[發明專利]RSPH9作為少弱精癥診斷標志物或治療靶點的應用

在審

• 申請號: 202010580255.5
• 申請日: 2020-06-23
• 公開（公告）號: CN111521828A
• 公開（公告）日: 2020-08-11
• 發明（設計）人: 黃寧;張亞卓;林克萌;孫勝楠;董錫陽
• 申請（專利權）人: 山東立菲生物產業有限公司
• 主分類號: G01N33/68
• 分類號: G01N33/68;A61K45/00;A61P15/08
• 代理公司: 濟南圣達知識產權代理有限公司 37221
• 代理人: 李箏

本發明具體涉及RSPH9作為少弱精癥診斷標志物或治療靶點的應用。本發明對正常和病人精子蛋白進行提取，以牛血清白蛋白為標準品利用高分辨生物質譜和非標記定量蛋白質組學方法對多組重度少弱精疾病的精子蛋白進行深度的質譜分析；利用蛋白定量分析方法對質譜數據進行搜索，鑒定精子中蛋白質；最后通過正常和病人精子蛋白組的比較，篩選得到RSPH9在健康與少弱精子樣本中含量存在顯著差異。通過ROC分析進一步驗證，RSPH9作為診斷標志物具有良好的特異性，有望作為重度少弱精癥的診斷標志物及治療靶點。

技術領域

本發明屬于少弱精診斷及治療技術領域，具體涉及RSPH9作為少弱精癥診斷標志物或治療靶點，在制備診斷試劑或治療少弱精癥藥物中的應用。

背景技術

公開該背景技術部分的信息僅僅旨在增加對本發明的總體背景的理解，而不必然被視為承認或以任何形式暗示該信息構成已經成為本領域一般技術人員所公知的現有技術。

世衛組織調查結果顯示，15％的育齡夫婦存在不育問題，不育癥已成為影響人類健康與社會發展的一個全球性醫學和社會問題(Turner,T.T.and J.J.Lysiak,Oxidativestress:a common factor in testicular dysfunction.J Androl,2008.29(5):p.488-98)。弱精子癥是男性不育的主要原因之一。弱精子癥約占男性不育的19％，而少精弱精或畸形弱精子癥占男性不育的63％。弱精具體是指精液中前向運動的精子含量較少、精子活力低下；少精則是指單位體積精液中數目低于一定指標的異常表面。二者的診斷標準存在一定差異，但發病原因較為相似，目前針對上述兩種病癥的治療方式也較為大體相同。

目前針對少弱精癥的發病機制通常認為與遺傳、感染及缺乏營養補充相關，具體的發病機制并不明確。臨床治療以中醫或中西醫結合的方式為主，采用補益腎精氣血虧虛的藥物進行治療，尚沒有有效的治療藥物。為了明確少弱精癥的發病機制，本領域開展了基于蛋白質組學的少弱精癥相關生物標志物的研究。蛋白質是生命活動的分子基礎，將疾病狀態下異常的或者數量變化極大的特異蛋白作為疾病的生物標志物進而用于診斷疾病的進程具有重要意義。Saraswat等利用UPLC-MS的方法在人類精子中定量了667個蛋白，并且分析出了20個健康人和弱精癥患者精子中的差異蛋白。通過盡量多的篩選和確定與少弱精相關的生物標志物有利于通過代謝分析明確發病機制，制定相應的治療策略及開展藥物研發。

發明內容

基于上述背景技術中記載的內容，發明人認為，盡可能篩選與少弱精相關的生物標志物不僅能夠輔助少弱精癥的診斷，還有助于明確疾病發病機制，對應的制定治療策略，開發有效的治療藥物。

RSPH9(Radial spoke head protein 9homolog)基因編碼的蛋白，被認為是運動性纖毛和鞭毛中軸突放射狀輻條頭的組成部件，有研究顯示其甲基化可作為非浸潤性的膀胱癌的預后指標。目前對于其構成和功能研究還較為空白，而依據本發明的研究結果顯示，在少弱精樣本中，RSPH9的蛋白含量顯著下調，ROC分析顯示RSPH9作為診斷標志物具有良好的診斷效果。同時，RSPH9在患者樣本中含量下降，針對RSPH9用藥調節其含量回歸正常水平是本領域的常規研究思路。上述結論預示著RSPH9能夠作為一種少弱精診斷標志物和治療靶點。

基于上述研究結果，本發明提供以下技術方案：

本發明第一方面，提供RSPH9作為生物標志物在制備少精癥、弱精癥或重度少弱精癥診斷產品中的應用。

本發明通過蛋白質組學方法驗證了RSPH9在少弱精患者的精子樣本中低表達，具有統計學意義，證明RSPH9與少弱精患病情況存在相關性，可單獨或結合其他生物標志物用于少精癥、弱精癥及重度少弱精癥的診斷。