[發明專利]CD74蛋白在制備識別缺血損傷后腦中巨噬細胞亞群試劑盒中的應用

在審

• 申請號: 202010596730.8
• 申請日: 2020-06-28
• 公開（公告）號: CN112067820A
• 公開（公告）日: 2020-12-11
• 發明（設計）人: 季煜華;李淑媛;季秋虹;季菊玲;邵倩
• 申請（專利權）人: 暨南大學
• 主分類號: G01N33/68
• 分類號: G01N33/68;C12Q1/02;G01N21/64
• 代理公司: 廣州市華學知識產權代理有限公司 44245
• 代理人: 蘇運貞

本發明公開了CD74蛋白在制備識別缺血損傷后腦中巨噬細胞亞群試劑盒中的應用。本發明是基于本發明發明人首次發現CD74蛋白可以將巨噬細胞區分為兩個亞群：CD74^hi和CD74^medium。本發明有利于進一步研究缺血腦組織中巨噬細胞所發揮的功能。

技術領域

本發明屬于生物醫學領域，特別涉及CD74蛋白在制備識別缺血損傷后腦中巨噬細胞亞群試劑盒中的應用。

背景技術

2016年的全球疾病負擔(Global Burden of Disease，GBD)數據顯示腦卒中是全球范圍內導致死亡和殘疾的第二原因，其中又以東亞的發病率最高(Gorelick,2019)。隨著我國人口平均壽命延長和社會的老齡化，過去30年里我國腦卒中疾病負擔有爆發式增長的態勢，40歲以上腦卒中現患病人數已超過1,200萬(中國腦卒中防治報告2018)。腦卒中給個人帶來巨大的身心痛苦，給家庭及社會造成沉重的經濟負擔。

近年隨著對炎癥在腦缺血損傷和修復中作用認識和研究的深入，炎癥被認為是影響腦卒中結局的主要決定因素，也是目前開發新的腦卒中治療方法的重要靶點(Dziedzic,2015；Lambertsen,Finsen,Clausen,2019)。參與該炎癥應答過程的主要有兩類細胞：腦中固有的小膠質細胞和從外周血募集而來的單核細胞/巨噬細胞(Liddelow et al.,2017；Anet al.,2014；Tang et al.,2006)。從外周血募集到腦中巨噬細胞是一個復雜的細胞群體(MosserEdwards,2008)。單核細胞來源的巨噬細胞被分為經典活化的促炎(M1-)巨噬細胞和交替活化的抗炎(M2-)巨噬細胞。前者促進炎癥反應，后者促進組織再生(Kigerl etal.,2009；MosserEdwards,2008)。在不同的組織損傷后，這些單核細胞/巨噬細胞亞群依次被激活，并協調了早期炎癥反應以及隨后的結構重塑和修復(Planas,2018)。此外還可根據表面分子的差異可以分為兩個亞群(Garcia-Bonilla et al.,2016)：表達高水平Ly-6C抗原和C-C趨化因子受體2(CCR2)的促炎單核細胞，通過CCR2，這一類型的細胞被招募到急性炎癥部位，釋放促炎細胞因子如白細胞介素-1(IL-1)、白細胞介素-6(IL-6)和腫瘤壞死因子-a(TNF-α)，促進壞死細胞清除；表達低水平Ly-6C抗原和CX3C趨化因子受體(CX3CR1)的抑炎單核細胞，通過fractalkine受體CX3CR1招募ly-6c低表達的單核細胞，釋放抗炎介質，如轉化生長因子-包裹體、IL-10和VEGF(vascular endothelial growth factor,inhibitor)，從而抑制炎癥，增強新生血管生成和組織修復。目前對單核細胞/巨噬細胞在腦缺血損傷中的確切作用還不清楚，發揮保護作用，加重損傷或者沒有作用的報道都有(Schmidt et al.,2017)，這可能與其存在著多種不同的亞群有關。

發明內容

本發明的目的在于克服現有技術的缺點與不足，提供CD74蛋白在制備識別缺血損傷后腦中巨噬細胞亞群試劑盒中的應用。

本發明的目的通過下述技術方案實現：CD74蛋白在制備識別缺血損傷后腦中巨噬細胞亞群試劑盒中的應用，是基于本發明發明人首次發現CD74蛋白可以將巨噬細胞區分為兩個亞群：CD74^hi和CD74^medium。

所述的試劑盒包括用于識別CD74蛋白的試劑。

所述的用于識別CD74蛋白的試劑包括CD74蛋白抗體；更優選為熒光標記的CD74蛋白抗體。

所述的熒光標記優選為FITC。

一種識別缺血損傷后腦中細胞亞群的方法，是通過應用上述試劑盒實現，包括如下步驟：

(1)提取動物腦組織單個核細胞；

(2)對單個核細胞中的CD74蛋白進行定量；