[發(fā)明專利]一種鹽地堿蓬組織培養(yǎng)快速繁殖培養(yǎng)基及培養(yǎng)方法有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 202010582979.3 | 申請日： | 2020-06-23 |
| 公開（公告）號： | CN111543329B | 公開（公告）日： | 2022-04-22 |
| 發(fā)明（設(shè)計）人： | 汪正飛;張本厚;張代臻;牛志韜;丁鴿;李寅森;韋祎;虞舒婷 | 申請（專利權(quán)）人： | 鹽城師范學院 |
| 主分類號： | C12N5/04 | 分類號： | C12N5/04;A01H4/00 |
| 代理公司： | 南京北辰聯(lián)和知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 32350 | 代理人： | 陸中丹 |
| 地址： | 224007 江蘇*** | 國省代碼： | 江蘇;32 |
| 權(quán)利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 一種 組織培養(yǎng) 快速 繁殖 培養(yǎng)基 培養(yǎng) 方法 | ||
1.一種鹽地堿蓬組織培養(yǎng)快速繁殖培養(yǎng)基，其特征在于，該鹽地堿蓬組織培養(yǎng)快速繁殖培養(yǎng)基包括三個培養(yǎng)階段的種子萌發(fā)培養(yǎng)基、增殖培養(yǎng)基和生根壯苗培養(yǎng)基，其中，所述種子萌發(fā)培養(yǎng)基的配方為：MS+NaCl 0~0.05g/L + 蔗糖10~30g/L；所述增殖培養(yǎng)基的配方為MS+6-BA 0.5~1.5mg/L +IAA 0.1~0.6mg/L+NaCl 0.05~0.2g/L+蔗糖 20~40g/L；所述生根壯苗培養(yǎng)基的配方為：MS+NAA 0.2~0.6mg/L+NaCl 0.3~0.8g/L+蔗糖20~40g/L；所述種子萌發(fā)培養(yǎng)基、增殖培養(yǎng)基和生根壯苗培養(yǎng)基均是以瓊脂為支撐物的固體培養(yǎng)基，其中所述瓊脂的添加量均為5.5~6.5g/L，所述種子萌發(fā)培養(yǎng)基、增殖培養(yǎng)基和生根壯苗培養(yǎng)基pH值均為6.0~6.5。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的鹽地堿蓬組織培養(yǎng)快速繁殖培養(yǎng)基，其特征在于，所述種子萌發(fā)培養(yǎng)基的配方為MS+NaCl 0.01~0.03g/L +蔗糖15~25g/L；所述增殖培養(yǎng)基的配方為MS+6-BA 0.8~1.2mg/L+IAA 0.3~0.5mg/L+NaCl 0.1~0.15g/L+蔗糖 25~35g/L；所述生根壯苗培養(yǎng)基的配方為MS+NAA 0.3~0.5mg/L+NaCl 0.4~0.6g/L+蔗糖30~40g/L。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的鹽地堿蓬組織培養(yǎng)快速繁殖培養(yǎng)基，其特征在于，所述種子萌發(fā)培養(yǎng)基的配方為MS+NaCl 0.02g/L+蔗糖20g/L；所述增殖培養(yǎng)基的配方為MS+6-BA1.0mg/L+IAA 0.4mg/L+NaCl 0.12g/L+蔗糖 30g/L；所述生根壯苗培養(yǎng)基的配方為MS+NAA0.4mg/L+NaCl 0.5g/L+蔗糖35g/L。
4.根據(jù)權(quán)利要求1-3任一項所述的鹽地堿蓬組織培養(yǎng)快速繁殖培養(yǎng)基，其特征在于，所述培養(yǎng)基的制備方法，具體包括以下步驟：
（1）配置MS基本培養(yǎng)基：
（1-1）將氮元素、硫元素、磷元素配置成20×濃度的第一母液，備用；
（1-2）將鈣鹽配置成200×濃度的第二母液，備用；
（1-3）將鐵鹽配置成200×濃度的第三母液，備用；
（1-4）將微量元素配置成200×濃度的第四母液，備用；
（1-5）將有機成分配置成200×濃度的第五母液，備用；
（2）分別在蒸餾水中按比例加入第一母液、第二母液、第三母液、第四母液、第五母液、蔗糖、NaCl溶液或/和植物激素，煮沸；
（3）水溶液沸騰后，一邊攪拌一邊添加瓊脂，直到瓊脂全部溶解；
（4）pH試紙或pH計檢測培養(yǎng)基pH值，利用NaOH溶液和稀HCl溶液調(diào)節(jié)pH；
（5）將培養(yǎng)基分裝到組培瓶中，高溫高壓滅菌，冷卻后備用。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的鹽地堿蓬組織培養(yǎng)快速繁殖培養(yǎng)基，其特征在于，所述步驟（1-1）中的氮元素為NH4NO3 和KNO3，所述硫元素為MgSO4·7H2O，所述磷元素KH2PO4，所述鈣鹽為CaCl2·2H2O，所述鐵鹽為FeSO4·7H2O和Na2EDTA·2H2O，所述微量元素包括KI、H3BO3、MnSO4·4H2O、ZnSO4·7H2O、Na2MoO4·2H2O、CuSO4·5H2O和CoCl2·6H2O；所述有機成分包括肌醇、煙酸、鹽酸吡哆醇、鹽酸硫胺素和甘氨酸；所述步驟（2）中添加的第一母液、第二母液、第三母液、第四母液和第五母液的體積比為10：1：1：1：1，所述植物激素為IAA或NAA。
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