[發明專利]CTB-Cap融合蛋白及其編碼基因與應用在審
| 申請號: | 202010597269.8 | 申請日: | 2020-06-28 |
| 公開(公告)號: | CN113845597A | 公開(公告)日: | 2021-12-28 |
| 發明(設計)人: | 范闊海;李宏全;孫耀貴;尹偉;孫娜;孫盼盼 | 申請(專利權)人: | 山西農業大學 |
| 主分類號: | C07K19/00 | 分類號: | C07K19/00;C12N15/62;C12N15/74;C12N1/21;C12R1/01 |
| 代理公司: | 太原科衛專利事務所(普通合伙) 14100 | 代理人: | 張彩琴;李曉娟 |
| 地址: | 030801 山西*** | 國省代碼: | 山西;14 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | ctb cap 融合 蛋白 及其 編碼 基因 應用 | ||
1.CTB-Cap融合蛋白,其氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示。
2.權利要求1所述CTB-Cap融合蛋白在制備豬圓環病毒2型疫苗中的應用。
3.權利要求1所述CTB-Cap融合蛋白的制備方法,其特征在于,包括以下步驟:
表達載體的構建:全基因組合成含有CTB-Cap和乳酸菌表達載體pNZ8148的重組質粒pNZ8148-CTB-Cap,通過雙酶切和PCR檢測,篩選出含有CTB-Cap基因序列的克隆;
乳酸乳球菌表達系統的構建:通過電轉化的方法,將獲得的重組質粒pNZ8148-CTB-Cap轉入乳酸菌感受態NZ9000;將轉化后的菌體懸液涂布于含有氯霉素的GM17平板上,30℃培養;挑取單克隆,使用不同濃度的Nisin誘導表達CTB-Cap融合蛋白,超聲破碎菌體;SDS-PAGE和Western blot檢測確認陽性克隆。
4.CTB-Cap融合蛋白的編碼基因,其堿基序列如SEQ ID NO:1所示。
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