[發明專利]內切葡聚糖酶基因、內切葡聚糖酶及其制備方法和應用在審
| 申請號： | 202010619040.X | 申請日： | 2020-07-01 |
| 公開（公告）號： | CN111893124A | 公開（公告）日： | 2020-11-06 |
| 發明（設計）人： | 王建榮;祝木金;余思;王平;孟建軍;劉小慧;曹革 | 申請（專利權）人： | 深圳潤康生態環境股份有限公司 |
| 主分類號： | C12N15/56 | 分類號： | C12N15/56;C12N9/42;C12N15/81;C12N1/19;C12P19/14;C12R1/84 |
| 代理公司： | 深圳中一聯合知識產權代理有限公司 44414 | 代理人： | 郝文婷 |
| 地址： | 518000 廣東省深圳市寶安*** | 國省代碼： | 廣東;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 內切葡 聚糖 基因 及其 制備 方法 應用 | ||
1.一種內切葡聚糖酶基因macel，其特征在于，其核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。
2.一種內切葡聚糖酶MaCel，其特征在于，其氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示。
3.一種重組表達載體，其特征在于，包括權利要求1所述的內切葡聚糖酶基因macel。
4.一種重組表達菌株，其特征在于，包括權利要求3所述的重組表達載體。
5.一種內切葡聚糖酶MaCel的制備方法，其特征在于，包括如下步驟：
提供內切葡聚糖酶基因macel、表達載體和表達菌株；
對所述內切葡聚糖酶基因macel進行擴增，所得擴增產物與所述表達載體進行連接，得到重組表達載體；
將所述重組表達載體轉入表達菌株，得到重組表達菌株；
對所述重組表達菌株進行培養，得到所述內切葡聚糖酶MaCel；
其中，所述內切葡聚糖酶基因macel的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。
6.根據權利要求5所述內切葡聚糖酶MaCel的制備方法，其特征在于，將所述內切葡聚糖酶基因macel進行擴增的步驟中，用于擴增的引物包括正向引物和反向引物，所述正向引物的核苷酸序列如SEQ ID NO:3所示，所述反向引物的核苷酸序列如SEQ ID NO:4所示。
7.根據權利要求5所述內切葡聚糖酶MaCel的制備方法，其特征在于，所述表達載體為畢赤酵母表達載體。
8.根據權利要求5所述內切葡聚糖酶MaCel的制備方法，其特征在于，所述表達菌株為畢赤酵母表達菌株。
9.權利要求2所述內切葡聚糖酶MaCel或權利要求5-8任一項所述內切葡聚糖酶MaCel的制備方法制備得到的內切葡聚糖酶MaCel在水解纖維素中的應用。
10.根據權利要求9所述的應用，其特征在于，在所述水解纖維素的反應中，所述內切葡聚糖酶MaCel的反應溫度為60℃-80℃；和/或
所述內切葡聚糖酶MaCel的反應pH為5.0-9.0。
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