[發(fā)明專利]一種促進毛細胞再生和聽力恢復(fù)的組合物及其用途

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 202010576018.1
• 申請日: 2020-06-22
• 公開（公告）號: CN111643671B
• 公開（公告）日: 2021-07-30
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 萬國強;柳晴
• 申請（專利權(quán)）人: 南京大學(xué)
• 主分類號: A61K45/06
• 分類號: A61K45/06;A61K31/404;A61K31/44;A61K31/4439;A61K31/444;A61K31/47;A61P27/16;C12N5/071
• 代理公司: 江蘇瑞途律師事務(wù)所 32346
• 代理人: 王琳琳;陳彬

1.一種促進毛細胞再生組合物，其特征在于：所述組合物包括Wnt激動劑與以下一種或多種試劑組合：

VEGFR抑制劑，所述VEGFR抑制劑為瑞格菲尼及其藥用鹽，

ERG抑制劑，所述ERG抑制劑為YK-4-279及其藥用鹽，

所述Wnt激動劑為Chir99021及其藥用鹽。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的促進毛細胞再生組合物，其特征在于：所述組合物包括Wnt激動劑與以下三種試劑組合：(a) VEGFR抑制劑；(b) Tgfbr抑制劑；(c) ERG抑制劑。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的促進毛細胞再生組合物，其特征在于：所述VEGFR抑制劑的使用濃度為0.5 ~ 1.5 μM，和/或所述Tgfbr抑制劑的使用濃度為0.5 ~ 10 μM，和/或Wnt激動劑的使用濃度為2 μM。

4.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的促進毛細胞再生組合物，其特征在于：所述ERG抑制劑的使用濃度為 0.05 ~ 0.5 μM。

5.權(quán)利要求1~4所述的促進毛細胞再生組合物在制備促進內(nèi)耳毛細胞再生藥物中的應(yīng)用。

6.一種以非治療目的促進內(nèi)耳支持細胞群體再生與分化的方法，其特征在于：該方法使內(nèi)耳支持細胞群體與權(quán)利要求1~5任意一項所述的促進毛細胞再生組合物接觸，其中所述一種或多種試劑與Wnt激動劑協(xié)同促進內(nèi)耳支持細胞群體擴增和分化為內(nèi)耳毛細胞。

7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的以非治療目的促進內(nèi)耳支持細胞群體再生與分化的方法，其特征在于：所述內(nèi)耳支持細胞群體包括類器官或離體組織，所述內(nèi)耳支持細胞群體來源為新生耳蝸的祖細胞，和/或所述內(nèi)耳支持細胞群體來源包括擴增的Lgr5+支持細胞、Lgr5-支持細胞和Sox2+非感覺支持細胞。

8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的以非治療目的的促進內(nèi)耳支持細胞群體再生與分化的方法，其特征在于：所述VEGFR抑制劑的使用濃度為0.5 ~ 1.5 μM，和/或所述Tgfbr抑制劑的使用濃度為0.5 ~ 10 μM，和/或所述ERG抑制劑的使用濃度為0.05 ~ 0.5 μM，和/或Wnt激動劑的使用濃度為2 μM。

9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的以非治療目的的促進內(nèi)耳支持細胞群體再生與分化的方法，其特征在于：所述方法包括以下步驟：

1）獲得內(nèi)耳支持細胞群體的單細胞；

2）將所述單細胞重懸在擴增/分化培養(yǎng)基中進行培養(yǎng)，所述的擴增/分化培養(yǎng)基中包括無血清的Advanced DMEM/F12，Glutamax I，N2補充劑，B27補充劑，表皮生長因子，纖維母細胞生長因子，胰島素樣生長因子1和所述的促進內(nèi)耳毛細胞再生組合物，所述組合物包括Wnt激動劑與以下一種或多種試劑：

(a) VEGFR抑制劑；

(b) Tgfbr抑制劑；

(c) ERG抑制劑。