[發明專利]一種Pratensilin D化合物及其制備和應用

有效

• 申請號: 202010573368.2
• 申請日: 2020-06-22
• 公開（公告）號: CN111808112B
• 公開（公告）日: 2022-04-26
• 發明（設計）人: 張淑敏;謝則平;郭琳;劉明;寇立娟;張露;付信珍;李志
• 申請（專利權）人: 濱州醫學院
• 主分類號: C07D491/107
• 分類號: C07D491/107;A61K31/407;A61P31/04;A61P35/00;C12P17/18;C12R1/465
• 代理公司: 沈陽科苑專利商標代理有限公司 21002
• 代理人: 李穎

本發明涉及微生物技術領域，具體的說是一種(+)?和(?)?Pratensilins D化合物及其制備方法和在制備抗菌藥物及抗腫瘤藥物中的應用?；衔锏幕瘜W式為C₂₈H₂₂O₆N，具有S或R兩種結構式的化合物，其結構式如下，本發明制備所得的(±)?Pratensilin D類化合物來源于海洋鏈霉菌Streptomyces pratensis KCB?132的發酵產物，采用微生物發酵的方法制備該化合物具有高效環保的特點。

技術領域

本發明涉及微生物技術領域，具體的說是一種(+)-和(-)-Pratensilins D化合物及其制備方法和在制備抗菌藥物及抗腫瘤藥物中的應用。

背景技術

隨著對普通環境中微生物資源的不斷挖掘，從中發現新穎放線菌資源及生物活性物質的概率越來越低，菌種的大量重復發現和重復篩選導致了發現新的先導化合物的幾率越來越低，難度越來越大。因此人們把研究逐漸轉向一個新的方向——極端環境。極端環境中的微生物為了適應諸如低溫、高堿、高鹽、高滲、高壓、干旱、無光等各種極端條件，其生長特性、營養需求、繁殖規律、細胞結構、膜結構、蛋白及酶的結構、核酸結構、基因表達調控等均與普通環境中的微生物有著巨大的差異。次生代謝是生物在長期的進化過程中對環境的適應機制之一，是自然選擇的結果。生存于極端環境的放線菌，經過長期的進化選擇，必然具有特殊的代謝類型，從而合成結構新穎、獨特、生物活性廣泛的次生代謝產物，這必然將極大地提高新穎藥物先導化合物的發現幾率，是發現具有生物活性的新結構天然產物的寶藏。

發明內容

本發明提供一種新生物堿類化合物及其制備方法，和在制備抗菌及抗腫瘤藥物中的應用。

為實現上述目的，本發明采用技術方案為：

一種(±)-Pratensilin D化合物，化合物的化學式為C₂₈H₂₂O₆N，具有S或R兩種結構式的化合物，其結構式為

化合物的制備方法，將活化后的海洋鏈霉菌Streptomyces pratensis KCB-132于ISP2培養基中發酵培養，純化后即為式一、式二所示化合物。

具體為：

1)將海洋鏈霉菌Streptomyces pratensis KCB-132劃線接種于ISP2固體培養基上，28℃培養直至長出白色的孢子，取孢子體接種到液體培養基，28℃，150-220rpm/min，搖床培養8-12d收獲發酵物，將發酵液經大孔吸附樹脂洗脫，而后減壓濃縮得總浸膏；

2)總浸膏經硅膠柱層析，以體積比為0:100-100:0的甲醇/二氯甲烷為洗脫液進行梯度洗脫，收集洗脫液體積比1:99的甲醇/二氯甲烷的洗脫組分，將收集的洗脫組分進行ODS反相柱層析，收集含60％有機醇的洗脫液的洗脫部分，濃縮，進行HPLC制備得到化合物Pratensilin D，再通過手性色譜柱進行拆分得到(+)-和(-)-Pratensilins D。

所述步驟1)中萃取是采用的有機溶劑為乙酸乙酯和/或正丁醇，優選為乙酸乙酯；

所述大孔吸附樹脂洗脫采用的洗脫液為有機醇；其中，有機醇為甲醇、乙醇中的一種，優選為乙醇。

所述ODS反相柱層析的洗脫液為有機醇和水；其中，有機醇和水的體積比為0:100-100:0，所述有機劑為甲醇、乙醇或乙腈，優選為甲醇。

所述培養基為ISP2固體或液體培養基。

所述大孔吸附樹脂柱，為弱極性或非極性的大孔吸附樹脂，優選弱極性。

一種化合物的應用，所述化合物在作為抗腫瘤藥物或先導化合物中的應用。