[發明專利]一株降解高鹽廢水中有機物和全鹽的黃河鹽單胞菌及其應用

有效

• 申請號: 202010601964.7
• 申請日: 2020-06-28
• 公開（公告）號: CN111705018B
• 公開（公告）日: 2022-03-04
• 發明（設計）人: 車樹剛;馬韻升;蔡穎輝;楊傳倫;孔凡衡;王秀芝;馬娜娜;陳振發
• 申請（專利權）人: 黃河三角洲京博化工研究院有限公司
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C02F3/34;C02F101/10;C02F101/30;C02F103/36;C12R1/01
• 代理公司: 濟南舜源專利事務所有限公司 37205
• 代理人: 趙斌;苗峻

1. 一株黃河鹽單胞菌，命名為YJY20-04，保藏編號為CGMCC NO.20016，屬于黃河鹽單胞菌（Halomonas huangheensis），其16S rDNA的核苷酸序列如Seq ID No:1所示。

2.利用權利要求1所述的黃河鹽單胞菌制備菌劑的方法，具體步驟如下：

（1）菌種活化：取5-15μL凍存的黃河鹽單胞菌YJY20-04接種于含有100mL LB液體無菌培養基中，培養基中通過添加氯化鈉使鹽含量至W/V 1.5-2%，置于30-37℃，160-180rpm振蕩培養至對數期；

（2）液體種子制備：將活化的菌種100mL轉接到含有1000mL LB液體無菌培養基中，培養基中通過添加氯化鈉使鹽含量至W/V 1.5-2%，于30-37℃，160-180rpm振蕩培養至對數期；

（3）種子罐發酵：將制備好的液體種子按照V/V 5-10%的接種量接種于裝液量為60-70%的20L種子罐中擴大培養至對數期；

（4）生產罐發酵：將種子液按V/V 8-10%的接種量接入裝液量為60-70%的生產罐中的培養基中培養，發酵結束后菌體數量達到250億/mL以上，將發酵完成后培養液出罐即得液體菌劑；

（5）固體菌劑制備：將上述發酵完成后的液體菌劑濃縮到原體積的三分之一，之后按照質量比添加4-10%的硅藻土和1.5-2.0%的麩皮吸附菌體，之后離心、干化處理上述獲得的微生物菌劑，使其含水率控制在10%以內，即可獲得固體菌劑。

3.根據權利要求2所述的方法，其特征在于：

所述步驟（3）種子罐發酵和步驟（4）生產罐發酵的培養條件為：無菌空氣的通氣比均為1:0.8-1.5，攪拌速度為180-220rpm，培養溫度為30-37℃，發酵周期為18-24h。

4.根據權利要求2所述的方法，其特征在于：

所用的種子罐和生產罐的發酵培養基配方為：葡萄糖0.8-1.2%，玉米淀粉0.8-1.2%，豆粕1.5-2.5%，酵母粉0.2-0.4%，硫酸鎂0.03-0.07%，磷酸二氫鉀0.01-0.03%，硫酸錳0.02-0.06%，氯化鈉1.5-2%，硫酸銨0.08-0.15%，水余量，pH 7.0-7.4。

5. 一株黃河鹽單胞菌在降解高鹽廢水中有機物的應用，其特征在于，將黃河鹽單胞菌懸浮于廢水或生物降解池中，在溫度為30-37℃、pH為7.0-7.5條件下進行攪拌3-5d，廢水或生物降解池中含鹽量在W/V 1.5-20%，COD 500-25000mg/L；黃河鹽單胞菌液體菌劑添加量為V/V 1%-5%，固體菌粉添加量為W/V 0.1%-1%；所述的黃河鹽單胞菌為YJY20-04，保藏編號為CGMCC NO.20016。

6.權利要求5所述黃河鹽單胞菌菌劑在降解廢水中的有機物和全鹽中的應用，其特征在于：應用于降解高鹽廢水中的有機物和全鹽，廢水中COD在500-25000mg/L范圍內，COD去除率＞80%，廢水中全鹽在15000-30000 mg/L范圍內，全鹽去除率30-50%。