[發明專利]一種威氏海鏈藻TwPEPC1基因及應用和培育高產水稻的方法

有效

• 申請號: 202010573462.8
• 申請日: 2020-06-22
• 公開（公告）號: CN111647613B
• 公開（公告）日: 2021-11-26
• 發明（設計）人: 林擁軍;陳太鈺
• 申請（專利權）人: 華中農業大學
• 主分類號: C12N15/57
• 分類號: C12N15/57;C12N9/48;C12N15/82;A01H4/00;A01H5/00;A01H6/46
• 代理公司: 北京高沃律師事務所 11569
• 代理人: 呂紀濤

1.一種威氏海鏈藻( Thalassiosira weissflogii ) TwPEPC1基因，其特征在于，所述威氏海鏈藻TwPEPC1基因的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示。

2.權利要求1所述的威氏海鏈藻TwPEPC1基因在提高水稻產量中的應用。

3.一種利用權利要求1所述威氏海鏈藻TwPEPC1基因培育高產水稻的方法，其特征在于，包括：

（1）將權利要求1所述的威氏海鏈藻TwPEPC1基因電轉化入大腸桿菌，擴大培養、抽提質粒，得到克隆質粒；

（2）用Kpn I單酶酶切所述步驟（1）的克隆質粒，獲得克隆質粒基因片段，用Kpn I單酶酶切載體pC1300s，獲得線性載體pC1300s，將所述克隆質粒基因片段構建于線性載體pC1300s中，得到轉化載體，將所述轉化載體導入農桿菌中，得到轉化菌株；

（3）將步驟（2）所述的轉化菌株侵染水稻愈傷組織，將侵染后的水稻愈傷組織培養，得到高產水稻。

4.根據權利要求3所述的方法，其特征在于，所述威氏海鏈藻TwPEPC1基因的獲得方法包括：以威氏海鏈藻基因DNA為模板利用簡并引物進行PCR擴增，得到威氏海鏈藻TwPEPC1基因。

5.根據權利要求4所述的方法，其特征在于，所述簡并引物包括上游引物和下游引物；

所述上游引物的核苷酸序列如SEQ ID No.3所示；

所述下游引物的核苷酸序列如SEQ ID No.4所示。

6.根據權利要求3所述的方法，其特征在于，步驟（2）所述農桿菌包括農桿菌EHA105。

7.根據權利要求3所述的方法，其特征在于，步驟（3）所述侵染包括：將所述水稻愈傷組織浸泡于OD₆₀₀值為0.8~1.0的農桿菌懸液中25~35min。

8.根據權利要求3或7所述的方法，其特征在于，步驟（3）所述水稻愈傷組織包括水稻胚性愈傷組織。

9.根據權利要求3所述的方法，其特征在于，所述水稻的品種包括中花11水稻。