[發明專利]一組用于鑒別阿膠及阿膠制品中牛源性成分的多肽

有效

• 申請號: 202010612490.6
• 申請日: 2016-03-18
• 公開（公告）號: CN111825746B
• 公開（公告）日: 2022-11-08
• 發明（設計）人: 張鴻偉;張曉梅;王境堂
• 申請（專利權）人: 青島海關技術中心
• 主分類號: C07K7/08
• 分類號: C07K7/08;C07K14/47;G01N30/02;G01N30/06;G01N24/08
• 代理公司: 北京市誠輝律師事務所 11430
• 代理人: 范盈

1.一組多肽在檢測阿膠及其制品中的牛源性成分中的應用，

所述的應用為，將所述多肽單獨用于檢測阿膠及其制品中的牛源性成分，或將所述多肽任意組合后用于檢測阿膠及其制品中的牛源性成分；

所述的阿膠制品是阿膠糕、阿膠膏、阿膠漿、阿膠口服液、阿膠糖、阿膠補血顆粒；

所述的多肽為序列結構大于或等于18個氨基酸的多肽片段，其序列為：

肽段1：SEQ ID NO.1：GAPGPQGPPGAPGPLGIAGLTGAR；

肽段8：SEQ ID NO.8：GVAGEPGRNGLPGGPGLR；

肽段10：SEQ ID NO.10：GSTGEIGPAGPPGPPGLR；

肽段13：SEQ ID NO.13：GEPGPAGAVGPAGAVGPR；

肽段14：SEQ ID NO.14：GETGTAGDAGPIGPVGAR；

肽段15：SEQ ID NO.15：GETGMAGAVGPAGAVGPR；

肽段20：SEQ ID NO.20：SGDRGETGPAGPAGPIGPVGAR；

肽段22：SEQ ID NO.22：VGPPGPSGNAGPPGPPGPAGK；

肽段28：SEQ ID NO.28：GIPGVSGSVGEPGPIGISGPPGAR；

肽段29：SEQ ID NO.29：AGPVGAAGAPGPQGPVGPVGK；

肽段33：SEQ ID NO.33：GETGHAGPAGPIGPVGAR；

肽段35：SEQ ID NO.35：GLPGVAGSVGEPGPLGIAGPPGAR；

肽段36：SEQ ID NO.36：GETGPAGPAGPIGPVGAR；

肽段40：SEQ ID NO.40：GEQGPAGPPGFQGLPGPAGTAGEAGK；

肽段42：SEQ ID NO.42：GAAGPPGPPGSAGTPGLQGMPGER；

肽段43：SEQ ID NO.43：GPPGESGAAGPTGPIGSR；

肽段47：SEQ ID NO.47：GSPGADGPAGAPGTPGPQGIAGQR。

2.一種檢測阿膠及其制品中是否含有牛源性成分的檢測方法，所述方法包括如下步驟：

步驟(1)，對待測樣本進行質譜前處理，獲得待測多肽濾液：

步驟(2)，通過質譜法檢測步驟(1)獲得的多肽濾液，檢測待測樣本中是否含有權利要求1所述肽段的質譜峰；

步驟(1)所述的對待測樣本進行質譜前處理，獲得待測多肽濾液的步驟如下：

1)將待測樣品均質成粉末狀態，稱取0.1g～0.5g阿膠樣品或1.0～2.0g阿膠制品，加入1％NH4HCO3溶液，超聲處理10～30min使樣品完全溶解，定容至50mL；

2)溶液過0.22μm濾膜；

3)取10～20μLTrypsin酶溶液加入到上述100μL～200μL濾液中，37℃酶解16-18小時，待上機檢測；

步驟(2)通過質譜法檢驗步驟(1)獲得的多肽濾液的方法是下述方法A或方法B：

方法A：采用AB SCIEX 5600質譜檢測多肽濾液中是否含有權利要求1所述的肽段的質譜峰，

上機參數為：

流動相A：0.05～0.2％甲酸-乙腈溶液，流動相B：0.05～0.2％甲酸-水，

流速：0.1～0.5mL/min，

TOF掃描范圍：100-3000Da，

正離子反應模式，GS1：35，GS2：45，Curtain Gas：35，ISVF：5500，TEM：500，DP：100，CE：10；

方法B：采用AB SCIEX三重四級桿質譜檢測多肽濾液中是否含有權利要求1所述肽段的質譜峰，

上機參數為：

流動相A：0.05～0.2％甲酸-乙腈，流動相B：0.05～0.2％甲酸-水，

流速：0.1～0.5mL/min，

電噴霧離子源，正離子反應模式，檢測方式：MRM，噴霧電壓：5500V，離子傳輸管溫度：475℃；鞘氣壓力：40；輔助氣壓力：6。