[發(fā)明專利]一種血液中葡萄糖的檢測方法

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• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202010567258.5
• 申請(qǐng)日: 2020-06-19
• 公開（公告）號(hào): CN111735802A
• 公開（公告）日: 2020-10-02
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 薛彬;王丹
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 深圳技術(shù)大學(xué)
• 主分類號(hào): G01N21/64
• 分類號(hào): G01N21/64
• 代理公司: 北京三聚陽光知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11250
• 代理人: 周淑歌

本發(fā)明屬于分析檢測技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種血液中葡萄糖的檢測方法。該方法中葡萄糖氧化酶與二價(jià)亞鐵離子，在血糖存在的情況下，產(chǎn)生的雙氧水進(jìn)一步與二價(jià)亞鐵離子發(fā)生芬頓反應(yīng)產(chǎn)生強(qiáng)氧化能力的羥基自由基，從而氧化稀土Er³⁺納米粒子表面的吲哚菁綠(ICG)分子。ICG被氧化后無法實(shí)現(xiàn)對(duì)稀土納米粒子的敏化增強(qiáng)發(fā)光，從而降低了稀土納米粒子的近紅外區(qū)的發(fā)光。根據(jù)近紅外發(fā)光強(qiáng)度猝滅的情況，實(shí)現(xiàn)對(duì)待檢測樣品中是否含有血糖的超靈敏檢測，由于該方法中激發(fā)激光與發(fā)射激光均位于生物窗口內(nèi)的近紅外波段，避免了可見光背景熒光的干擾，具有熒光背景噪聲低，成本低，方法簡單，便于操作等優(yōu)點(diǎn)。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于分析檢測技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種血液中葡萄糖的檢測方法。

背景技術(shù)

葡萄糖在生物學(xué)領(lǐng)域具有重要地位，是活細(xì)胞的能量來源和新陳代謝的中間產(chǎn)物，是生物體內(nèi)主要的供能物質(zhì)，且對(duì)人體內(nèi)葡萄糖的含量檢測是醫(yī)學(xué)診斷的重要標(biāo)準(zhǔn)，頻繁的檢測和嚴(yán)格控制血糖水平是有效管理糖尿病和減少相關(guān)并發(fā)癥必不可少的手段。

目前，人們已經(jīng)研制出多種光化學(xué)傳感法檢測葡萄糖，包含電化學(xué)傳感，質(zhì)譜，熒光檢測法等等。其中，熒光傳感檢測方法具有檢測快、操作簡單的優(yōu)勢，因而成為目前研究的比較熱門的檢測方法。熒光傳感檢測方法的性能(如選擇性、靈敏度、穩(wěn)定性)取決于熒光材料或熒光探針的設(shè)計(jì)。熒光傳感檢測葡萄糖有兩種模式：基于葡萄糖與探針分子作用，導(dǎo)致修飾的熒光基團(tuán)的淬滅；基于探針材料本身熒光的淬滅或者增強(qiáng)。前一種模式常用于生物傳感領(lǐng)域，后一種模式多用于化學(xué)傳感領(lǐng)域。與生物傳感檢測法相比，基于探針材料本身熒光增強(qiáng)或淬滅的化學(xué)傳感檢測法的穩(wěn)定性更好，檢測環(huán)境(比如pH)對(duì)傳感性能的影響小。這種熒光化學(xué)傳感檢測法主要基于無機(jī)納米材料，所述材料具有良好的生物兼容性、化學(xué)穩(wěn)定性、良好的熒光發(fā)光性能、類酶性和其它催化性能，被廣泛用于熒光傳感領(lǐng)域。

例如，中國專利文獻(xiàn)CN104730052A，公開了一種基于親水性上轉(zhuǎn)換納米NaYF₄的過氧化氫和葡萄糖傳感器。所述的稀土上轉(zhuǎn)換納米顆粒為NaYF4:Yb³⁺，Er³⁺；基于親水性上轉(zhuǎn)換納米顆粒的傳感器檢測葡萄糖的步驟為：a.分別配制葡萄糖氧化酶及葡萄糖溶液；b.將葡萄糖與葡萄糖氧化酶溶液混合，在37℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)10-30min，最終形成葡萄糖氧化酶-葡萄糖溶液；c.將上述制備的基于親水性上轉(zhuǎn)換納米顆粒的傳感器溶液加入葡萄糖氧化酶-葡萄糖溶液中，再加入緩沖溶液，常溫下混合均勻后進(jìn)行光譜測試；d.固定激發(fā)光波長為980nm，收集400-700nm波長范圍內(nèi)的光譜圖。該專利文獻(xiàn)中通過選用稀土上轉(zhuǎn)換納米顆粒有效的避免了激發(fā)光造成的背景熒光干擾，然而其使用的是400-700nm的可見光發(fā)射作為檢測波長，仍可激發(fā)一定的背景熒光，不利于低噪聲的血糖檢測。

因此，研發(fā)一種近紅外光激發(fā)，同時(shí)檢測近紅外光發(fā)射(尤其是近紅外二區(qū)的范圍1000到1700nm)的檢測方法，實(shí)現(xiàn)熒光背景低的血糖檢測方法，成為人們亟待解決的問題。

發(fā)明內(nèi)容

因此，本發(fā)明要解決的技術(shù)問題在于克服現(xiàn)有技術(shù)中的可見光發(fā)射作為檢測波長會(huì)激發(fā)一定的背景熒光干擾血糖檢測的缺陷，從而提供一種血液中葡萄糖的檢測方法。

為此，本發(fā)明提供如下技術(shù)方案：

本發(fā)明提供一種血液中葡萄糖的檢測方法，在檢測體系中添加吲哚菁綠修飾的Er³⁺摻雜納米粒子。

進(jìn)一步地，本發(fā)明提供的血液中葡萄糖的檢測方法，包括以下步驟：

將吲哚菁綠修飾的Er³⁺摻雜的納米粒子，葡萄糖氧化酶，亞鐵離子混合均勻，得到檢測體系；

在所述檢測體系中加入待檢測血糖樣品，進(jìn)行光譜測試，其中，激發(fā)激光和發(fā)射激光均采用近紅外激光。