[發(fā)明專利]草莓脫毒健康種苗三級離體隔離擴繁技術(shù)

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 202010617997.0
• 申請日: 2020-07-01
• 公開（公告）號: CN111685039A
• 公開（公告）日: 2020-09-22
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 趙林;張婷;李剛波;宋慶科;魏猛;張梅
• 申請（專利權(quán)）人: 江蘇徐淮地區(qū)徐州農(nóng)業(yè)科學(xué)研究所(江蘇徐州甘薯研究中心)
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 徐州市三聯(lián)專利事務(wù)所 32220
• 代理人: 卓小彬

本發(fā)明公開了草莓脫毒健康種苗三級離體隔離擴繁技術(shù)，具體按照以下步驟實施：在組培室進(jìn)行組培原原種，隨后將原原種在無菌環(huán)境下隔離馴化，待馴化完成后，定植到原原種繁殖室，當(dāng)原原種抽生匍匐莖形成根原基后及時剪下，集中密封于無菌袋中，然后到原種繁殖室中取出，定植于穴盤，經(jīng)生長后形成分株，在形成氣生根后剪下，并密封于無菌袋中，轉(zhuǎn)移至生產(chǎn)種生產(chǎn)網(wǎng)室，然后經(jīng)過壓苗生產(chǎn)草莓脫毒種苗，因此本發(fā)明與傳統(tǒng)脫毒育苗方式相比，脫毒種苗出組培室后可顯著降低植株感染病毒病菌比例。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種草莓脫毒苗三級離體隔離擴繁技術(shù)，屬于果樹育苗方法。

背景技術(shù)

近年草莓生產(chǎn)發(fā)展迅速，近幾年來栽培面積迅速擴大。草莓的種苗生產(chǎn)傳統(tǒng)上采用匍匐莖繁殖和分株繁殖，而長期使用無性繁殖方法會使草莓品種退化，病毒感染嚴(yán)重。利用草莓莖尖培養(yǎng)快繁技術(shù)可部分或全部脫除病毒, 保持草莓品種的優(yōu)良性狀, 提高產(chǎn)量；繁殖快，對新品種的推廣有利，快速繁殖不受季節(jié)影響，一年四季均可進(jìn)行。目前脫毒苗研究主要集中于脫毒環(huán)節(jié)，重點在培養(yǎng)基的篩選、激素比例控制、環(huán)境調(diào)節(jié)以及馴化條件等方面進(jìn)行優(yōu)化，逐步形成了相對成熟的技術(shù)體系，由于組培過程中環(huán)境條件控制較嚴(yán)格，可完全阻斷病毒和病菌的傳播，但脫毒組培苗進(jìn)入三級擴繁體系后，仍采取逐級壓苗繁殖方式，并且三級苗繁殖基本處于相同環(huán)境中，尚未采取隔離措施，導(dǎo)致脫毒組培苗經(jīng)過后期三級擴繁后，由于蚜蟲、紅蜘蛛、大青葉蟬等害蟲以及栽培介質(zhì)對草莓病毒和病菌的傳播，達(dá)到生產(chǎn)種苗時，原本無病毒、無病菌健康種苗轉(zhuǎn)變成了帶毒帶菌非健康種苗，因此，草莓脫毒健康種苗的生產(chǎn)必須對三級擴繁體系進(jìn)行規(guī)范，阻斷脫毒苗離開組培環(huán)境后的病菌病毒傳播途徑，保證進(jìn)入生產(chǎn)的是脫毒健康種苗。

發(fā)明內(nèi)容

為了克服上述現(xiàn)有技術(shù)的不足，本發(fā)明提供了草莓脫毒健康種苗三級離體隔離擴繁技術(shù)，按如下步驟進(jìn)行：

步驟1）草莓脫毒苗馴化完成后，采用去離子水，流水洗凈根部培養(yǎng)基，由原原種繁殖人員及時定植于滅菌基質(zhì)中，所處環(huán)境為原原種隔離網(wǎng)室，溫度控制在15-20℃，基質(zhì)濕度控制于55-65%，空氣濕度控制于85-95%，維持4-6天，緩苗完成后，在水肥一體化中加入硝態(tài)氮水溶性多元素平衡肥，總濃度控制在0.01-0.03ppm范圍內(nèi)，水分供應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)為基質(zhì)濕度在55-65%之間，肥料每隔7天供應(yīng)一次，直至幼苗抽生3片新葉；隨后空氣濕度需維持在65-70%，肥料供應(yīng)時，在原基礎(chǔ)上加入微量元素肥料，濃度維持在0.01-0.05%之間，氮磷鉀濃度調(diào)整為0.1-0.2%；隨后維持養(yǎng)分供應(yīng)，原原種（一級苗）抽生匍匐莖，待匍匐莖第二節(jié)氣生根生長至1-2mm時，使用采集工具，將第一和第二節(jié)一次性采下，并裝于無菌袋中；

步驟2）將原原種繁殖室中裝匍匐莖節(jié)的無菌袋帶到原種隔離網(wǎng)室，并交于原種繁殖室操作專人，并對其使用工具及無菌袋外表面的滅菌；隨后進(jìn)入原種繁殖室，利用原種繁殖室工具將匍匐莖第一和第二節(jié)分離，定植于滅菌基質(zhì)穴盤中，所用水仍為去離子水，基質(zhì)濕度維持在75-85%，空氣濕度維持在85-95%，待成活后，基質(zhì)濕度將至60-70%，空氣濕度將至60-65%，肥料采取硝態(tài)氮水溶性多元素平衡肥，濃度控制在0.1-0.2%，每隔7天施肥1次，直至抽生匍匐莖；待匍匐莖第二節(jié)氣生根生長至1-2mm時，使用采集工具，將第一和第二節(jié)一次性采下，并裝于無菌袋中；

步驟3）將原種繁殖室中裝匍匐莖節(jié)的無菌袋帶到生產(chǎn)種隔離網(wǎng)室，并交于生產(chǎn)種繁殖室操作專人，并對其使用工具及無菌袋外表面的滅菌；隨后進(jìn)入生產(chǎn)種繁殖室，利用生產(chǎn)種繁殖室工具將匍匐莖第一和第二節(jié)分離，定植于滅菌基質(zhì)穴盤中，所用水為紫外線滅菌水，具體方法為將清水置于水肥一體化容器中，用浸泡型紫外線滅菌燈，紫外燈功率選擇100-150瓦，滅菌30-40分鐘，基質(zhì)濕度維持在75-85%，空氣濕度維持在85-95%，待成活后，基質(zhì)濕度將至60-70%，空氣濕度將至60-65%；肥料采取硝態(tài)氮水溶性多元素平衡肥，濃度控制在0.1-0.2%，每隔7天施肥1次，直至抽生匍匐莖，待發(fā)生莖節(jié)后，直接將莖節(jié)壓于穴盤穴內(nèi)，保持穴盤內(nèi)基質(zhì)濕度70-80，待莖節(jié)根系發(fā)育完善后剪斷匍匐莖，周而復(fù)始，逐漸繁殖生產(chǎn)苗。