[發明專利]一種化學發光免疫分析用清洗液

有效

• 申請號: 202010592540.9
• 申請日: 2020-06-24
• 公開（公告）號: CN111896731B
• 公開（公告）日: 2023-06-09
• 發明（設計）人: 周廣亮;張聞;陳媛;周海濱;章思思;陳燁;徐孝鋒
• 申請（專利權）人: 寧波瑞源生物科技有限公司
• 主分類號: G01N33/543
• 分類號: G01N33/543;G01N21/76
• 代理公司: 寧波市鄞州盛飛專利代理事務所(特殊普通合伙) 33243
• 代理人: 王玲華;洪珊珊

本發明屬于化學發光免疫分析技術領域，涉及一種化學發光免疫分析用清洗液。所述清洗液包括以下成分：磷酸鹽緩沖液：10?50mmol/L，酪蛋白酸鈉：0.05?1wt％，乙二胺四乙酸二鈉：0.02?0.2wt％，脫氧膽酸鈉：0.01?0.1wt％，非離子型表面活性劑：0.05?1wt％，防腐劑：0.02?0.08wt％。本發明通過聯合使用酪蛋白酸鈉、乙二胺四乙酸二鈉和脫氧膽酸鈉作為清洗液中的有效成分，利用各成分之間的相互作用，大大提高清洗液清洗效果并穩定抗體抗原復合物，從而提高檢測試劑的準確性和再現性。

技術領域

本發明屬于化學發光免疫分析技術領域，涉及一種化學發光免疫分析用清洗液。

背景技術

化學發光免疫分析技術是利用化學反應釋放的自由能激發中間體，使其從激發態回到基態，當中間體從激發態回到基態時釋放等能級的光子，再對光子進行測定而進行的定量分析技術。根據免疫標記物不同，化學發光分析分為以下三類：直接化學發光免疫分析、化學發光酶免疫分析、電化學發光免疫分析。直接化學發光免疫分析，其特點是采用吖啶酯、異魯米諾衍生物ABEI等作為示蹤物質標記抗原或抗體分子形成發光標記物，采用包被有抗體或抗原的磁性微球作為固相載體的分離方式，通過堿性液誘導結合標記物發光，并通過測定發光強度實現對超微量物質的定量分析。

在化學發光免疫分析過程中，當免疫反應結束后，通常需要使用清洗液對反應物進行洗滌，從而去除未結合到磁性微球-抗體抗原免疫復合物上的物質，除去樣品中與反應無關的成分和游離的結合物以及反應過程中吸附于固相載體上的非特異性干擾物質。清洗液的清洗效果，直接關系到檢測結果的準確性，因此，清洗是化學發光免疫分析過程中決定試驗成敗的一個關鍵步驟。

目前，在提高化學發光免疫分析試劑性能(重復性、靈敏度和特異性等)方面，研發人員通常致力于篩選到好的主要原料(抗原和抗體)及優化工藝反應體系，往往忽略清洗液的作用。有關清洗液的研究和報道相對較少：如中國專利申請CN?105754733A公開了一種化學發光免疫分析儀清洗液，由二水合磷酸二氫鈉、十二水合磷酸氫二鈉、氯化鈉、氯化鉀、表面活性劑、防腐劑和去離子水組成，其采用價格低廉的成分配制成清洗液，降低成本；再如中國專利申請CN?109517670A公開的清洗液包括磷酸二氫鉀、氫氧化鈉、丙二醇、防腐劑和曲拉通，其提供堿性環境，激發化學發光反應。現有的清洗液大致由無機鹽、表面活性劑和防腐劑組成，對化學發光免疫分析試劑特異性作用和靈敏度作用有限，臨床上時常出現假陽性和假陰性，不能滿足化學發光免疫分析高靈敏度和特異性的要求。

發明內容

本發明針對已有化學發光免疫分析用清洗液存在的不足，提供一種新穎的清洗液，其具有優異的清洗效果、成本低廉，具有較大的社會效應和經濟效益。

本發明一個方面提供的一種化學發光免疫分析用清洗液，包括以下成分：

磷酸鹽緩沖液：10-50mmol/L，

酪蛋白酸鈉：0.05-1wt％，

乙二胺四乙酸二鈉：0.02-0.2wt％，

脫氧膽酸鈉：0.01-0.1wt％，

非離子型表面活性劑：0.05-1wt％，

防腐劑：0.02-0.08wt％。

本發明添加的磷酸鹽緩沖液用于維持清洗液pH值，磷酸鹽緩沖液的pH值優選為6.8-7.5，使得清洗液的pH值維持在6.8-7.5，在清洗液中性溫和的條件下，有利于磁性微球分散，提高清洗效果，并有利于抗體抗原復合物的穩定。為了保證緩沖劑的pH緩沖作用，選擇磷酸鹽緩沖液的濃度為10-50mmol/L，一方面避免了緩沖劑濃度過低導致緩沖能力差、不能高效保證清洗液穩定pH值的缺陷；另一方面避免了緩沖劑濃度過高導致的結晶問題。