[發明專利]同時檢測四種B組柯薩奇病毒亞型的核酸組合物及其試劑盒和檢測方法

在審

• 申請號: 202010581843.0
• 申請日: 2020-06-23
• 公開（公告）號: CN111748650A
• 公開（公告）日: 2020-10-09
• 發明（設計）人: 鄧春興;李泓彥
• 申請（專利權）人: 深圳市艾偉迪生物科技有限公司
• 主分類號: C12Q1/70
• 分類號: C12Q1/70;C12Q1/686;C12N15/11
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• 代理人: 暫無信息

本發明涉及體外分子檢測的技術領域，公開了一種同時檢測四種B組柯薩奇病毒亞型的核酸組合物及其試劑盒和檢測方法，所述核酸組合物包括以下序列：CB2F：SEQ ID No：1；CB2R：SEQ ID No：2；CB2P：SEQ ID No：3；CB3F：SEQ ID No：4；CB3R：SEQ ID No：5；CB3P:SEQ ID No：6；CB4F：SEQ ID No：7；CB4R:SEQ ID No：8；CB4P:SEQ ID No：9；CB5F：SEQ ID No：10；CB5R:SEQ ID No：11；CB5P:SEQ ID No：12。本發明具有以下效果：能夠快速準確的對柯薩奇病毒四種亞型進行篩查，特異性好。

技術領域

本發明涉及體外分子檢測的技術領域，尤其是涉及一種同時檢測四種B組柯薩奇病毒亞型的核酸組合物及其試劑盒和檢測方法。

背景技術

柯薩奇病毒(coxsachie virus)是一種腸病毒，以血清學分析依據分為A和B兩型，其中A型包含24種亞型，B型包含5種不同亞型。柯薩奇病毒A型感染表現為上呼吸道感染起病急，流涕、咳嗽、咽痛、發熱，全身不適；柯薩奇病毒B型感染引起特征性傳染性胸肋痛，可合并腦膜腦炎、心肌炎、發熱、肝炎、溶血性貧血和肺炎。

目前，在體外核酸檢測技術領域中，實時熒光定量PCR技術作為國內外應用最為廣泛的技術方法之一，該方法的原理主要基于標記不同顏色Taq-Man熒光探針，結合相關熒光檢測系統儀器，從而達到檢測的目的。而在體外病毒RNA的核酸檢測方法中，主要包括一步法RT-PCR法，熒光染料RT-PCR法和熒光探針RT-PCR法，其中一步法RT-PCR法由于需要進行開蓋電泳，容易導致實驗室污染，不宜大范圍使用；而熒光染料RT-PCR法由于其熒光顯色原理導致其易出現假陽性結果，因此也不適合臨床檢測。熒光探針RT-PCR法由于其特異性高、靈敏度高等優勢，目前是應用最為廣泛的技術。

上述中的現有技術方案存在以下缺陷：現有的大多數檢測試劑盒主要以單重單靶標檢測技術為主，每一次操作僅能檢測出一種病毒亞型，無法實現同時對多亞型病原體的分型檢測，出于臨床考慮，需要實現多靶標檢測，以完成臨床上對柯薩奇病毒的快速分型檢測。

發明內容

本發明的目的是提供一種同時檢測四種B組柯薩奇病毒亞型的核酸組合物，從而能在一次反應中同時對柯薩奇病毒的四種B組亞型進行分型檢測，以完成臨床需求。

本發明的上述技術目的是通過以下技術方案得以實現的：

一種同時檢測四種B組柯薩奇病毒亞型的核酸組合物，包括以下引物和探針序列：

CB2上游引物序列 CACCAAAGAGAAGAAGTTTGC SEQ ID No：1；

CB2下游引物序列 CGTGAACAGTTCTAACTTCCTC SEQ ID No：2；

CB2探針序列 CAGCTTGCCTAACACTCACCTTCCATG SEQ ID No：3；

CB3上游引物序列 TGCTGAGTGGGTGATAACA SEQ ID No：4；

CB3下游引物序列 AGCTCCAAATCAAACCTCATATAC SEQ ID No：5；

CB3探針序列 TTCTTCGCAGTTGTACCGCCTGGC SEQ ID No：6；

CB4上游引物序列 TTCGTTGTGACATGGAACTG SEQ ID No：7；

CB4下游引物序列 ATTATTTGATGTGTCTGGACCG SEQ ID No：8；