[發明專利]瑞德西韋中間體GS-441524的高效液相色譜檢測方法

有效

• 申請號: 202010569725.8
• 申請日: 2020-06-20
• 公開（公告）號: CN111679010B
• 公開（公告）日: 2022-06-28
• 發明（設計）人: 王華;丁惠;邢蓉;陳選榮;王芳田;諶玉梅
• 申請（專利權）人: 鹽城師范學院
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06;G01N30/30;G01N30/32;G01N30/34;G01N30/74;G01N30/89
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

本發明公開了瑞德西韋中間體GS?441524的高效液相色譜檢測方法，它包括以下步驟：a、配制標準溶液；b、采用反向高效液相色譜對標準溶液進行檢測；c、按外標法以峰面積計算樣品中GS?441524的含量。本發明檢測方法，可以使GS?441524和原料及其他雜質在高效液相色譜儀上得到良好的分離；在1.0～20μg/mL內，線性關系良好，R²=0.9997，平均回收率在97.79%~99.90%之間，9次平行試驗精密度RSD值為2.65%。

技術領域

本發明涉及分析化學技術領域，尤其涉及一種瑞德西韋中間體GS-441524的高效液相色譜檢測方法。

背景技術

瑞德西韋（Remdesivir）是一種核苷類似物，是由美國吉利德科學公司開發的一種新型實驗性廣譜抗病毒藥物，能夠抑制依賴RNA的RNA合成酶（RdRp），GS-441524是合成瑞德西韋的重要中間體，CAS的登記號為1191237-69-0，分子式為C12H13N5O4，分子量為291.267，英文名為：(2R，3R，4S，5R)-2-(4-aminopyrrolo[2，1-f][1，2，4]triazin-7-yl)-3，4-dihydroxy-5-(hydroxymethyl)tetrahydrofuran-2-carbonitrile，其化學結構如圖1所示，GS-441524既是瑞德西韋的前體化合物，又是瑞德西韋的活性代謝物。

一般情況下，GS-441524中不可避免地會存在雜質化合物，檢測其中的雜質化合物對于GS-441524以及瑞德西韋的質量控制具有重要的意義，高效液相色譜可反相、正相分類，由固定相和流動相的相對極性決定；其中反相高效液相色譜：采用相對極性較弱的固定相，以極性更強的溶劑作為流動相，常用于分離檢測非極性和極性較弱的化合物，應用廣泛；正相高效液相色譜：采用極性固定相，以相對極性較弱的溶劑作為流動相，常用于分離檢測極性相對較強的化合物。

無論作為瑞德西韋的中間體還是代謝物，又或是其自身直接作為藥物，在分析化學以及藥物分析領域，GS-441524的含量都要求被準確測定，目前國內外文獻尚未見GS-441524含量測定方法的相關報道，因此，亟需研發一種操作簡便、分離度高的圖1所示化合物的檢測方法。

發明內容

本發明的目的在于提供瑞德西韋中間體GS-441524的高效液相色譜檢測方法。

本發明提供的瑞德西韋中間體GS-441524的高效液相色譜檢測方法，包括以下步驟：

步驟a、配制標準溶液：精密稱取0.050g的GS-441524對照品，用甲醇/水（1:9，v/v）溶液溶解，制成濃度為0.2～20μg/mL的溶液，用0.22μm微孔濾膜過濾，得到標準溶液；

步驟b、采用反相高效液相色譜對標準溶液進行檢測，檢測條件為：

色譜柱的固定相：表面鍵合非極性的十八烷基官能團（ODS）的硅膠為填料；

流動相：甲醇和0.2%甲酸水溶液，固定比例1:9（v/v）；

檢測波長：230～320nm；

步驟c、按外標法以峰面積計算樣品中GS-441524的含量。

進一步的，步驟a中，標準溶液的濃度為0.2～20μg/mL。

進一步的，步驟b中，內徑為2.1mm，長度為50～150mm，填料粒徑為1.7～1.8μm。

進一步的，步驟b中，色譜柱為為C18烷基硅烷鍵合硅膠填充色譜柱。

進一步的，步驟b中，用甲醇和0.2%甲酸水溶液兩種流動相作為洗脫劑，其體積比為1:9。

進一步的，步驟b中，檢測器為二極管陣列或紫外檢測器，檢測波長范圍在230～320nm。