子、圣女紅二號、早春紅玉、羞月、橙蘭、羞月二號、華耐0901、農科大6號、美豐、京欣1號、西農八號、豐樂秀華、豐樂五號、豐樂黑優美、豐樂黑寶公、時代、新星、蘇蜜6號、申抗988、黑珍珠、早佳、隴抗9號、嘉抗蜜寶、京欣一號、豐甜花冠、浙蜜3號、新金蘭、小蘭、嘉新、新一號、雙星99K、雙星37、京欣父、壽菜XG1號、瑞宏、莎蜜佳一號、京欣二號、世紀、8424、秀色、硬京欣、京嘉、京鳳6號、金媽媽九號、墨美、玉麒麟、蘇蜜8號、早秀二號、秀雅、格美、鄭抗三號、羞月5號、特小鳳、黃鳳凰、博麗一號、京欣無籽1號、慶發特早紅、金寶、申選958、北農天驕4號、華欣-8、冬喜2號、盈克、泰科翠寶3號、黑寶6號、凱卓立、吉福2號、圣女紅3號、黃晶、佳美1號、傳祺2號、勝欣、勇鳳1號、京欣5號、北農吉嘉、航興1號、黃小玉、喜春、京秀、好運來、中選11號、中選12號、航興三號、景欣2號、景龍寶、黑美人、嘉華、永豐1號、春蕾、京欣3號、京欣2號、京欣4號、慶發十二號、黑齡童、紅小帥、金玉玲瓏、天海宏豐、甜寶小無籽、天泉、黑寶、黃晶一號、世農真美、香秀、農科大3號、雪峰小玉7號、美秀、圣女紅2號、國鳳、京抗2號、京欣8號、寶鳳、紅小帥2號、福運來、帥童、瑞鑫、北農天驕、冬喜3號、暑寶（無籽）、欣祥1號、暑寶6號、農科大9號、航興天秀1號、航興天秀2號、瑞福、華欣、北農福田、花蜜（無籽）、中京1號、富萊特、超越夢想、佳美、北農世嘉、暑寶8號、安琪兒、黑晶、金帥2號、中聯58、中聯黑將軍、農科大10號、泰科翠寶2號、欣銳、超越、朝霞、京闌、京穎、華欣2號、金寶、紅小帥6號、北農錦繡、北農天驕2號、大農、雷克、珍奇、傳祺1號、眾天紅。