[發(fā)明專利]一種再生醫(yī)學(xué)用全密閉式自體骨髓單個核細(xì)胞、血小板快速循環(huán)過濾富集器

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 202010569603.9
• 申請日: 2020-06-20
• 公開（公告）號: CN111821735A
• 公開（公告）日: 2020-10-27
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 劉光旺;馬超;戴尅戎;曲新華;劉珅;高娟;王振飛;孟慶芳;陳濤;黃森
• 申請（專利權(quán)）人: 徐州市中心醫(yī)院
• 主分類號: B01D29/03
• 分類號: B01D29/03;B01D29/56;B01D29/01
• 代理公司: 廣東有知貓知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 44681
• 代理人: 朱親林

本發(fā)明公開了一種再生醫(yī)學(xué)用全密閉式自體骨髓單個核細(xì)胞、血小板快速循環(huán)過濾富集器，包括過濾組件和循環(huán)組件，過濾組件用于獲取所需的細(xì)胞，循環(huán)組件用于向過濾組件循環(huán)通入骨髓血，所述過濾組件包括三級過濾網(wǎng)，過濾孔徑由大到小依次設(shè)置，最大一級過濾網(wǎng)的孔徑用于過濾單個核細(xì)胞，中間一過濾網(wǎng)的級孔徑過濾網(wǎng)用于過濾紅細(xì)胞，最小一級過濾網(wǎng)的用于過濾血小板；循環(huán)組件將骨髓血循環(huán)且依次從最大一級過濾網(wǎng)通過中間一級過濾網(wǎng)最后通過最小一級過濾網(wǎng)。該富集器能夠有效的提高富集效率。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種提取自體單個核細(xì)胞和血小板細(xì)胞的器械，尤其涉及自體骨髓單個核細(xì)胞、血小板快速循環(huán)過濾富集器。

背景技術(shù)

骨髓中富含單個核細(xì)胞，這類細(xì)胞不但具有成骨分化潛能，還可分泌有助于骨與血管再生的細(xì)胞因子,骨髓也含有血小板，血小板活化后可分泌大量生長因子，已有應(yīng)用淋巴細(xì)胞分離液富集單個核細(xì)胞治療心腦缺血障礙性疾病的報道，且取得了較好的效果，基于骨髓單個核細(xì)胞本身含有可向成骨、成血管方向分化的前體細(xì)胞，且此類細(xì)胞可分泌有利于組織修復(fù)的多種生長因子，骨髓單個核細(xì)胞和血小板已成為臨床熱門的組織工程種子細(xì)胞、生長因子來源。但是，臨床細(xì)胞生物治療既需要較高的細(xì)胞純度，又需要足夠的細(xì)胞數(shù)量，因此，必須對骨髓中的單個核細(xì)胞進(jìn)行分選富集，目前國際上應(yīng)用最多的富集法是以Ficoll-Paque為代表的淋巴細(xì)胞分離液密度離心法，但該法細(xì)胞回收效率低下，可導(dǎo)致原有單個核細(xì)胞數(shù)量減少15–30％，進(jìn)而影響療效，而且，目前淋巴細(xì)胞分離液均為實驗室制劑，未獲臨床應(yīng)用許可，生物安全性值得商榷；流式細(xì)胞分選法精確度高、分選速度快，但費用昂貴，對少量細(xì)胞分選困難，分選過程中難以保證無菌要求，免疫磁珠分選法操作簡單、便捷，分離效率高，但同樣價格昂貴、細(xì)胞膜上抗原與抗體發(fā)生結(jié)合可能干擾細(xì)胞功能、機械損傷及磁珠結(jié)合于細(xì)胞上亦可能對細(xì)胞活力產(chǎn)生不利影響。這些富集方法，基于其本身的局限性，很難真正向臨床推廣應(yīng)用，相比上述富集方法而言，我們設(shè)計一種再生醫(yī)學(xué)用全密閉式自體骨髓單個核細(xì)胞、血小板快速循環(huán)過濾富集器，富集的細(xì)胞來自患者自體，無免疫排斥反應(yīng)；細(xì)胞不經(jīng)體外培養(yǎng)，避免了生物學(xué)風(fēng)險；富集過程快速高效不耽誤手術(shù)時間；操作中無化學(xué)試劑的加入，不違背醫(yī)學(xué)倫理。

現(xiàn)有技術(shù)中，針對單個核細(xì)胞的提取主要是吸附過濾，對過濾的過程是單級過濾或是吸附如現(xiàn)有技術(shù)CN108785779A使用多少個過濾盒，但過濾盒均相同，主要是使用吸附材料吸附單個核細(xì)胞。

對單級過濾來說，對骨髓血內(nèi)主要的三種細(xì)胞(單個核細(xì)胞、血小板、紅細(xì)胞)，沒有明確的進(jìn)行分級篩選，這樣效率并不高，富集后混雜的細(xì)胞較多，對于后續(xù)的不管是體外培養(yǎng)還是直接注入患者體內(nèi)都不利于治療效果。

粘附材料如膠原的使用效率不高的，粘附材料使用方式基本有兩類，a、粘附材料作為過濾材料封閉流通管道，承受正壓或是負(fù)壓，b、粘附材料作用填充材料，不做密封性要求。

.作為密封材料時，如現(xiàn)有技術(shù)(CN101469321B)封閉管道，一方面，粘附材料尤其是膜狀材料，尤其是大分子材料如膠原膜，在正負(fù)壓力下，孔隙有變化，會導(dǎo)致部分大尺寸的單個核細(xì)胞穿過孔隙，進(jìn)而降低收集比例和效率。

當(dāng)僅作為填充粘附材料時，如果不承擔(dān)過濾功能，則對材料特性要求較高，基本上依靠材料特性來粘附單個核細(xì)胞。這個時候，問題就很明顯，骨髓血的流速以及時間和材料特性以及材料結(jié)構(gòu)就是富集效率的關(guān)鍵，由于并沒有超高效率粘附材料，就需要使用大量的粘附材料來增加與骨髓血的接觸面積和幾率，或是一定流速下延長循環(huán)時間。第一種選擇，一方面成本提高，另一方面，當(dāng)粘附材料也要填入缺損骨骼時就不適用，因為填入缺損骨骼對粘附材料結(jié)構(gòu)和形成有要求；第二種選擇，富集時間是有限的，最終的選擇是一種妥協(xié)，也就是在一定時間達(dá)到最高的富集效果。

發(fā)明內(nèi)容

本申請實施例通過提供一種一種再生醫(yī)學(xué)用全密閉式自體骨髓單個核細(xì)胞、血小板快速循環(huán)過濾富集器，解決了現(xiàn)有技術(shù)中單個核細(xì)胞富集效率低，富集比例低，成本高的問題，實現(xiàn)了富集效率高、富集比例高，成本低廉，后續(xù)操作方便。