[發明專利]一種促進間充質干細胞成骨分化的促進劑

有效

• 申請號: 202010576883.6
• 申請日: 2020-06-22
• 公開（公告）號: CN111534487B
• 公開（公告）日: 2021-05-14
• 發明（設計）人: 不公告發明人
• 申請（專利權）人: 孫德強
• 主分類號: C12N5/0775
• 分類號: C12N5/0775;C12N5/077;C12P21/06;C07K1/14;C07K1/34
• 代理公司: 濟南智圓行方專利代理事務所(普通合伙企業) 37231
• 代理人: 梁軼聰

本發明屬于干細胞技術領域，尤其涉及一種促進間充質干細胞成骨分化的促進劑。本發明通過熒光定量PCR實驗，Western Blot實驗，茜素紅染色實驗發現泥螺多肽能夠顯著的促進骨髓間充質干細胞成骨分化相關基因ALP、BGLAP和RUNX2的mRNA水平和蛋白水平的表達，并且可以顯著的促進骨髓間充質干細胞的礦化水平，說明泥螺多肽可以作為間充質干細胞成骨分化的促進劑來促進間充質干細胞的成骨分化，從而為治療骨質疏松，骨損傷等疾病提供更多的成骨細胞。

技術領域

本發明屬于干細胞技術領域，尤其涉及一種促進間充質干細胞成骨分化的促進劑。

背景技術

在骨損傷的臨床治療工作中，治療和預防大塊骨缺損、術后骨不連以及骨質疏松已經成為骨科亟待解決的難題。傳統的植骨手術損傷大，骨量有限，需要一種創傷小、安全有效的方法代替它，目前組織工程技術已經成為解決骨不連和骨缺損的重要方法，增強骨形成是有效治療骨損傷的重要策略。

骨髓間充質干細胞是一類具有自我更新以及多向分化潛能的原始細胞，是體內成骨細胞的主要來源。骨髓間充質干細胞的增殖以及成骨分化對于維持成骨細胞的數量具有重要的意義。目前，組織工程技術常常會面臨成骨細胞不足的問題，因此，尋找新的能夠存進骨髓間充質干細胞成骨分化的物質是目前急需解決的問題。

由于海洋生物資源繁多，再生能力強，因此，海洋生物成為活性肽的重要來源。海洋生物因其生活環境的不同，而擁有獨特的生理性狀，從而存在許多具有特殊生物活性的物質，因而具有巨大的開發潛力。

泥螺屬軟體動物門、泥螺屬，為太平洋西岸海水及咸淡水特產的種類。我國主要在寧波和遼寧的東港產泥螺。泥螺軟體部分含有豐富的蛋白質和多肽。目前的研究顯示，泥螺多肽具有抗腫瘤的作用，但是關于泥螺多肽在骨髓間充質干細胞成骨分化方面的研究目前尚無。

發明內容

本發明的目的在于提供一種泥螺多肽促進骨髓間充質干細胞成骨分化中的新用途。

為實現上述目的，本發明提供了如下技術方案：

本發明提供了一種促進間充質干細胞成骨分化的促進劑，所述促進劑為泥螺多肽。

優選地，所述間充質干細胞為骨髓間充質干細胞。

優選地，所述泥螺多肽的制備方法如下：

（1）將泥螺洗凈，取軟體組織，凍干粉碎，加入3倍重量的水，得到泥螺勻漿液；

（2）加入0.02倍泥螺勻漿液重量的木瓜蛋白酶，調節PH為6，55℃恒溫水浴4小時，得到泥螺酶解液；

（3）95℃水浴加熱20分鐘,5000r/min離心取上清，得到粗泥螺提取液；

（4）將粗泥螺提取液經過孔徑2nm的納濾膜，得到細泥螺提取液；

（5）將細泥螺提取液置于真空冷凍干燥機中真空冷凍干燥，得到泥螺多肽。

優選地，所述促進劑用于促進骨髓間充質干細胞分化為成骨細胞。

此外，本發明提供了一種泥螺多肽在促進骨髓間充質干細胞成骨分化中的用途。

優選地，所述用途包括泥螺多肽在促進骨髓間充質干細胞成骨分化基因ALP、RUNX2和BGLAP表達中的用途。

優選地，所述泥螺多肽的制備方法如下：

（1）將泥螺洗凈，取軟體組織，凍干粉碎，加入3倍重量的水，得到泥螺勻漿液；

（2）加入0.02倍泥螺勻漿液重量的木瓜蛋白酶，調節PH為6，55℃恒溫水浴4小時，得到泥螺酶解液；

（3）95℃水浴加熱20分鐘,5000r/min離心取上清，得到粗泥螺提取液；