[發明專利]對生物材料評估腺病毒或腺相關病毒的病毒類型的非締合的病毒尺寸顆粒

在審

• 申請號: 202010598102.3
• 申請日: 2016-03-23
• 公開（公告）號: CN111795920A
• 公開（公告）日: 2020-10-20
• 發明（設計）人: M.A.阿爾廷格;F.K.科爾邁耶;M.W.奧爾斯佐伊;T.D.蓋茨
• 申請（專利權）人: 以埃森生物科學股份有限公司的名義經營的埃森儀器股份有限公司
• 主分類號: G01N15/14
• 分類號: G01N15/14
• 代理公司: 北京市柳沈律師事務所 11105
• 代理人: 曹立莉

1.評估生物材料樣品中的非締合的病毒尺寸顆粒的方法，所述非締合的病毒尺寸顆粒具有指示病毒類型的特定表位，所述病毒類型為選自：腺病毒的病毒類型和腺相關病毒的病毒類型，該方法包括:

對包含該生物材料樣品至少一部分的流體樣品進行流式細胞術，其中所述流體樣品包含能與特定表位直接或間接結合的熒光抗體染色劑，以形成包含具有所述表位的所述病毒尺寸顆粒和所述熒光抗體染色劑的非締合的標記的顆粒；

其中在流式細胞術期間進樣至流式細胞儀的流體樣品包含的未結合在非締合的標記的顆粒中的熒光抗體染色劑的濃度范圍為0.5微克/毫升至10微克/毫升。

2.評估生物材料樣品中的非締合的病毒尺寸顆粒的方法，所述非締合的病毒尺寸顆粒具有指示病毒類型的特定表位，所述病毒類型為選自：腺病毒的病毒類型和腺相關病毒的病毒類型，該方法包括:

對包含該生物材料樣品至少一部分的流體樣品進行流式細胞術，其中所述流體樣品包含能與特定表位直接或間接結合的熒光抗體染色劑，以形成包含具有所述表位的所述病毒尺寸顆粒和所述熒光抗體染色劑的非締合的標記的顆粒；

在流式細胞術之前，制備流體樣品，包括：

將待評估是否存在非締合的顆粒的生物材料與熒光抗體染色劑混合，所述熒光抗體染色劑能與所述表位直接或間接結合以形成未締合的病毒尺寸的標記的顆粒；和

在混合后，在流式細胞術之前，不從流體樣品去除未結合在非締合的標記的顆粒中的熒光抗體染色劑。

3.評估生物材料樣品中的非締合的病毒尺寸顆粒的方法，所述非締合的病毒尺寸顆粒具有指示病毒類型的特定表位，所述病毒類型為選自：腺病毒的病毒類型和腺相關病毒的病毒類型，該方法包括:

對包含該生物材料樣品至少一部分的流體樣品進行流式細胞術，其中所述流體樣品包含能與特定表位直接或間接結合的熒光抗體染色劑，以形成包含具有所述表位的所述病毒尺寸顆粒和所述熒光抗體染色劑的非締合的標記的顆粒；

其中所述流式細胞術不檢測光散射。

4.根據權利要求3的方法，其中所述流式細胞術包括僅檢測熒光發射。

5.評估生物材料樣品中的具有病毒類型的特定表位的非締合的病毒尺寸顆粒的方法，所述病毒類型選自以下：腺病毒的病毒類型或腺相關病毒的病毒類型，該方法包括:

對包含該生物材料樣品至少一部分的流體樣品進行流式細胞術，其中所述流體樣品包含能與特定表位直接或間接結合的熒光抗體染色劑，以形成包含具有所述表位的所述病毒尺寸顆粒和所述熒光抗體染色劑的非締合的標記的顆粒；

其中所述熒光抗體染色劑包含附著至抗體分子的熒光團，所述熒光抗體染色劑的每個抗體分子平均包含3至8個附著的熒光團。

6.評估生物材料樣品中的具有指示病毒類型的特定表位的非締合的病毒尺寸顆粒的方法，所述病毒類型選自以下：腺病毒的病毒類型或腺相關病毒的病毒類型，該方法包括:

對包含該生物材料樣品至少一部分的流體樣品進行流式細胞術，其中所述流體樣品包含能與特定表位直接或間接結合的熒光抗體染色劑，以形成包含具有所述表位的所述病毒尺寸顆粒和所述熒光抗體染色劑的非締合的標記的顆粒；

其中所述熒光抗體染色劑為具有第一熒光發射響應的第一熒光染色劑，且所述流體樣品包含具有第二熒光發射響應的第二熒光染色劑，該第二熒光發射響應不同于第一熒光發射響應，且所述流式細胞術包括在第一熒光發射響應的第一波長范圍內以及在第二熒光發射響應的第二波長范圍內檢測輻射。

7.根據權利要求6的方法，其中所述第二熒光染色劑包括對顆粒類型不具有特異性的熒光核酸染色劑。

8.根據權利要求6的方法，其中所述表位為第一表位，且所述第二熒光染色劑包含能夠與不同于第一表位的第二表位結合的第二熒光抗體染色劑。