[發(fā)明專利]一種靶向環(huán)狀RNA 0089762的shRNA及其應(yīng)用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 202010573066.5
• 申請日: 2020-06-22
• 公開（公告）號: CN111635900B
• 公開（公告）日: 2021-10-15
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 高志良;趙綺毅;梁蕙欣
• 申請（專利權(quán)）人: 中山大學(xué)附屬第三醫(yī)院
• 主分類號: C12N15/113
• 分類號: C12N15/113;A61P1/16;A61P3/10;A61P3/04;A61P9/10
• 代理公司: 福州科揚(yáng)專利事務(wù)所(普通合伙) 35001
• 代理人: 吳嘉濱

本發(fā)明涉及一種靶向環(huán)狀RNA 0089762的shRNA，所述shRNA的核苷酸序列如sh?circRNA?1：5’?CCATGTCGCCTGGTTCTAGTT?3’或sh?circRNA?2：5’?CGCTGCATGTGCCATGTCGTT?3’，同時，本發(fā)明還提供靶向環(huán)狀RNA 0089762的shRNA應(yīng)用于細(xì)胞實驗中促進(jìn)代謝性炎癥；所述代謝性炎癥引起的代謝性疾病包括肥胖、2型糖尿病、動脈粥樣硬化或非酒精性脂肪性肝病。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及生物醫(yī)學(xué)技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種靶向環(huán)狀RNA 0089762的shRNA及其在調(diào)節(jié)代謝性炎癥中的應(yīng)用。

背景技術(shù)

由于現(xiàn)代生活習(xí)慣和環(huán)境的變化產(chǎn)生代謝紊亂及包括游離脂肪酸和內(nèi)毒素等代謝產(chǎn)物，極化巨噬細(xì)胞并誘發(fā)慢性低度炎癥，稱為代謝性炎癥，損傷組織和器官并導(dǎo)致代謝性疾病；代謝性炎癥以持續(xù)存在的低水平炎癥為特征，涉及和經(jīng)典炎癥類似的分子和信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路，可造成多種炎性分子的表達(dá)和活性增強(qiáng)，進(jìn)而損傷相關(guān)器官的形態(tài)和功能，與多種慢性代謝性疾病密切相關(guān)，如非酒精性脂肪性肝病（NAFLD），動脈粥樣硬化、2型糖尿病及肥胖等。

非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）是指除酒精外的其他明確的損肝因素所致的肝細(xì)胞內(nèi)脂肪過度沉積為主要特征的臨床病理綜合征，包括非酒精性單純性脂肪肝（simplesteatosis）、非酒精性脂肪性肝炎（NASH）及其相關(guān)肝硬化（cirrhosis）。近年來，隨著人們生活習(xí)慣和飲食結(jié)構(gòu)的改變，非酒精性脂肪性肝病的患病率日益增高，我國已經(jīng)達(dá)到15.35%，且呈不斷升高趨勢；在西方國家更是高達(dá)20-25%，已成為第一大肝病，因此，加強(qiáng)NAFLD發(fā)病機(jī)制研究和發(fā)現(xiàn)新的防治手段迫在眉睫。

環(huán)狀RNA（circRNA）是一種特殊的內(nèi)源性非編碼RNA，是繼微小RNA及長鏈非編碼RNA后RNA家族的又一研究熱點。近年來，隨著RNA測序技術(shù)和生物信息學(xué)的迅速發(fā)展，人們通過分析大規(guī)模轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)發(fā)現(xiàn)circRNA大量存在，約占真核細(xì)胞轉(zhuǎn)錄本的10%，相較于miRNA和長鏈非編碼RNA，circRNA具有較為顯著的一些特性，如：具有環(huán)狀閉合結(jié)構(gòu)，無polyA尾巴，不易被核酸外切酶降解，能夠更加穩(wěn)定地存在于真核細(xì)胞中，且序列多數(shù)高度保守，具有一定的組織結(jié)構(gòu)特異性，使得circRNA在基因表達(dá)及其他生物學(xué)過程中占據(jù)重要地位。circRNA與多種疾病密切相關(guān)，在疾病的發(fā)生發(fā)展過程中起著至關(guān)重要的調(diào)控作用，因此，circRNA在未來可能會成為一種高效能的臨床診斷標(biāo)志物。

最近有研究證實，肝成纖維細(xì)胞內(nèi)線粒體定位的環(huán)狀RNA 0089762在NAFLD患者中表達(dá)下調(diào)，且與代謝性炎癥有著緊密聯(lián)系，因此環(huán)狀RNA 0089762可抑制代謝性炎癥。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明提供了一種靶向環(huán)狀RNA 0089762的shRNA，并將其應(yīng)用在細(xì)胞實驗中可促進(jìn)代謝性炎癥。

本發(fā)明采用的技術(shù)方案如下：

在第一個方面，本發(fā)明提供一種靶向環(huán)狀RNA 0089762的shRNA，所述shRNA的核苷酸序列如sh-circRNA-1： 5’-CCATGTCGCCTGGTTCTAGTT-3’或sh-circRNA-2：5’-CGCTGCATGTGCCATGTCGTT-3’。

在第二個方面，本發(fā)明提供一種靶向環(huán)狀RNA 0089762的shRNA應(yīng)用于細(xì)胞實驗中促進(jìn)代謝性炎癥。

進(jìn)一步地，所述代謝性炎癥引起的代謝性疾病包括肥胖、2型糖尿病、動脈粥樣硬化或非酒精性脂肪性肝病。

本發(fā)明與現(xiàn)有技術(shù)相比，具有如下有益效果：