[發(fā)明專利]一種COVID-19快速檢測顯色指示試劑盒

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 202010619218.0
• 申請日: 2020-06-30
• 公開（公告）號: CN111763768A
• 公開（公告）日: 2020-10-13
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 聶志超;張慧;李西清;張鴻
• 申請（專利權(quán)）人: 安徽微分基因科技有限公司
• 主分類號: C12Q1/70
• 分類號: C12Q1/70;C12Q1/6844;C12R1/93
• 代理公司: 安徽申策知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 34178
• 代理人: 程艷梅

1.一種COVID-19快速檢測顯色指示試劑盒，其特征在于：所述指示試劑盒包含檢測顯色指示劑、檢測反應(yīng)液、陽性對照品、陰性對照品和LAMP引物組。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種COVID-19快速檢測顯色指示試劑盒，其特征在于：所述檢測顯色指示劑包含0.5～2.3mM dNTPs、2～12mM MgSO4、10～25mM Tris-HCl、5～15mM KCl、8～16mM(NH4)SO4、0.1～0.3％Triton X-100、0.5～1.5M甜菜堿和酸堿指示劑。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種COVID-19快速檢測顯色指示試劑盒，其特征在于：所述檢測反應(yīng)液包含6～10U Bst DNA聚合酶、16～25U ThermoStable V反轉(zhuǎn)錄酶、DNAPolymerase、20U AMV反轉(zhuǎn)錄酶、6～10U RNase抑制劑、18～26％海藻糖。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種COVID-19快速檢測顯色指示試劑盒，其特征在于：所述陽性對照品為COVID-19特異性基因N對應(yīng)的人工合成質(zhì)粒。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種COVID-19快速檢測顯色指示試劑盒，其特征在于：所述陰性對照品為非COVID-19特異性基因N對應(yīng)的人工合成質(zhì)粒。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種COVID-19快速檢測顯色指示試劑盒，其特征在于：所述LAMP引物組包含COVID-19病毒的特異性基因N對應(yīng)LAMP引物組，0.1～0.3μM引物組F3/B3、0.8～3.2μM引物組FIP/BIP、0.2～0.6μM引物組LoopF/LoopR。

7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種COVID-19快速檢測顯色指示試劑盒，其特征在于：所述LAMP引物組由外引物組F3/B3、內(nèi)引物組FIP/BIP以及環(huán)引物組LoopF/LoopR組成，

F3序列為：5’-GCTGCTGAGGCTTCTAAG-3’；

B3序列為：5’-GCGTCAATATGCTTATTCAGC-3’；

FIP序列為：5’-GCGGCCAATGTTTGTAATCAGTAGACGTGGTCCAGAACAA-3’；

BIP序列為：5’-TCAGCGTTCTTCGGAATGTCGCTGTGTAGGTCAACCACG-3’；

LoopF序列為：5’-CCTTGTCTGATTAGTTCCTGGT-3’；

LoopR序列為：5’-CAGCGCTTCAGCGTTCTTCG-3’。

8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種COVID-19快速檢測顯色指示試劑盒，其特征在于：所述試劑盒的使用方法包括如下步驟：

S1、將試劑解凍，分別將檢測顯色指示劑、檢測反應(yīng)液和LAMP引物組按照一定的比例配置混合均勻。

S2、分別將待檢測核酸樣品，陽性對照品和陰性對照品按照一定比例加入S1配置好的的混合溶液中，混勻離心。

S3、將反應(yīng)置于65℃孵育30分鐘。

S4、反應(yīng)結(jié)束后在自然光充足的環(huán)境中進行觀察，可肉眼直接判讀結(jié)果。

9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的一種COVID-19快速檢測顯色指示試劑盒，其特征在于：所述步驟S3中，孵育過程用到的溫控設(shè)備，65℃的恒溫孵育儀、熱循環(huán)儀、水浴鍋等均可以。