[發明專利]一種花生耐鹽基因及其應用有效
| 申請號: | 202010620229.0 | 申請日: | 2020-07-01 |
| 公開(公告)號: | CN111718944B | 公開(公告)日: | 2022-02-22 |
| 發明(設計)人: | 苑翠玲;單世華;孫全喜;李春娟;閆彩霞;趙小波;王娟;張浩 | 申請(專利權)人: | 山東省花生研究所 |
| 主分類號: | C12N15/29 | 分類號: | C12N15/29;C12N15/82;A01H5/00;A01H6/20;A01H6/54;A01H6/60 |
| 代理公司: | 北京中北知識產權代理有限公司 11253 | 代理人: | 王皎 |
| 地址: | 266000 山東*** | 國省代碼: | 山東;37 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 花生 基因 及其 應用 | ||
1.一種花生耐鹽基因在提高擬南芥、花生耐鹽性的應用,其特征在于,以花生幼嫩葉片的DNA為模板,利用引物AhNAC65-F2和AhNAC65-R2進行PCR擴增獲得目的片段,構建AhNAC65a的過表達載體,用于擬南芥遺傳轉化,分析并鑒定轉基因擬南芥的耐鹽性;所述花生耐鹽基因的核苷酸序列為SEQIDNO.1,所述花生耐鹽基因的氨基酸序列為SEQIDNo.2,所述花生耐鹽基因的開放閱讀框為861 bp,共編碼286個氨基酸。
2.根據權利要求1所述的花生耐鹽基因在提高擬南芥、花生耐鹽性的應用,其特征在于:所述引物AhNAC65-F2和AhNAC65-R2的序列分別為TGGAGAGAACACGGGGGATCCATGGAAGGAAGTAGTAAAAG和CGATCGGGGAAATTCGAGCTCTTAGTAATATCCTCTTAAATCA。
3.根據權利要求1所述的花生耐鹽基因在提高擬南芥、花生耐鹽性的應用,其特征在于:所述PCR擴增體系為ddH2O、含Mg2+的緩沖液、dNTP、AhNAC65-F2、AhNAC65-R2、DMSO、Phusion酶和基因組DNA模板。
4.根據權利要求1所述的花生耐鹽基因在提高擬南芥、花生耐鹽性的應用,其特征在于:所述PCR擴增引物的反應條件為:90~98 ℃預變性 30 s;95~98℃變性10 s,50~58 ℃退火 10 s,65~75℃ 50 s,30個循環;65~75 ℃后延伸10 min。
5.根據權利要求1所述的花生耐鹽基因在提高擬南芥、花生耐鹽性的應用,其特征在于:所述花生耐鹽基因在鹽脅迫處理后在花生中表達量上升。
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